杨金梅
- 作品数：8 被引量：35H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 酪酸梭菌通过调节长链非编码RNAs的表达变化促进结肠癌细胞SW480的凋亡被引量：3
- 2015年
- 目的人结肠癌细胞SW480与酪酸梭菌(Clostridium butyricum,CB)共培养后,检测SW480细胞lncRNAs和mRNAs的应答变化及诱导凋亡的机制。方法 1.5×107CFU/m L酪酸梭菌处理结肠癌细胞48 h后,提取总RNA,对其逆转录RNA并作荧光标记,与安捷伦人lncRNAs/mRNAs芯片杂交。生物信息学预测表达差异的lncRNAs靶基因,并利用DAVID6.7对其进行信号通路富集度分析。双苯并咪唑Hoechst 33258(bisbenzimlde)和Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡。结果与SW480对照组相比,共培养酪酸梭菌的结肠癌细胞SW480中的lncRNAs有50个表达上调和152个表达下调的基因,mRNAs中有738个表达上调和1 088个表达下调的基因。对差异表达的基因进行信号通路富集度分析,显示参与肿瘤相关的信号传导途径有MAPK信号通路、细胞因子-细胞因子、JAK-STAT信号、NF-κB的激活、VEGF信号通路和p53信号通路。酪酸梭菌能显著促进结肠癌细胞凋亡。结论酪酸梭菌通过调节lncRNAs的表达变化促进结肠癌细胞SW480凋亡。
- 杨晓容张德纯杨金梅李世超刘胜男郭亚楠
- 关键词：酪酸梭菌结肠癌SW480细胞长链非编码RNA
- 多药耐药纹带棒杆菌的重复序列PCR分型与耐药机制的研究被引量：2
- 2015年
- 目的对引起医院感染暴发的多药耐药纹带棒杆菌(MDRCs)进行重复序列PCR研究,为MDRCs的亲缘性分析提供可靠的方法,并对MDRCs的耐药机制进行初步研究。方法用基因外重复回文序列-PCR(REPPCR)和肠细菌基因间共有重复序列-PCR(ERIC-PCR)技术对临床分离的32株MDRCs进行分型研究,根据细菌的耐药表型选择对应的耐药基因进行检测。结果 REP-PCR和改良ERIC-PCR分型技术分别将32株MDRCs分为6型和8型,两种方法的分辨指数分别为0.585和0.696;所有菌株中与大环内酯类抗菌药物相关的核糖体甲基化酶基因(ermX)检出率为90.6%,与四环素耐药相关的核糖体保护蛋白基因(tetW)的检出率为100.0%,菌株耐药基因的检出与耐药表型完全相符。结论重复序列PCR(rep-PCR)分型方法可用于纹带棒杆菌的分型研究及医院感染MDRCs的亲缘性分析,ERIC-PCR的分辨能力优于REP-PCR;中国重庆地区的MDRCs分别介导ermX和tet(W)基因对大环内酯类和四环素类抗菌药物高水平耐药。
- 李科张德纯张名均杨金梅杨小容刘胜男李世超
- 关键词：多药耐药
- 多重耐药纹带棒状杆菌的耐药机制研究被引量：12
- 2014年
- 目的研究多重耐药纹带棒状杆菌(MDR-Cs)的耐药机制。方法用微量肉汤稀释法检测临床分离的48株MDR-Cs的最低抑菌浓度(MIC);聚合酶连反应检测菌株的核糖体甲基化酶基因(ermX)、核糖体保护蛋白基因(tet(W))、DNA螺旋酶A亚单位基因(gyrA)和接合型转座子Tn1545整合酶基因(intTn)、L,D-转肽酶基因(ldt1/2),并测序分析。结果根据2007年CLSI M45文件的标准检测14种抗菌药物的敏感性,所有被测菌株均表现出多重耐药;ermX、tet(W)和intTn基因检出率分别为93.8%、100%和100%;与标准菌株比对,所有菌株的gyrA基因序列均表现为以间隔3个氨基酸的丝氨酸和天冬氨酸分别突变为苯丙氨酸和丙氨酸的双点突变;未检出ldt1/2。结论中国重庆地区的MDR-Cs对青霉素、Ⅲ、Ⅳ代头孢菌素、四环素、喹诺酮类和复方磺胺甲噁唑表现出全耐药,对万古霉素、利奈唑胺表现为全敏感;菌株介导ermX和tet(W)基因分别对红霉素和四环素耐药,介导gyrA基因双位点突变对喹诺酮类高水平耐药,所有菌株均携带转座子Tn1545整合酶intTn基因。
- 李科张德纯张名均杨金梅杨晓容刘胜男
- 关键词：多重耐药耐药机制
- 酪酸梭菌诱导结肠癌SW-480细胞凋亡及作用机制被引量：6
- 2013年
- 目的探讨酪酸梭菌(Clostridium butyricum,CB)诱导人结肠癌SW-480细胞凋亡的作用及机制。方法采用不同浓度的酪酸梭菌(1.5×103、1.5×104、1.5×105、1.5×106、1.5×107、1.5×108CFU/mL)在不同作用时间(24、48、72、96 h)处理结肠癌SW-480细胞后,CCK8法检测CB对SW-480细胞的增殖抑制。电镜观察CB对SW-480细胞形态的影响。Annexin V-FITC/PI双标法检测细胞凋亡。Caspase试剂盒检测SW-480细胞中Caspase-3和Caspase-9的活性。Western blot法检测SW-480细胞Bax和Bcl-2凋亡蛋白表达的变化。结果酪酸梭菌对SW-480细胞的生长抑制作用呈明显的时间-剂量依赖性;菌液浓度为1.5×107CFU/mL和1.5×108CFU/mL的酪酸梭菌处理后的SW-480细胞形成典型的凋亡小体;酪酸梭菌(1.5×107CFU/mL和1.5×108CFU/mL)处理能显著增强SW-480细胞Caspase-3和Caspase-9的活性,促进SW-480细胞凋亡(P<0.01);随着菌液浓度的增加,凋亡蛋白Bax的表达增强,而抑凋亡蛋白Bcl-2的表达减弱。结论酪酸梭菌可诱导SW-480细胞凋亡,其作用机制与凋亡相关基因Bax、Bcl-2和caspase-3、caspase-9的表达有关。
- 杨金梅张德纯李科刘胜男朱辉
- 关键词：酪酸梭菌结肠癌SW-480细胞凋亡
- 酪酸梭菌培养上清液通过下调TLR4/NF-κB信号通路抑制SW-480细胞增殖被引量：8
- 2016年
- 目的研究酪酸梭菌培养上清液(C.butyricum culture supernatant;C.b.cs)对结肠癌SW-480细胞增殖的抑制作用,并探讨C.b.cs中可能的活性成分及相关分子机制。方法用C.b.cs处理后SW-480细胞,CCK-8及FCM检测细胞的增殖和凋亡。HPLC检测C.b.cs中主要的有机酸含量。Western blot及RT-q PCR检测经过C.b.cs和丁酸处理后的TLR4的表达。用TLR4配体脂多糖(LPS)激活TLR4,再用C.b.cs和丁酸处理细胞,观察TLR4和NF-κB的表达。结果 C.b.cs呈浓度依赖性地抑制SW-480增殖,并能诱导凋亡和G0/G1期阻滞。HPLC检测C.b.cs中乙酸和丁酸的含量分别为9.27 g/L和4.53 g/L。C.b.cs和丁酸可下调TLR4的表达(P<0.01),并下调TLR4的下游基因NF-κB的表达(P<0.05)。LPS激活TLR4的表达(P<0.01)后,C.b.cs和丁酸下调TLR4和NF-κB的表达(P<0.05)。结论 C.b.cs通过下调TLR4/NF-κB通路抑制SW-480细胞增殖,丁酸可能是发挥抑制作用的活性成分之一。
- 李世超张德纯杨金梅杨晓容郭亚楠
- 关键词：酪酸梭菌TOLL样受体4丁酸
- 正常人粪便中酪酸梭菌的分离与分子鉴定被引量：3
- 2013年
- 目的肠道益生菌在人体内发挥重要的生理作用,探明肠道益生菌群的作用对人体有着十分重要的意义。运用TSN培养基,从健康正常人的粪便中分离培养、筛选出1株肠道菌株。方法从健康正常人粪便中分离与纯化肠道细菌,获得一株具有特殊作用的细菌,通过对该菌的细菌培养、菌落形态观察、革兰染色镜检、分离纯化培养、生化试验并结合16S rDNA方法进行了鉴定。结果该菌为革兰阳性梭状芽胞杆菌,属于梭菌属,分离培养出的1株菌株为酪酸梭菌亚种JMY1。结论本实验为进一步研究酪酸梭菌的作用及其是否对结肠癌发挥作用奠定了实验基础并提供了一定的理论依据。
- 杨金梅张德纯张德纯李科
- 关键词：正常人粪便酪酸梭菌分子鉴定
- 功能性米酒抗疲劳作用的研究被引量：4
- 2012年
- 探讨功能性米酒对小鼠的抗疲劳效应。将240只雄性昆明小鼠随机分为5组,每组48只。空白对照组给予生理盐水(50mL/kgbw),实验对照组给予市售普通米酒(50mL/kgbw),高、中、低剂量组每天分别给与剂量为100、50、25mL/kgbw的功能性米酒。30天后,测定各组小鼠体重、负重游泳时间、血尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、肝糖原和血乳酸(Lactic Acid,LAC)的水平,所得结果均进行组间比较分析。结果显示:高、中剂量功能性米酒能显著延长小鼠负重游泳时间、提高肝糖原含量(p<0.01)、降低运动后血尿素氮和血清乳酸的水平(p<0.01或p<0.05),表明功能性米酒具有抗小鼠运动性疲劳的作用。
- 朱辉张德纯杨金梅
- 关键词：双歧杆菌抗疲劳小鼠
- 酪酸梭菌的分离鉴定及其对结肠癌细胞的作用与机制探讨
- 目的:肠道菌在人体内发挥重要的生理作用，探明肠道菌群的作用对人体有着十分重要的意义。运用TSN培养基，从健康正常人的粪便中分离培养、筛选出1株肠道菌株，并采用相关的方法对其进行分子鉴定为酪酸梭菌(Clostridium ...
- 杨金梅
- 关键词：酪酸梭菌分子鉴定结肠癌细胞凋亡
