- 酪酸梭菌诱导结肠癌SW-480细胞凋亡及作用机制被引量：6
- 2013年
- 目的探讨酪酸梭菌(Clostridium butyricum,CB)诱导人结肠癌SW-480细胞凋亡的作用及机制。方法采用不同浓度的酪酸梭菌(1.5×103、1.5×104、1.5×105、1.5×106、1.5×107、1.5×108CFU/mL)在不同作用时间(24、48、72、96 h)处理结肠癌SW-480细胞后,CCK8法检测CB对SW-480细胞的增殖抑制。电镜观察CB对SW-480细胞形态的影响。Annexin V-FITC/PI双标法检测细胞凋亡。Caspase试剂盒检测SW-480细胞中Caspase-3和Caspase-9的活性。Western blot法检测SW-480细胞Bax和Bcl-2凋亡蛋白表达的变化。结果酪酸梭菌对SW-480细胞的生长抑制作用呈明显的时间-剂量依赖性;菌液浓度为1.5×107CFU/mL和1.5×108CFU/mL的酪酸梭菌处理后的SW-480细胞形成典型的凋亡小体;酪酸梭菌(1.5×107CFU/mL和1.5×108CFU/mL)处理能显著增强SW-480细胞Caspase-3和Caspase-9的活性,促进SW-480细胞凋亡(P<0.01);随着菌液浓度的增加,凋亡蛋白Bax的表达增强,而抑凋亡蛋白Bcl-2的表达减弱。结论酪酸梭菌可诱导SW-480细胞凋亡,其作用机制与凋亡相关基因Bax、Bcl-2和caspase-3、caspase-9的表达有关。
- 杨金梅张德纯李科刘胜男朱辉
- 关键词：酪酸梭菌结肠癌SW-480细胞凋亡
- 椰汁体外促双歧杆菌生长作用的研究被引量：5
- 2012年
- 目的探讨椰汁体外对4株双歧杆菌生长的促进作用。方法利用4株常见的双歧杆菌作为受试菌,以菌液D(600)值、pH值、活菌计数以及发酵牛乳凝乳时间和乳液pH值等为指标,来研究椰汁对4种双歧杆菌增殖和活性的促进作用。结果按照25%(V/V)添加椰汁时,4株双歧杆菌菌体浓度(光密度值及活菌计数)均明显高于空白对照组(P<0.05),其中两歧双歧杆菌、青春双歧杆菌以及长双歧杆菌甚至高于双歧因子阳性对照组﹙P<0.05﹚。4株双歧杆菌发酵含有椰汁的牛乳后,两歧双歧杆菌、青春双歧杆菌和长双歧杆菌的凝乳时间均较空白对照组和阳性对照组明显缩短﹙P<0.05﹚,婴儿双歧杆菌却未出现凝乳现象,但4株双歧杆菌pH值均低于空白对照组和阳性对照组(P<0.05)。结论椰汁有可能成为一种良好的双歧因子,并可作为双歧杆菌的天然培养基。
- 朱辉张德纯王春耀刘明方刘胜男
- 关键词：椰汁双歧杆菌促生长作用双歧因子
- 与钙化相关的骨基质蛋白研究的现状与展望被引量：4
- 2012年
- 生物矿化(biomineralization)不仅包括正常情况下骨骼和牙齿的钙化也包括各种疾病时的钙化,如血管钙化、胎盘钙化,还包括珊瑚和贝类以及纳米细菌等不同物种的钙化。研究表明与骨骼钙化的相关的蛋白不仅发现于骨骼的钙化中,也同样发现于其他组织的钙化过程和其他物种的矿化过程中,因此本文就与骨骼钙化的相关蛋白做一综述,以期为进一步研究纳米细菌自身的矿化机制,探讨其引起的相关疾病的致病机制以及为进一步实验筛选合适的标志蛋白。
- 刘胜男张德纯
- 关键词：生物矿化骨基质蛋白纳米细菌
- 纳米细菌促进乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡
- 2013年
- 目的观察纳米细菌(nanobacteria,NB)与纳米羟基磷灰石颗粒(nano hydroxyapatite,nHAP)对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响。方法实验分为NB组、nHAP组和正常对照组,其中NB组和nHAP组悬液的浓度均为2麦氏浊度(M),正常对照组仅加培养基,与乳腺癌MDA-MB-231细胞共同培养24、48、72 h,通过CCK-8检测其对细胞的毒性作用;培养12、24、48、72 h,取上清,经全自动生化分析仪测定LDH活性;作用72 h,经流式细胞仪(flow cytometry,FCM)测定其凋亡率,透射电镜观察其超微结构的变化情况。结果 CCK-8显示,NB组24、48、72 h对细胞的抑制作用均强于nHAP组和正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01);NB组LDH含量在24、48、72 h时均高于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);24、48、72 h均高于nHA组,但仅24、48 h有统计学差异(P<0.05)。nHAP组LDH活性仅在72 h与正常对照组比较有统计学差异(P<0.01);72 h后NB组细胞凋亡率高于nHAP组,差异有统计学意义(P<0.01);透射电镜下观察,NB组可以看到胞质空泡样变,核固缩以及明显的凋亡小体,nHAP组未见明显异常。结论 NB可以抑制乳腺癌细胞的生长,促进其发生凋亡,其导致细胞凋亡的成分不仅仅是NB羟基磷灰石的外壳,也可能与NB的其他组分或代谢产物有关。
- 刘胜男张德纯张名均郭亚楠杨晓容许舸
- 关键词：纳米细菌纳米羟基磷灰石凋亡乳腺癌
- 纳米细菌的分离鉴定及其钙化机制的研究
- 目的:从钙化胎盘组织及其脐带血标本中分离鉴定纳米细菌（Nanobacteria，NB），经鉴定的NB作用于乳腺癌MDA-MB-231细胞，观察其对细胞的影响，并测定细胞内与钙化相关的骨形态蛋白-2(Bonemorphog...
- 刘胜男
- 关键词：纳米细菌胎盘钙化BCL-2蛋白纳米羟基磷灰石BAX蛋白
- 酪酸梭菌通过调节长链非编码RNAs的表达变化促进结肠癌细胞SW480的凋亡被引量：3
- 2015年
- 目的人结肠癌细胞SW480与酪酸梭菌(Clostridium butyricum,CB)共培养后,检测SW480细胞lncRNAs和mRNAs的应答变化及诱导凋亡的机制。方法 1.5×107CFU/m L酪酸梭菌处理结肠癌细胞48 h后,提取总RNA,对其逆转录RNA并作荧光标记,与安捷伦人lncRNAs/mRNAs芯片杂交。生物信息学预测表达差异的lncRNAs靶基因,并利用DAVID6.7对其进行信号通路富集度分析。双苯并咪唑Hoechst 33258(bisbenzimlde)和Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡。结果与SW480对照组相比,共培养酪酸梭菌的结肠癌细胞SW480中的lncRNAs有50个表达上调和152个表达下调的基因,mRNAs中有738个表达上调和1 088个表达下调的基因。对差异表达的基因进行信号通路富集度分析,显示参与肿瘤相关的信号传导途径有MAPK信号通路、细胞因子-细胞因子、JAK-STAT信号、NF-κB的激活、VEGF信号通路和p53信号通路。酪酸梭菌能显著促进结肠癌细胞凋亡。结论酪酸梭菌通过调节lncRNAs的表达变化促进结肠癌细胞SW480凋亡。
- 杨晓容张德纯杨金梅李世超刘胜男郭亚楠
- 关键词：酪酸梭菌结肠癌SW480细胞长链非编码RNA
- 椰汁体外抑菌效应的研究
- 2012年
- 目的研究椰汁对常见致病菌的体外抑菌效应。方法采用纸片扩散法(K-B法)、试管稀释法(MIC法)、吸光度值测定法和生长曲线法来观察椰汁对常见致病菌的体外抑菌效应。结果椰汁对4种常见致病菌的生长均表现出抑制效应,尤其对伤寒沙门菌的抑制作用最强。结论椰汁对常见致病菌表现出一定的抑菌效应。
- 朱辉张德纯刘明方王春耀刘胜男
- 关键词：椰汁体外
- 多药耐药纹带棒杆菌的重复序列PCR分型与耐药机制的研究被引量：2
- 2015年
- 目的对引起医院感染暴发的多药耐药纹带棒杆菌(MDRCs)进行重复序列PCR研究,为MDRCs的亲缘性分析提供可靠的方法,并对MDRCs的耐药机制进行初步研究。方法用基因外重复回文序列-PCR(REPPCR)和肠细菌基因间共有重复序列-PCR(ERIC-PCR)技术对临床分离的32株MDRCs进行分型研究,根据细菌的耐药表型选择对应的耐药基因进行检测。结果 REP-PCR和改良ERIC-PCR分型技术分别将32株MDRCs分为6型和8型,两种方法的分辨指数分别为0.585和0.696;所有菌株中与大环内酯类抗菌药物相关的核糖体甲基化酶基因(ermX)检出率为90.6%,与四环素耐药相关的核糖体保护蛋白基因(tetW)的检出率为100.0%,菌株耐药基因的检出与耐药表型完全相符。结论重复序列PCR(rep-PCR)分型方法可用于纹带棒杆菌的分型研究及医院感染MDRCs的亲缘性分析,ERIC-PCR的分辨能力优于REP-PCR;中国重庆地区的MDRCs分别介导ermX和tet(W)基因对大环内酯类和四环素类抗菌药物高水平耐药。
- 李科张德纯张名均杨金梅杨小容刘胜男李世超
- 关键词：多药耐药
- 多重耐药纹带棒状杆菌的耐药机制研究被引量：12
- 2014年
- 目的研究多重耐药纹带棒状杆菌(MDR-Cs)的耐药机制。方法用微量肉汤稀释法检测临床分离的48株MDR-Cs的最低抑菌浓度(MIC);聚合酶连反应检测菌株的核糖体甲基化酶基因(ermX)、核糖体保护蛋白基因(tet(W))、DNA螺旋酶A亚单位基因(gyrA)和接合型转座子Tn1545整合酶基因(intTn)、L,D-转肽酶基因(ldt1/2),并测序分析。结果根据2007年CLSI M45文件的标准检测14种抗菌药物的敏感性,所有被测菌株均表现出多重耐药;ermX、tet(W)和intTn基因检出率分别为93.8%、100%和100%;与标准菌株比对,所有菌株的gyrA基因序列均表现为以间隔3个氨基酸的丝氨酸和天冬氨酸分别突变为苯丙氨酸和丙氨酸的双点突变;未检出ldt1/2。结论中国重庆地区的MDR-Cs对青霉素、Ⅲ、Ⅳ代头孢菌素、四环素、喹诺酮类和复方磺胺甲噁唑表现出全耐药,对万古霉素、利奈唑胺表现为全敏感;菌株介导ermX和tet(W)基因分别对红霉素和四环素耐药,介导gyrA基因双位点突变对喹诺酮类高水平耐药,所有菌株均携带转座子Tn1545整合酶intTn基因。
- 李科张德纯张名均杨金梅杨晓容刘胜男
- 关键词：多重耐药耐药机制
- 钙化胎盘及脐带血中纳米细菌的形态学观察被引量：3
- 2013年
- 目的研究纳米细菌(nanobacteria,NB)的分布,寻求检测胎盘钙化NB感染的更好组织来源。方法收集孕妇胎盘钙化组织和脐带血20例,并以20例正常胎盘组织作对照,分离培养NB;用革兰染色和茜素红染色法、扫描电镜和透射电镜进行形态学鉴定。结果培养沉淀物符合NB的特性。脐带血NB分离率为80%(16/20),钙化胎盘组织为65%(13/20),均明显高于正常胎盘组织的10%(2/20),χ2分别为12.07、9.09,P均<0.01;脐带血与钙化胎盘组织比较,差异无统计学意义(χ2=1.33,P>0.05)。油镜下脐带血和钙化胎盘组织分离的NB为球状或球杆状,形态相似;茜素红染色脐带血中NB较多且聚集成簇;透射电镜和扫描电镜下NB呈球形,大小为80～500 nm,并可见毛刺结构。结论胎盘钙化与NB感染有关,脐带血适用于检测钙化胎盘的NB感染。
- 刘胜男张德纯张名均郭亚楠杨晓容杨顺杰
- 关键词：纳米细菌胎盘钙化脐带血
