任碧轩
- 作品数:30 被引量:77H指数:5
- 供职机构:川北医学院分子生物学研究所更多>>
- 发文基金:四川省应用基础研究计划项目四川省教育厅资助科研项目教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 效应分子Map、EspF在致病性大肠杆菌致细胞线粒体功能障碍中的作用
- 2009年
- 用自杀质粒、基因等位交换方法构建致病性大肠杆菌(EPEC)效应分子Map或EspF缺失删除株Δmap、ΔespF和ΔmapespF,并用PCR和蛋白印迹技术(Western blot)对删除株进行鉴定;用线粒体膜电位(MMP)检测试剂盒(JC-1)检测删除株感染HeLa细胞后细胞MMP改变。试验结果表明,Δmap、ΔespF和ΔmapespF等删除株成功构建,效应分子Map和EspF可以单独或协同引起细胞线粒体功能障碍。
- 杨健朱红任碧轩
- 关键词:线粒体膜电位线粒体功能障碍
- 胱抑素B在肿瘤中的表达特征
- 胱抑素B为溶酶体半胱氨酸蛋白酶内源性抑制物,抑制高活性的半胱氨酸蛋白酶所致细胞外基质的降解和基底膜的破坏,与阻止肿瘤的侵袭和转移有关。先前我们以消减抑制杂交技术从食道癌和癌旁正常组织中筛选差异表达基因时,发现食道癌组织中...
- 任碧轩冯莉谢勇恩王朝莉李丽敬保迁
- 重组P53基因转染的肝癌细胞ICAM-1分子的表达被引量:1
- 2004年
- 杨晓红唐恩洁任碧轩
- 关键词:人肝癌细胞系细胞间黏附分子-1
- 干扰素及Fas抗体对肝癌细胞的细胞毒性研究
- 1999年
- 应用基因重组人干扰素γ和抗Fas抗体体外处理人肝癌细胞系HePG-2,采用MTT法检测各处理组和对照组细胞的凋亡。结果表明:IFN-γ诱导HePG-224h后,再加入Fas抗体,发现对HePG-2细胞的细胞毒作用显著高于IFN-γ和Fas抗体单独作用,提示IFN-γ能促进抗Fas抗体对肝癌细胞的细胞毒性,为IFN-γ协同Fas抗体治疗肿瘤提供了一定的实验依据。
- 杨晓红任碧轩
- 关键词:IFN-ΓHEPG-2MTT法肝癌
- RNAi抑制胰腺癌细胞survivin表达的实验研究
- 2008年
- 目的用RNA i方法抑制胰腺癌细胞PANC-1中凋亡抑制蛋白survivin的表达。方法用免疫细胞化学技术和RT-PCR检测胰腺癌细胞PANC-1中凋亡抑制蛋白survivin的表达,构建针对survivin基因的siRNA表达载体并进行酶切和测序鉴定,用脂质体转染胰腺癌细胞PANC-1,RT-PCR初步分析siRNA表达载体对survivin表达的抑制作用。结果survivin在胰腺癌细胞PANC-1中有较高表达,siRNA表达载体可以有效的抑制survivin的表达,抑制率达60%。结论用RNAi表达载体可以有效抑制胰腺癌细胞PANC-1中凋亡抑制蛋白survivin的表达。
- 杨健张仁刚陈大斌任碧轩敬保迁
- 关键词:RNAI胰腺癌SURVIVIN
- 重组P_(53)基因在HepG-2中的表达及作用被引量:2
- 1999年
- 为进一步探索正常P53 对肿瘤细胞增殖的抑制作用,本文用磷酸钙DNA共沉淀法,将本室构建的PXT1P53 真核表达细胞转移至HepG2 肝癌细胞系内,经斑点杂交技术和间接免疫荧光技术证实,外源性P53 基因已在HepG2 细胞中稳定表达,导入的P53基因亦能抑制HepG2 肝癌细胞系增殖并诱导其凋亡。实验结果提示正常P53 基因可成为治疗不同肿瘤的重要靶分子之一。
- 任碧轩李仁冯莉唐恩洁杨晓红赵明才杨健张紫福张艳艳魏祥云
- 关键词:HEPG-2细胞肿瘤基因治疗
- S1P1真核表达载体的构建及在HEK293细胞膜上的表达被引量:3
- 2008年
- 目的构建含人Ⅰ型1-磷酸鞘氨醇受体(SIPI)-全长cDNA序列及HA和/或EGFP标签的真核表达载体,并观察其在HEK293细胞上的表达。方法合成2条HA寡核苷酸,克隆入S1P1-Myc-EGFP-N1载体。以HA-S1P1-Myc-EGFP-N1为模板,用PCR的方法扩增HA-S1P1并克隆入pcDNA3.1(+)载体。限制性酶切消化、PCR、测序的方法鉴定,载体经Polyfect转染入HEK293细胞。G418筛选出稳定细胞株。用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测S1P1在HEK293细胞上的表达。结果限制性酶切消化、PCR、测序结果证实载体构建成功。S1P1表达在HEK293稳定细胞株的表面。结论成功构建带有HA和/或EGFP标签的S1P1真核表达载体,表面表达S1P1的HEK293稳定细胞株可作为我们进一步研究的细胞模型。
- 胡为民杨健唐恩洁敬保迁任碧轩
- 关键词:真核表达载体HEK293细胞
- S1P5对食管癌细胞Eca109黏附能力的影响被引量:1
- 2010年
- 目的研究S1P5对食管鳞癌Eca109细胞黏附能力的影响。方法从人正常食管黏膜上皮克隆S1P5基因,构建表达载体S1P5-EGFP,转染Eca109细胞,经G418筛选,获得S1P5-EGFP/Eca109稳定细胞株。以对照载体Control-EGFP转染的Eca109细胞作为对照,荧光显微镜下观察细胞的形态,用黏附试验评价其黏附能力。结果成功构建S1P5-EGFP和Control-EGFP载体并转染Eca109细胞获得稳定细胞株。S1P5表达于细胞膜并使细胞略呈梭形改变。S1P5过表达致Eca109细胞黏附能力明显低于对照(P<0.05),并且不受其配体1-磷酸鞘氨醇(S1P)的影响。结论 S1P5组成性抑制Eca109细胞的黏附能力,食管癌细胞可能通过下调S1P5的表达增强其黏附。
- 胡为民李丽唐恩洁敬保迁冯莉王朝莉任碧轩
- 关键词:食管癌ECA109细胞
- S1P1受体细胞模型的构建及其功能特性的初步研究被引量:1
- 2008年
- 目的构建1型1-磷酸鞘氨醇受体(S1P1)的细胞模型,初步探讨其介导的功能特性。方法用PolyFect,将包含全长人S1P1编码区与EGFP融合基因的载体HA-S1P1-Myc-EGFP-N1转入CHO细胞,经G418筛选,获得S1P1-EGFP-CHO稳定细胞株。以空载体pEGFP-N1转染的CHO稳定细胞株作为阴性对照,镜下观察细胞的形态。100nM FTY720处理S1P1-EGFP-CHO细胞5、24小时后用荧光显微镜观察S1P1在细胞上的表达。结果成功构建S1P1-EGFP-CHO细胞模型,表达S1P1的细胞变圆,FTY720导致该细胞模型的S1P1长时间内化。结论S1P1-EGFP-CHO细胞可作为S1P1功能特性研究的细胞模型,S1P1能使细胞变圆,FTY720能导致S1P1长时间内化。
- 胡为民唐恩洁杨健敬保迁任碧轩
- 关键词:FTY720内化CHO细胞
- bcl-2与GM-CSF的LdsRNA对肿瘤细胞生长的抑制作用
- 2005年
- 目的 探索bcl-2-9GM-CSF的长链dsRNA(Longer doublestrand RNA,LdsRNA)对肿瘤细胞生长的抑制作用。方法使用体外转录法制备地高辛标记的bcl一2和GM—CSF基因的LdsRNA,转染THP1、HL-60和K562髓系白血病细胞系,分别以MTT法、免疫组化、免疫荧光技术和紫外分光光度计检测细胞LdsRNA转染水平,细胞增殖,特异性bcl-2蛋白表达和细胞总蛋白含量。结果LdsRNA能显著抑制THP1细胞增殖(P<0.05)和蛋白质合成,对HL-60和K562细胞系也有一定的抑制作用。结论LdsRNA能抑制肿瘤细胞的增殖,为以后利用LdsRNA用于肿瘤的治疗奠定一定的理论基础。
- 唐恩洁杨健杜冰任碧轩冯莉李丽
- 关键词:肿瘤细胞生长GM-CSFK562细胞系白血病细胞系地高辛标记RNA转染