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高秀峰: 作品数：69 被引量：188H指数：6; 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院更多>>; 发文基金：教育部留学回国人员科研启动基金国家基础科学人才培养基金更多>>; 相关领域：医药卫生理学轻工技术与工程生物学更多>>

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同时测定血清中4种电解质的流动注射微电极串联电化学自动分析系统被引量：5: 2011年; 基于流动注射-微电极串联的动态电化学技术,建立了能快速、自动、同时测定血清中K+,Na+,Cl-和Ca2+的分析方法和系统,并成功用于血清样品的测定。为稳定4种电极的基线电位、加快电极响应速度,优化了载流的组分:23 mmol/L Na2B4O7-H3BO3(pH 7.40),0.25 mmol/L K+,48.6 mmol/L Na+,2.5 mmol/LCl-和0.25 mmol/L Ca2+的混合液,流量为1.56 mL/min;混合盘管长度为30 cm(I.D.0.5 mm)。本方法的测定范围分别是2.0～22.0 mmol/L K+,90～253 mmol/L Na+,20～248 mmol/L Cl-,0.35～10.0 mmol/LCa2+,相对标准偏差小于1.05%(n=11),回收率为96.7%～103.7%,分析速度为120样/h,每次测定的样品耗量仅为45μL。本系统采用载流连续流动和微量样品注入,实现了系统的自动清洗,解决了样品交叉污染、流通式电极敏感膜表面血清纤维蛋白吸附及堵塞等问题,延长了使用寿命。; 周磊赖振尧张会生高秀峰李永生; 关键词：流动注射血清钾钠

富含脂肪酶菌种的筛选与鉴定: 2021年; 脂肪酶是生物柴油生产的关键酶,为了降低生物柴油的研发成本,本研究从餐厅油脂污染处和自然环境中筛选得到了含脂肪酶菌;然后对其进行了紫外以及高温诱变。对诱变后的脂肪分解菌利用罗丹明B固体培养基对其活性进行了鉴定;利用p-NP法测定了活性;筛选得到了相对活性最高的脂肪分解菌,最后,通过16 s测序鉴定了富含脂肪酶菌的菌种或菌属,为进一步生物柴油的开发提供了实验基础。; 李乔惠王冰鹤李成龙杨森王悦琦周欢李海玲高秀峰; 关键词：固体培养基脂肪酶分解菌罗丹明B 生物柴油自然环境

嗜碱耐盐芽孢杆菌乙醛脱氢酶基因aldC的克隆及组氨酸融合酶蛋白的表达: 2012年; 应用PCR扩增嗜碱耐盐芽孢杆菌乙醛脱氢酶基因aldC,重组至原核表达载体pET30b(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达的重组乙醛脱氢酶在碳端含有一个组氨酸标签。SDS-PAGE考察蛋白的表达量和亚基分子量,并对Km值进行了考察。成功构建了pET30b-aldC原核表达质粒;诱导表达了亚基分子量约为56 kDa的组氨酸融合蛋白;乙醛脱氢酶活性比对照菌增加了约3.5倍;Km值为2.874 mmol/L。成功克隆并诱导表达了含组氨酸标签的嗜碱耐盐芽孢杆菌乙醛脱氢酶基因aldC。; 郑雪妮高秀峰李永生; 关键词：乙醛脱氢酶组氨酸标签酶蛋白

光纤DNA生物传感器的应用特征: 2006年; 目的:总结近年来国内外有关光纤DNA传感器应用的研究近况,探讨光学DNA传感器在基因检测中的应用。资料来源:应用计算机检索Medline1990-01/2005-12相关光纤DNA传感器应用的文献,检索词“DNAbiosensor,opticalfiber”,并限定文献语言种类为English。同时计算机检索CNKI1990-01/2005-12相关光纤DNA传感器方面的文献,检索词为“传感器,DNA,光纤”,并限定语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,选取包括光纤DNA传感器的文献,开始查找全文。纳入标准:光纤DNA传感器在基因检测中的应用。排出标准:①电化学,压电晶体DNA传感器的应用。②综述文献、重复研究、Meta分析类文章。资料提炼:共收集到35篇关于光纤DNA传感器的文献,纳入21篇符合标准的文献,10篇文献对光纤DNA传感器的应用进行评价。资料综合:光纤DNA生物传感器是近年来发展很快的一项新技术,是分子生物学、分析化学、光电子学的交叉技术。光纤DNA传感器对基因的检测具有灵敏度高、特异性好,易于排出非特异性因素的干扰。光纤DNA传感器可检测杂交后产生的特异性信号,选择性强,易于排除杂交过程中非特异性吸附干扰。可应用于模式寡核苷酸的检测、DNA损伤的检测、基因诊断检测、致病菌的检测、药物检测、对酶的检测。结论:光纤DNA传感器基因检测方面的应用是完全可行的,但还需进一步改进,使其能够对肿瘤、遗传病等进行检测。; 姜艳霞雷钧涛高秀峰; 关键词：寡核苷酸类生物传感器

葡萄糖氧化酶-辣根过氧化物酶-葡萄糖-愈创木酚-荧光反应体系测定血糖被引量：4: 2011年; 利用愈创木酚的荧光特性,将其导入葡萄糖-葡萄糖氧化酶(GOD)-辣根过氧化物酶(HRP)的荧光猝灭反应体系,并与荧光毛细分析技术结合,开发了一种能测定微量葡萄糖的新方法。本方法的的最佳测定条件为:反应时间15 m in,反应温度30℃,GOD和HRP的浓度分别为4500U/L、2500U/L,愈创木酚浓度为150μmol/L,缓冲液为磷酸盐(pH 7.5)。血糖线性范围为10～160μmol/L,RSD<2.6%,检出限范围为1.15～5.32μmol/L,添加回收率在96.8%～103.7%之间。在测定人血清时,结果与葡萄糖试剂盒法一致。; 陈婷梅李永生高秀峰; 关键词：愈创木酚葡萄糖氧化酶辣根过氧化物酶血糖

核干细胞因子的最新研究进展被引量：4: 2013年; 核干细胞因子(Nucleostemin,NS)是存在于核仁的鸟苷三磷酸(GTP)结合蛋白,在细胞周期进程、干细胞增殖和核糖体的装配中发挥作用。NS基因在大多数干细胞和肿瘤细胞表达,是维持干细胞和癌细胞自我复制、增殖所必须的蛋白质,并使细胞保持在不分化状态,是干细胞和肿瘤细胞通过G2/M检验点的特异性调控因子。有关核干细胞因子在细胞中的作用机制虽然还不是很明确,但该蛋白的发现为干细胞和肿瘤细胞的研究治疗提供了靶点,对于肿瘤的基因治疗等临床应用具有重要作用。本文拟就NS的生物学功能及其在肿瘤细胞发生、发展中的最新研究进展作一综述。; 吴鑫胡琳田明妹贺婷高秀峰李永生; 关键词：核干细胞因子肿瘤细胞细胞周期 P53 MDM2

壳聚糖锌离子固定化亲和层析填料的制备与性质被引量：1: 2012年; 目的:制备了壳聚糖Zn2+固定化亲和层析填料,并对其性能进行了研究。方法:采用反相悬浮法制备了交联壳聚糖;再以环氧氯丙烷为活化剂,乙二胺为螯合配基,制备了固定化亲和层析填料;表征了其有效粒径以及均匀系数、含水量、失重率、氨基含量、骨架密度、堆积密度以及孔度值。从时间、加入ZnCl2的浓度、温度、pH方面对Zn2+固定化条件进行了优选,并确定了Zn2+的固定化量。含组氨酸标签的乙醛脱氢酶粗酶液,经硫酸铵盐析后,考察了壳聚糖Zn2+固定化亲和层析填料的亲和性能。结果:制备的填料有效粒径为105μm;均匀系数为1.46;含水量为58.03%;失重率为85.43%;氨基含量为9.20mmol/g;骨架密度为1.217 8g/ml;堆积密度为0.843 2g/ml;孔度值为36.40%。固定化Zn2+的最佳条件是:时间3 h、加入ZnCl2溶液浓度0.1mol/L、温度28℃、pH 5.5;且此条件下,亲和层析填料中Zn2+固定化量为3.35mmol/g。壳聚糖Zn2+固定化亲和层析填料对乙醛脱氢酶的亲和性能为4.14IU/g(干重)。结论:制备了壳聚糖Zn2+固定化亲和层析填料,可用于带有组氨酸标签重组蛋白的快速分离与纯化。; 包海生高秀峰郑雪妮李永生; 关键词：壳聚糖乙醛脱氢酶

流动注射分光光度法测定红葡萄酒中甲醇被引量：5: 2016年; 提出了一种快速自动测定葡萄酒中甲醇的流动注射分析方法。本方法的原理是通过蒸馏从样品中分离甲醇,然后经高锰酸钾氧化成甲醛,过量高锰酸钾与S_2O_5^(2-)脱色,甲醛与品红/亚硫酸反应生成紫色络合物,在最大吸收波长590 nm处进行测定。通过正交实验及单因素优化后,得到了以下最优条件:20 g/L KMnO_4,0.3 mol/L H_2SO_4(15%H_3PO_4),80 g/L K_2S_2O_5,3 g/L品红-亚硫酸钠,显色反应温度40℃,样品消耗量330μL,分析速度为24个样/h。对甲醇(500 mg/L)进行11次重复测定,相对标准偏差为0.6%。在优选条件下,用本方法与气相色谱法对5种红葡萄酒进行测定,其测定结果一致。; 莫腊梅李永生高秀峰; 关键词：流动注射甲醇显色反应红葡萄酒

促红细胞生成素定点突变及活性考察被引量：3: 2018年; 促红细胞生成素（EPO）是一种多效细胞因子,具有促进红细胞生成和组织修复作用,在用于组织修复时会导致血粘度升高,改变其结构降低副作用是其应用的关键。我们对EPO进行定点突变,筛选能够降低促红细胞生成的突变体,为进一步组织修复研究提供基础。本实验中我们利用定点突变试剂盒分别将人源性促红细胞生成素中7个赖氨酸突变为谷氨酰胺;原核表达并纯化突变蛋白;所得产物腹腔注射KM小鼠体内,通过检测小鼠血中的网织红细胞指数考察mEPO（mutantEPO）的活性。rhEPO（recombinantEPO）及7个mEPO组的网织红细胞指数与阴性对照组比较,p值均小于0.05,有显著性差异;mEPO（K97Q）与rhEPO阳性对照组比较,p〈0.05有显著性差异,这说明原核表达的rhEPO及mEPO均具有促红细胞生成活性,mEPO（K97Q）的促红细胞生成作用明显降低,可能在组织修复过程中减少副作用的发生,为进一步多点突变奠定了基础。; 赵佳浩高秀峰潘佳欣罗亚雄吴晓婷李永生; 关键词：促红细胞生成素原核表达分离纯化定点突变

尿中磺酸化胆汁酸的微量荧光分析法被引量：2: 2008年; 检测尿中磺酸化胆汁酸（SBA）的浓度可判断人体肝胆系统是否正常。基于双酶催化反应和微量荧光毛细管分析技术,建立了一种新的用于尿中SBA测定的灵敏、准确、简便的微量荧光分析法。方法基本原理为：SBA在胆汁酸磺酸酯酶（BSS）催化作用下水解而脱磺酸基,生成3β-羟胆汁酸;后者在氧化型辅酶-βNAD^＋存在下,由3β-羟类固醇脱氢酶（3-βHSD）催化而转化为3-酮胆汁酸,同时-βNAD^＋被还原成NADH;通过NADH的荧光强度来定量SBA。本方法样品无需预处理,测定全过程仅需10 min。荧光强度与SBA浓度呈良好的线性关系,线性范围3.0～50μmol/L,方法检出限为2.2μmol/L,相对标准偏差（RSD）为3%。; 刘伟平高秀峰李永生

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