李永生
- 作品数：149 被引量：411H指数：10
- 供职机构：四川大学化学工程学院更多>>
- 发文基金：教育部留学回国人员科研启动基金吉林省科技发展计划基金国家基础科学人才培养基金更多>>
- 相关领域：理学电气工程医药卫生化学工程更多>>
- 新型乳酸固定化酶荧光毛细生物传感器
- 2009年
- 对长45 mm、内径0.9 mm的医用毛细管进行γ-氨丙基三乙氧基硅烷氨基化和戊二醛醛基化后,再将乳酸脱氢酶(LDH)的氨基与戊二醛的醛基结合,使其固定在毛细管内壁,构成一种新型固定化酶乳酸荧光毛细生物传感器(IE-LFCBS),实现了对乳酸的微量、快速测定。IE-LFCBS吸入辅酶Ⅰ与乳酸的混合液,在固定化酶催化下使乳酸与辅酶Ⅰ反应,生成荧光物质还原型辅酶Ⅰ;激发波长353 nm、发射波长466 nm。适用于IE-LFCBS的优化条件为:辅酶Ⅰ浓度4 mmol/L、用于固定化的LDH浓度60 kU/L、反应时间15 min、反应温度38℃、测定范围为1.0～5.0 mmol/L、回收率95%～98%,IE-LFCBS的相对标准偏差为RSD<1.5%(n=11),检出限为0.45 mmol/L。IE-LFCBS的试液用量极少(18μL),并能重复使用,可望用于发酵食品、药品、血液标本等各类样品中乳酸的快速检测。
- 李永生鞠香高秀峰杨微
- 关键词：固定化酶乳酸生物传感器
- 流动注射异步注入-离子选择性电极法同时测定萝卜中的钾、钙、钠和氯被引量：2
- 2016年
- 建立了同时快速、准确测定萝卜中K^+、Ca^(2+)、Na^+和Cl^-的流动注射异步注入-离子选择性电极法。最佳试验条件为:系统流量为2.43mL·min^(-1);总离子强度调节缓冲液(TISAB)由80 mmol·L^(-1)Tris-硼酸(PH 6.00)、0.05 mmol·L^(-1)Na^+、0.5 mmol·L^(-1)K^+、0.01 mmol·L^(-1)Ca^(2+)和0.57mmol·L^(-1)Cl^-组成;反应盘管长度为50 cm;采样体积为220μL;混合标准溶液的pH为6.00。K^+、Ca^(2+)、Na^+和Cl^-的线性范围分别为10~70,0.5~7.0,10~36,21~119 mmol·L^(-1),检出限(3s/k)分别为5.0,0.2,5.0,10 mmol·L^(-1)。加标回收率在92.8%~110%之间,测定值的相对标准偏差(n=11)小于2.0%。
- 王阿蓉李永生
- 关键词：离子选择电极法流动注射K^+NA^+萝卜
- 炉水中微量氯离子的流动注射分光光度测定法被引量：17
- 2003年
- 氯离子与硫氰酸汞和硝酸铁在酸性介质中反应生成红色络合物的吸光度与水中氯离子的含量成正比 ,根据这一反应原理 ,建立了用流动注射—分光光度法测定微量氯离子的自动分析新方法。利用单因素实验方法对影响灵敏度的各因素进行优选 ,得出最佳条件。本方法的检测极限为 2 0 μg/ L,相对标准偏差为0 .89% ,回收率为 1 0 0 %～ 1 0 5 %。分析速度为 60～ 1 2 0样 / h。
- 李永生董宜玲吕淑清
- 关键词：火力发电厂炉水微量氯离子分光光度测定法流动注射分析
- 重组嗜碱耐盐芽孢杆菌(XJU-1)乙醛脱氢酶aldA基因在工程菌BL21(DE3)中的表达和酶学性质研究被引量：2
- 2010年
- 用LB培养基培养转化重组嗜碱耐盐芽孢杆菌(XJU-1)乙醛脱氢酶aldA基因的工程菌BL21(DE3),提取粗酶液,然后利用SDS-PAGE电泳考察重组ALDH的表达量和分子量;测定其活性;并对表达产物的最适pH、最适温度、金属离子的影响和Km值进行研究。结果表明,工程菌BL21(DE3)表达的ALDH量明显高于对照菌,亚基分子量约为56 kDa;乙醛脱氢酶活性比对照菌增加了24倍;最适反应温度为20～40℃,最适pH为9.0～9.5,K+和Na+对酶有激活作用,而Mn2+,Mg2+对酶有抑制作用;Km值为1.73 mmol/L。说明重组嗜碱耐盐芽孢杆菌(XJU-1)乙醛脱氢酶aldA基因在工程菌BL21(DE3)中能够高效表达。
- 赵绪光高秀峰郑雪妮李永生
- 关键词：ALDH乙醛脱氢酶
- 负压双管线流动注射离子选择电极法同时测定血清K^+、Na^+、Cl^-、Ca^(2+)
- 2012年
- 为了简化装置结构、降低仪器成本、提高分析系统的稳定性和抗干扰能力,推出一种全新的负压式双管线流动注射离子选择电极分析方法,并对该方法相关的载液组成及流量、载流酸度调节液的组成及流量,反应盘管长度等进行了优化,最后将其成功用于血清K+、Na+、Cl-、Ca2+的同时测定。方法的相对标准偏差<1.3%(n=11),回收率为96%～104%,分析速度为480检出/h,样品耗量仅为45μL/次;对血清K+、Na+、Cl-、Ca2+的同时测定范围分别是2.0～24.0、102～252、20～300、0.70～8.0 mmol.L-1,此测定范围涵盖了正常人血清中的电解质浓度。
- 李永生张会生周磊赖振尧高秀峰
- 关键词：负压流动注射
- RCDs- Fe(Ⅲ)复合荧光碳点的合成及检测氟离子的应用
- 2022年
- 以柠檬酸、乙二胺、水杨酸和Fe(Ⅲ)为原料,合成了一种对氟离子特异性响应的复合荧光碳点(RCDs-Fe(Ⅲ))。随后通过一系列实验,对碳点合成和氟离子检测条件进行了优化。结果表明,碳点合成最优原料配比为2 mL乙二胺、2 g柠檬酸和0.2 g水杨酸;最优检测条件:反应体系溶剂为pH 5.0的盐酸溶液,Fe(Ⅲ)浓度为150 mg/L,复合碳点浓度为0.5%,碳点激发与发射波长分别为370,460 nm。在最优检测条件下,RCDs-Fe(Ⅲ)检测氟离子的线性范围为1~25 mg/L,检出限为0.82 mg/L。复合碳点测定牙膏中氟离子的结果与对比法一致。
- 唐帅罗亚雄李永生
- 关键词：柠檬酸乙二胺水杨酸氟离子
- 流动注射-离子选择电极电位法测定循环冷却水中痕量铜被引量：8
- 2009年
- 为了监测热交换器铜管的腐蚀情况，建立了一种能快速、自动测定循环冷却水中痕量Cu^2＋的流动注射离子选择电极法（FIA—Cu^2＋／ISE）。在研究过程中，对FIA—Cu^2＋／ISE系统的各种影响因素，如混合盘管长度、载流流量、进样量、干扰物质、总离子强度调节剂（TISAB）中Cu^2＋。含量、TISAB的浓度和pH及流量等进行了考察和优选，得到的最佳参数为：混合盘管长度为40cm，超纯水载流流量为2．3mL／min，TISAB流量为0．86mL／min（pH3．5），TISAB为0．4mol／L的KNO3，注入时间为90S，采样时间为30S，进样量为650μL；本方法测定Cu^2＋的线性范围为2．6～80Mg／L，分析速度为30样／h，回收率在99％～104％之间；用20ug／L和40μg／L的Cu^2＋标准溶液进行精密度试验，得到的相对标准偏差分别为3．9％，1．3%（n=11）。方法检出限为2．6μg／L。该法用于测定某电厂循环冷却水中痕量Cu^2＋，测定结果和标准加入法以及国家标准（GB）法的测定结果相一致。
- 李永生李俊苹
- 关键词：流动注射离子选择性电极痕量铜
- 基于丙酮酸/还原型辅酶Ⅰ/乳酸脱氢酶/氧化型辅酶Ⅰ/乳酸正逆反应同时测定丙酮酸/乳酸的酶荧光毛细管分析被引量：4
- 2011年
- 利用丙酮酸(PA)/还原型辅酶I(NADH)/乳酸脱氢酶(LDH)/氧化型辅酶I(NAD+)/乳酸(LA)荧光反应体系的正逆反应,建立了一种可直接用于临床检验、能同时测定血清中微量PA/LA的酶荧光毛细管分析法。本方法可在常规荧光光度计上,用普通玻璃毛细管同时实现了PA/LA的高灵敏分析,每次分析试剂和样品的用量仅9μL,而且方法重现性好,血清样品预处理操作简单。得到的最佳条件:60μmol/L NADH,100 U/L LDH,3 mmol/L NAD+,测定乳酸的pH值为9.0、丙酮酸的pH值为7.5,反应时间10 min;LA的线性范围是0.05～1.0 mmol/L;检出限为0.023 mmol/L;RSD<1.6%;PA的线性范围是4～80μmol/L;检出限为0.73μmol/L;RSD<1.3%;血清中PA和LA的添加回收率在94%～105%之间;测定结果与常规紫外分光光度法一致。
- 李永生杨微李乔婧周朗高秀峰
- 关键词：丙酮酸乳酸乳酸脱氢酶血清
- 法尔凯干酵母乙醛脱氢酶的提取和纯化研究被引量：3
- 2010年
- 应用硫酸铵分级盐析、热沉淀及双水相萃取方法提取并纯化了法尔凯干酵母胞浆内的乙醛脱氢酶(ALDH)。结果表明,粗酶液经过硫酸铵分级盐析、热沉淀和2次双水相萃取后得到的ALDH酶液,比活性为0.14,纯化倍数为3.5,回收率为58%;酶的最适pH为7.5,最适反应温度为35～40℃,以乙醛为底物的Km值为6.9×10-3mol/L,K+离子为激活剂,Zn2+离子为抑制剂。
- 杨伟伟高秀峰包海生李永生
- 关键词：乙醛脱氢酶双水相纯化
- Goldview标记的DNA荧光毛细生物传感器的研究被引量：4
- 2009年
- 对Goldview（GV）作为荧光标记物的DNA荧光毛细生物传感器进行了研究。以荧光毛细分析法（fluorescence capillary analysis,FCA）为基础,在毛细管内壁通过Poly-l-lysine将20-mer-ssDNA探针固定,制成DNA荧光毛细生物传感器（DNA fluorescence capillary biosensor,DNA-FCB）,DNA-FCB与互补靶DNA杂交,通过GV染色后,检测杂交产物的荧光强度,实现对靶DNA的定性和定量分析。样品用量12μL,靶DNA的浓度在0.4-4μmol·L^-1（2.4-24 mg·L^-1）范围内和荧光强度有良好的线性关系（y=65.911x＋3.994 4,r=0.998 9）;RSD〈3.5%,检出限0.39μmol·L^-1（2.2 mg·L^-1）,能达到定量检测靶DNA的目的。用DNA-FCB测定靶DNA操作简便,试样、试剂用量少,测定成本极低,能大大减少环境污染。
- 王艳君李永生杨全玉黄燚唐静高秀峰
- 关键词：DNA
