陈玉兰
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：吉林大学畜牧兽医学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生政治法律更多>>
- 微小隐孢子虫黏附相关蛋白基因CP21的原核表达及鉴定
- 2011年
- 本研究旨在克隆微小隐孢子虫黏附相关蛋白基因CP21开放阅读框,构建其原核表达质粒,并对获得的融合蛋白进行鉴定。从含CP21基因的噬菌体中提取模板DNA,PCR扩增基因片段,构建pET-28a-CP21原核表达质粒,转化至埃希氏大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定。用原核表达蛋白免疫小鼠,制备抗重组蛋白多抗,对蛋白进行定位。结果表明成功扩增出CP21基因,并构建原核表达质粒,转化至大肠杆菌中表达出相对分子质量为25 ku的融合蛋白,Western blotting证明表达的CP21融合蛋白能与抗C.parvum多克隆抗体产生特异性反应。免疫荧光结果表明:CP21基因在子孢子和卵囊期均表达,且表达产物位于子孢子表膜和卵囊壁表面。CP21是一种与侵入机制有关的黏附相关蛋白。研究结果为微小隐孢子虫的免疫学诊断及疫苗研制奠定了基础。
- 任保彦陈玉兰宫鹏涛李巍李建华苏利波李赫杨举刁玉梅张西臣
- 关键词：微小隐孢子虫原核表达免疫荧光定位
- 微小隐孢子虫重组蛋白CP21的免疫特性被引量：1
- 2011年
- 采用微小隐孢子虫CP21基因的原核表达蛋白的抗血清对微小隐孢子虫感染HCT-8细胞进行了体外阻断试验,检测不同浓度抗血清对HCT-8细胞感染隐孢子虫感染率的影响。同时应用纯化的重组CP21蛋白对小鼠进行免疫,检测体液免疫水平和细胞免疫水平的变化。对免疫后的小鼠接种微小隐孢子虫,检测重组CP21蛋白对微小隐孢子虫感染的保护效果。体外阻断试验结果显示,在培养基中分别加入1%、2%、5%和10%的抗重组CP21蛋白鼠血清时,HCT-8细胞感染隐孢子虫的平均感染率由82.0%分别下降到41.1%、35.2%、30.6%和23.5%;动物保护性试验体液免疫水平检测发现,试验组血清中IgG滴度随免疫次数增加而逐渐升高,第3次免疫后IgG滴度与对照组相比差异均极显著(P<0.01);细胞免疫水平检测证明CD4+/CD8+T淋巴细胞数值与对照组相比差异均极显著(P<0.01);攻虫保护试验结果表明试验组与对照组相比卵囊排出量显著减少(P<0.05),卵囊排出持续时间平均缩短4 d,减虫率达38%。体内外试验结果表明:CP21基因可用于作为预防和治疗隐孢子虫病的有效靶位点基因。
- 任保彦陈玉兰宫鹏涛李建华杨举张西臣
- 关键词：微小隐孢子虫免疫特性
- 微小隐孢子虫表面粘附相关蛋白基因的筛选和免疫特性研究
- 为了获得微小隐孢子虫表面粘附相关蛋白基因,本研究首先根据本实验室建立的方法用新生犊牛小肠上皮细胞对本室构建的微小隐孢子虫T7噬菌体展示文库进行筛选获得一个新的微小隐孢子虫表面粘附相关蛋白基因,并用分子生物学方法对该基因进...
- 陈玉兰
- 关键词：微小隐孢子虫
- 文献传递
- 晋楚争霸时期宋国外交述论
- 晋楚争霸时期，宋国无论在经济上，还是在政治上，都是一个中等强国，再加上其居中枢的地理位置，使得宋国无论对晋国还是对楚国，都有极其重要的战略地位，因此，成为晋楚两国的必争之地。宋国也因此而不断遭到来自晋楚两大国的侵扰。这样...
- 陈玉兰
- 关键词：外交关系
- 文献传递
