任保彦
- 作品数：14 被引量：18H指数：3
- 供职机构：吉林大学畜牧兽医学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划吉林省科技发展计划基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 旋毛虫与肿瘤相关抗原抗体制备方法及医用用途
- 本发明涉及一种旋毛虫与肿瘤相关抗原抗体制备方法及医用用途，其特征在于具体的制备方法如下：旋毛虫与肿瘤相关抗原加等量的完全福氏佐剂乳化后，常规方法皮下首免小鼠、兔或牛、驴等动物，两周后以旋毛虫与肿瘤相关抗原加等体积的福氏不...
- 张西臣李建华任保彦宫鹏涛张楠高江明李赫吕强张国才杨举
- 文献传递
- 刚地弓形虫RH株SAG3蛋白抗体检测的ELISA方法建立被引量：2
- 2012年
- [目的]利用纯化的刚地弓形虫RH株表面蛋白SAG3的原核重组蛋白为基础,建立抗体间接ELISA检测方法。[方法]采用棋盘滴定法,确定间接ELISA的最佳条件。采用鼠抗新孢子虫阳性血清、鼠抗安氏隐孢子虫阳性血清、鼠抗柔嫩艾美尔球虫阳性血清、鼠抗蓝氏贾第虫阳性血清以及鼠抗微小隐孢子虫阳性血清和健康小鼠阴性血清作对照,检测血清之间是否有交叉反应。[结果]最佳包被条件为:抗原包被浓度0.25μg/孔,被检血清稀释度1∶400,酶标二抗稀释度1∶3 000,封闭剂5%脱脂奶粉的PBST溶液;血清之间没有交叉反应。该方法的灵敏度为1∶1 600。[结论]该方法灵敏度高,特异性较强,可重复性较好,可用于对弓形虫感染的检测及流行病学调查。
- 马亮任保彦左绍志宫鹏涛李建华张国才杨举张西臣
- 关键词：刚地弓形虫表面蛋白间接ELISA
- 旋毛虫与乳腺癌相关抗原基因TS498抗体制备方法
- 本发明提供了旋毛虫与MCF-7乳腺癌相关抗原基因TS498抗体制备方法，分别制备旋毛虫和MCF-7乳腺癌细胞的抗血清，利用间接ELISA方法确定肿瘤细胞抗原与旋毛虫阳性血清、旋毛虫抗原与肿瘤细胞阳性血清间是否存在相关抗原...
- 张西臣李建华任保彦宫鹏涛杨举张国才张楠左绍志李赫陈玉江
- 文献传递
- 弓形虫RH株表面抗原SAG3去信号肽基因的蛋白原核表达及鉴定被引量：5
- 2012年
- 根据GenBank中弓形虫表面抗原SAG3基因序列,以弓形虫总RNA反转录的cDNA为模板,扩增出SAG3去除信号肽基因并进行原核表达。将重组pET-28a(+)-SAG3阳性表达质粒转入大肠杆菌BL(DE3)中,用IPTG进行诱导表达。通过SDS-PAGE和Western blotting对重组蛋白进行分析和鉴定。结果表明:成功扩增了不含信号肽的SAG3基因,构建的原核表达质粒在大肠杆菌中得到了高效表达,能够与鼠抗弓形虫阳性血清发生特异性反应,去信号肽的SAG蛋白具有反应原性。
- 马亮刁玉梅任保彦宫鹏涛李建华张西臣
- 关键词：刚地弓形虫原核表达
- 刚地弓形虫RH株SAG3蛋白抗体检测的ELISA方法建立
- 马亮任保彦宫鹏涛左绍志李建华张国才张西臣
- 微小隐孢子虫黏附相关蛋白基因CP21的原核表达及鉴定
- 2011年
- 本研究旨在克隆微小隐孢子虫黏附相关蛋白基因CP21开放阅读框,构建其原核表达质粒,并对获得的融合蛋白进行鉴定。从含CP21基因的噬菌体中提取模板DNA,PCR扩增基因片段,构建pET-28a-CP21原核表达质粒,转化至埃希氏大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定。用原核表达蛋白免疫小鼠,制备抗重组蛋白多抗,对蛋白进行定位。结果表明成功扩增出CP21基因,并构建原核表达质粒,转化至大肠杆菌中表达出相对分子质量为25 ku的融合蛋白,Western blotting证明表达的CP21融合蛋白能与抗C.parvum多克隆抗体产生特异性反应。免疫荧光结果表明:CP21基因在子孢子和卵囊期均表达,且表达产物位于子孢子表膜和卵囊壁表面。CP21是一种与侵入机制有关的黏附相关蛋白。研究结果为微小隐孢子虫的免疫学诊断及疫苗研制奠定了基础。
- 任保彦陈玉兰宫鹏涛李巍李建华苏利波李赫杨举刁玉梅张西臣
- 关键词：微小隐孢子虫原核表达免疫荧光定位
- 与乳腺癌细胞MCF-7相关的旋毛虫TS498基因的克隆与表达被引量：5
- 2012年
- 目的克隆与乳腺癌MCF-7细胞相关的旋毛虫TS498基因,并进行原核表达。方法从含TS498基因的噬菌体文库中PCR扩增TS498基因,亚克隆入原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-28a-TS498,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物。结果扩增的旋毛虫TS498基因与GenBank中登录的基因序列同源性为100%,重组表达质粒pET-28a-TS498经双酶切和测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约23 000,表达量约占菌体总蛋白的20%,能够被兔抗旋毛虫肌幼虫阳性血清识别。结论成功克隆并在大肠杆菌中表达了与MCF-7细胞相关的旋毛虫TS498基因,为进一步研究其特性和功能奠定了基础。
- 任保彦左绍志高江明付成福张旭宫鹏涛李建华张西臣
- 关键词：旋毛虫克隆原核细胞基因表达乳腺癌
- 微小隐孢子虫重组蛋白CP21的免疫特性被引量：1
- 2011年
- 采用微小隐孢子虫CP21基因的原核表达蛋白的抗血清对微小隐孢子虫感染HCT-8细胞进行了体外阻断试验,检测不同浓度抗血清对HCT-8细胞感染隐孢子虫感染率的影响。同时应用纯化的重组CP21蛋白对小鼠进行免疫,检测体液免疫水平和细胞免疫水平的变化。对免疫后的小鼠接种微小隐孢子虫,检测重组CP21蛋白对微小隐孢子虫感染的保护效果。体外阻断试验结果显示,在培养基中分别加入1%、2%、5%和10%的抗重组CP21蛋白鼠血清时,HCT-8细胞感染隐孢子虫的平均感染率由82.0%分别下降到41.1%、35.2%、30.6%和23.5%;动物保护性试验体液免疫水平检测发现,试验组血清中IgG滴度随免疫次数增加而逐渐升高,第3次免疫后IgG滴度与对照组相比差异均极显著(P<0.01);细胞免疫水平检测证明CD4+/CD8+T淋巴细胞数值与对照组相比差异均极显著(P<0.01);攻虫保护试验结果表明试验组与对照组相比卵囊排出量显著减少(P<0.05),卵囊排出持续时间平均缩短4 d,减虫率达38%。体内外试验结果表明:CP21基因可用于作为预防和治疗隐孢子虫病的有效靶位点基因。
- 任保彦陈玉兰宫鹏涛李建华杨举张西臣
- 关键词：微小隐孢子虫免疫特性
- 冷应激条件下猪脂肪组织中脂联素及其受体mRNA水平的表达变化被引量：2
- 2012年
- 为了研究冷应激对脂肪代谢的影响,本试验分别在-15～-10℃、-10～-5℃、-5～0℃、15～18℃温度条件下采取猪颈部、背部皮下和内脏系膜脂肪组织,通过荧光定量RT-PCR方法检测脂联素及其受体mRNA的表达水平。结果显示,随着冷应激强度的逐渐加大,在颈部、背部皮下、内脏系膜Adiponectin mRNA的表达量逐渐降低,差异显著(P<0.05);内脏系膜中AdipoR 1和AdipoR 2mRNA表达量先逐渐升高后恢复正常,且差异极显著(P<0.01);背部皮下AdipoR 2mRNA表达量先逐渐降低后恢复正常,差异极显著(P<0.01),AdipoR 1mRNA表达量没有明显变化;颈部皮下AdipoR 2mRNA的表达量先逐渐升高后恢复正常,差异极显著(P<0.01),AdipoR 1mRNA的表达量先升高后恢复正常,而后又升高,差异极显著(P<0.01)。结果表明,脂联素及其受体参与冷应激过程,它们可能与冷应激条件下脂肪组织的重新分布有重要的关系。
- 付守鹏任保彦刘颖李苏楠李洋王茂鹏杨占清魏利斌李志强柳巨雄王玮郭斌胡仲明
- 关键词：冷应激脂联素脂联素受体1脂联素受体2
- 旋毛虫与MCF-7乳腺癌细胞相关蛋白抗体抗肿瘤效应研究
- 本实验通过ELISA和Western blotting的方法确定旋毛虫与MCF-7乳腺癌细胞之间具有相关抗原蛋白，通过免疫筛选的方法在旋毛虫cDNA表达文库里筛选出与MCF-7细胞相关的旋毛虫基因蛋白TS498，并通过动...
- 任保彦
- 关键词：旋毛虫MCF-7乳腺癌抗肿瘤免疫筛选
- 文献传递
