邹贤刚
- 作品数：19 被引量：163H指数：7
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 超排山羊卵巢卵母细胞体外成熟的初步研究被引量：12
- 1993年
- 对超排山羊卵巢卵母细胞进行体外成熟培养的初步研究:试验一,分别用6、7、9、16号针头抽吸2～6mm卵泡,获有用卵母细胞百分率:分别为61.67％(37/60)、65.92％(178/270)、56.73％,(59/104)、31.43％(22/70);试验二,以TCM 199+10mol/L MHEPES+青霉素(6μg/m1)+链霉索(5μg/ml)为基础培养液(BM),再分别加入不同成分,配成5种卵母细胞成熟液:(A)BM+10％EGS(发情羊血清),(B)BM+10％EGS+HCG(2.5μg/ml,),(C)BM+10％EGS+HCG+E,(1μg/ml),(D)BM+10％FCS+HCG十E_2; (E)BM+10％EGS+HCG+E_2+颗粒细胞(1.5×10~6～3.0×10~6个/ml)。在38.5℃,5％CO_2培养26h,排卵后第1天卵巢母细胞体外成熟率分别为67.67％(20/30),60.42％(29/48),83.67％(41/49),67.79％(40/59),80.82％(59/73),排卵后第5天卵巢卵母细胞,在培液D中体外成熟率为71.43％(45/63)。研究表明,超排山羊卵巢卵母细胞经体外成熟可获得大量廉价的成熟母细胞。
- 徐少甫成国祥成勇王杏龙杜福良孙长美穆宗尧吴维芬王玉阁邹贤刚杜淼
- 关键词：山羊卵母细胞体外成熟
- 山羊胚胎克隆的研究被引量：13
- 1995年
- 应用细胞核移植技术，把未分化或处于不同发育阶段的胚胎分裂球或细胞移入成熟的去核卵母细胞，并使之融合，成为Ｇ＿０代克隆卵。将Ｇ＿０代克隆卵移入同期发情的山羊输卵管中培养５ｄ，回收得到克隆胚，选择其中正常发育至８～１６细胞的克隆胚，将其胚胎细胞再移入成熟的去核卵母细胞，并进行电融合，构成Ｇ＿１代再克隆卵。１２９枚Ｇ＿０代克隆卵和１４３枚Ｇ＿１代再克隆卵移入同期发情的山羊输卵管，获得Ｇ＿０代克隆羊２只和Ｇ＿１代再克隆羊４只。介绍了产生克隆动物的各个技术环节以及这些环节与克隆动物出生率的关系。
- 成勇孙长美邹贤刚杜淼徐少甫
- 关键词：山羊胚胎移植无性繁殖系
- 山羊细胞核移植
- 1992年
- 哺乳动物细胞核移植是研究哺乳动物发育与遗传以及优良品种繁育的一个重要途径。它使人们能够在一个繁殖周期内获得大量与亲本遗传性状完全一致的复制后代。哺乳动物核移植已在小鼠、兔、绵羊、猪、牛上获得后代,但山羊核移植报道较少。张勇(1991)报道获得了4—32细胞期胚胎分裂球的核移植后代。 本研究采用白山羊为核移植的供体细胞核,青山羊为核移植的供体细胞质。将白山羊8细胞期胚胎的分裂球移入去核的青山羊 成熟卵母细胞的卵周隙内,经电融合、CB培养,然后将重构胚胎移植到假孕青山羊输卵管内,经161天妊娠,产出两只雌性核移植后代。经羔羊毛色鉴定,一只核移植后代毛色为纯白色,证明来源于白山羊8细胞期胚胎分裂球,即山羊8细胞期胚胎的单个分裂球仍具有发育全能性。另一只核移植后代,在眼、鼻、背线和腕关节处有青山羊毛色特征,其余均为白山羊特征,其形成原因正在研究中。
- 邹贤刚李光三杜森陆德裕杜福良成国祥王杏龙成勇王捍东穆宗尧徐少甫
- 关键词：山羊细胞核移植电融合
- 家兔细胞核移植
- 1992年
- 本研究以青紫兰灰兔16细胞期的分裂球作为供核细胞,将其移植到新西兰白兔已去除中期染色体的成熟卵母细胞的卵周隙内,而后用电脉冲激活卵子,促使分裂球和卵母细胞融合,再将融合的卵子移植到同步化的假孕的新西兰白兔的输卵管中,经30天妊娠,于1990年4月和8月出生两窝共6只移核兔,仔兔的眼睛虹膜色素、毛色均呈现青紫兰灰兔供体细胞的特征。 本实验结果证明兔卵母细胞和16细胞期的分裂球重建之后能发育到出生,即兔胚16 细胞期的分裂球的细胞核经激活的卵母细胞质的调节作用之后,仍具有同配子一样的发育全能性,但出生率比较低,许多的因素,如成熟卵母细胞的卵龄和激活条件、供体细胞和受体卵母细胞之间的相容性和发育的同步性、移植胚胎和寄母之间的同步性,以及其它的一些技术问题,还需深入细致地进行探讨。
- 杜森邹贤刚陆德裕
- 关键词：家兔细胞核移植
- 家兔核移植中卵母细胞质受体的研究
- 1992年
- 本文采用DAPI荧光染色和电刺激孤雌活化(电激活)两种方法,对家兔核移植过程中卵母细胞的去核和激活进行研究。根据DAPI荧光染色结果,将卵母细胞的第一极体与中期染色体的相对位置的符合程度分为三类:中期染色体在第一极体下面(Ⅰ类)、中期染色体在第一极体邻近(Ⅱ类)、中期染色体与第一极体相距较远(Ⅲ类),不同成熟时间收集的卵母细胞在同一个体以及个体间,其第一极体与中期染色体的相对位置的符合程度(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类所占比例)不同;随时间的推移,Ⅱ、Ⅲ类逐渐增加。家兔卵母细胞经电激活后体外培养结果表明:体内成熟或体外培养到17—19小时收集的卵母细胞,电激活效果最佳。因此,根据核移植全过程中的去核、移核和供核细胞与受体细胞质恢复培养等综合因素,我们认为家兔细胞核移植,选用注射排卵激素(LH或HCG)后13—15小时从输卵管中收集的卵母细胞,在体外显微操作和培养2—4小时,再进行电融合和激活,其卵母细胞的去核率、重构胚的融合率和激活率都最高。
- 邹贤刚
- 关键词：家兔核移植卵母细胞电激活
- FSH对不同生理状态下山羊超数排卵的效果被引量：1
- 1996年
- ＦＳＨ对不同生理状态下山羊超数排卵的效果王杏龙，穆宗尧，徐少甫，邹贤刚，肖英达，杜淼（扬州大学农学院江苏扬州２２５００９）（中国科学院发育生物学研究所）前言近几年来，胚胎移植的试验研究在很多国家愈益蓬勃开展，取得了很多成就。只有能够得到足量的胚胎，才...
- 王杏龙穆宗尧徐少甫邹贤刚肖英达杜淼
- 关键词：山羊繁殖超数排卵FSH
- 供体细胞核对山羊重构胚发育能力的影响被引量：1
- 1994年
- 选择不同品种的山羊交配所获的８细胞期至桑椹胚期的胚胎或重构胚发育至相同胚期的卵裂球，以ＬＲＨ注射后２６～２８ｈ回收的白山羊去核成熟卵作受体组建重构胚或再重构胚，经琼脂糖包埋，移入山羊输卵管内，培养５～６ｄ后观察发育状态。实验结果表明，杂种胚供核组建的重构胚和再重构胚发育能力明显优于纯种胚供核组建的重构胚和再重构胚，因此从细胞水平证明了杂种优势；母型ｍＲＮＡ对重构胚和再重构胚的发育起一定的调控作用。
- 穆宗尧成国祥王玉阁邹贤刚杜福良李光三徐少甫杜淼王杏龙成勇
- 关键词：山羊细胞核发育
- 电刺激家兔卵母细胞孤雌活化的研究被引量：16
- 1993年
- 采用电刺激使家兔卵母细胞孤雌活化,并对电刺激参数和电刺激介质进行选择,发现在电刺激电压为1.5kV/cm,脉冲持续时间为80us,电刺激3次,电刺激介质为M16的条件下,兔卵母细胞孤雌活化效果最好,可使95％的兔卵母细胞激活,体外培养有89.5％的激活卵发育到正常的8—16细胞期,12％的激活卵发育到囊胚,在体内培养的条件下,26％的激活卵发育到囊胚。采用不同的电刺激介质,卵母细胞最佳激活条件和发育情况不同,表明电刺激介质中Ca^(++)和Mg^(++)浓度似乎与卵母细胞的孤雌活化和维持早期发育有关。家兔在注射LH后17—19小时取卵,电刺激效果最好,激活卵在含细胞松弛素B的培养基中培养3小时,电镜观察已有原核形成,细胞膜附近的细胞器向中央移动。光镜检查表明:约有85％的激活卵具有二个原核,约15％的激活卵有四个原核。
- 邹贤刚肖英达黄国屏杜淼
- 关键词：孤雌活化电刺激卵母细胞
- 成年转基因动物体细胞克隆的研究
- 杜淼劳为德徐少浦邹贤刚成勇王玉阁张旭晨张靖溥杨跃飞沈玉刘洁卢金平刘冶国唐惠林鞠辉明耿世忠
- 该课题根据当时国内外个体表达系统（或称乳腺生物反应器）转基因动物的研究与发展趋势，结合克隆动物研究情况，提出将分子生物学中转基因动物的制备与克隆动物的研究相结合，从基础理论方面可以进一步探索细胞发育的潜能性；细胞核与细胞...
- 关键词：
- 关键词：转基因动物体细胞克隆
- 山羊同步发情和超排后取卵时间的研究被引量：3
- 1994年
- 间隔９～１４ｄ分２次进行ＰＧＦ＿（２α）处理，以调整母羊的性周期。处理后的同步率分别为４７．６４％和６５．８８％。用ＰＭＳＧ或ＦＳＨ对４１９只母羊进行超排，总有效率７５．８１％，有效羊平均每只获卵７．６４枚。超排母羊发情后２０～３０ｈ回收的卵母细胞，可用率８５．９３％。用于山羊细胞核移植中的受体卵母细胞，适宜的回收时间为超排母羊发情后（２７±１）ｈ。在进行山羊原代细胞核移植时，以８～１６细胞期、桑椹期至囊胚期的分裂球或内细胞团细胞作供核的胚胎，适宜的获取时间为超排母羊发情交配后９６～１４４ｈ。
- 穆宗尧王杏龙邹贤刚杜福良成国祥王玉阁李光三徐少甫杜淼成勇
- 关键词：山羊同步发情超数排卵卵母细胞
