葛梦圆
- 作品数：6 被引量：10H指数：2
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
- 相关领域：医药卫生理学农业科学更多>>
- 锁核酸分子信标在分子识别与生物分析中的应用被引量：1
- 2015年
- 分子信标是一种荧光探针,闭合时呈发夹结构。其5'末端修饰荧光基团,3'末端修饰猝灭基团。当目标存在时,环部与目标结合,发夹打开,发出荧光。锁核酸是一类双环状寡核苷酸衍生物,能够遵循碱基互补配对原则与核酸结合。锁核酸分子信标技术,结合了分子信标无需分离未结合探针而直接检测的优势和锁核酸亲合力强、热稳定性好、抗酶切以及体内无毒等特点,在核酸检测方面具有灵敏度高、特异性好的独特优势,近年来得到广泛关注。本文介绍了锁核酸修饰分子信标的结构、功能、设计要点,及其研究现状和一些重要进展,并讨论了目前锁核酸分子信标在分子识别及生物分析中的应用及存在的问题和发展前景。
- 桂珍严枫李金昌葛梦圆鞠熀先
- 关键词：锁核酸分子信标核酸分子识别生物分析
- 血浆 miR-199a-5p 与 miR-200c-3p在胃腺癌中的临床应用被引量：6
- 2015年
- 目的：探讨胃腺癌患者血浆中miR-199a-5p、miR-200c-3p的表达及其对胃腺癌诊断和预后判断的临床意义。方法采用病例对照研究方法，对2013年9月至2014年7月在南京医科大学附属肿瘤医院住院的47例胃腺癌患者及50名健康对照者进行研究，应用实时荧光定量PCR技术（TaqMan探针法）检测血浆中miR-199a-5p和miR-200c-3p的表达水平，分析其与年龄、性别、肿瘤定位、大小、分化程度、TNM分期、淋巴结转移等病理参数的关系，并比较30例胃癌根治术前及术后6～8天血浆中 miRNAs 表达的变化情况；应用受试者工作特征曲线（ receiver operating characteristic， ROC）分析miRNAs的表达对胃癌诊断的灵敏度和特异性。采用SPSS20.0统计学软件进行统计分析，正态分布的计量资料采用t检验，术前术后对比采用配对t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果 miR-199a-5p在胃癌患者血浆中的相对表达量为（1.05±0.22），与对照组（26.80±8.38）相比，显著降低（t＝3.058，P＝0.003），且与淋巴结转移（F＝4.725，P＝0.029）及肿瘤分化程度（F＝3.854，P＝0.032）相关。而miR-200c-3p在胃癌患者血浆中相对表达量为（15.15±3.02），与对照组（3.39±0.87）相比，显著升高（t＝－2.854，P＝0.006）。 MiR-199a-5p在术后表达增高（t＝－3.814，P＝0.001）而miR-200c-3p在术后表达降低（t＝2.978，P＝0.006）。 ROC曲线分析表明血浆miR-199a-5p、miR-200c-3p、miR-199a-5p和miR-200c-3p曲线下面积（ AUC）分别是0.692、0.792、0.798；三者的敏感性分别是87％、97％、92.5％；特异性分别是43％、54％、65％。结论 MiR-199a-5p和miR-200c-3p对胃腺癌的联合检测具有较高的灵敏度和特异性。（中华检验医学杂志，2015，38：402-406）
- 唐锦莉严枫王晓明葛梦圆桂珍李金昌竺明晨
- 关键词：胃肿瘤腺癌实时聚合酶链反应
- 泛素样含PHD和环指域1沉默对人肿瘤细胞株HO-8910和HO-8910 PM 生物学功能的影响被引量：1
- 2015年
- 目的 观察泛素样含PHD和环指域1（UHRF1）沉默对人肿瘤细胞HO-8910和HO-8910 PM的影响.方法 以人卵巢癌细胞株HO-8910和HO-8910 PM为研究对象,采用RNA干扰（RNAi）技术下调UHRF1在上述细胞中的表达;反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测HO-8910和HO-8910 PM细胞转染前后UHRF1 mRNA的表达水平;Western blot检测UHRF1蛋白的表达水平;转染第4天,用流式细胞术检测两株细胞转染前后的凋亡水平;转染后24、48、72、96、120 h,用细胞计数试剂盒（CCK-8）检测UHRF1敲减前后两株细胞增殖水平的变化.结果 RNAi技术敲减UHRF1在HO-8910和HO-8910 PM细胞中的表达后,实验组（kd组）中UHRF1 mRNA和蛋白的表达均低于阴性对照组（nc组）和空白组（bl组,P＜0.01）;流式细胞术结果显示,HO-8910细胞在kd、nc和bl组的凋亡率分别为（16.04±1.41）％、（8.43±0.94）％、（7.76±0.36）％,kd组细胞凋亡率高于nc组和bl组（P＜0.01）,nc组和bl组比较差异无统计学意义（P＞0.05）;HO-8910 PM细胞在kd、nc、bl组的凋亡率分别为（17.98±4.39）％、（8.92±2.39）％、（8.18±0.83）％,kd组细胞凋亡率高于nc组和bl组（P＜0.05）,nc组和bl组比较差异无统计学意义（P＞0.05）;CCK-8结果显示,HO-8910和HO-8910 PM细胞从转染后48 h开始,kd组细胞增殖率低于nc组和bl组,差异有统计学意义（P＜0.01）,而nc组和bl组细胞比较,细胞增殖率差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 抑制UHRF1在人卵巢癌细胞株HO-8910和HO-8910 PM的表达后,细胞的凋亡水平增高,增殖能力减弱.
- 邵丽佳沈利洪葛梦圆
- Hsa-miR-145调控Rab GTP酶家族成员27A基因对乳腺癌细胞株MDA-MB-231迁移和侵袭的影响被引量：2
- 2014年
- 目的 观察hsa-miR-145对Rab GTP酶（GTPase）家族成员27A（Rab27A）基因的靶向调控作用,以及对乳腺癌细胞体外迁移和侵袭能力的影响.方法 利用生物信息学软件筛选出hsa-miR-145与乳腺癌迁移侵袭能力相关的潜在的靶基因Rab27A,将含有hsa-miR-145结合位点的Rab27A3＆#39;端非编码区域（3＆#39;-UTR）片段（2 539 bp）连入psi-CHECK2载体,转染293T细胞48 h后检测hsa-miR-145与靶基因的结合特性.将hsa-miR-145模拟物和阴性对照10 μmol/L瞬时转染MDA-MB-231细胞,分别培养48、72 h检测Rab27A蛋白表达,18h检测细胞迁移率变化,24h检测细胞侵袭率的变化.结果 空白组双荧光测定比值为1.50±0.12,hsa-miR-145模拟物组为1.05±0.05,hsa-miR-145抑制物组为2.18-0.14.转染hsa-miR-145模拟物48、72 h后,与阴性对照组比较,Rab27A的相对蛋白表达量分别下降为59.07％、28.57％.MDA-MB-231细胞中过表达hsa-miR-145使细胞相对迁移率降低为（32.96±1.54）％,相对侵袭率降低为（43.89±2.80）％.结论 hsa-miR-145能与Rab27A直接结合,参与调控乳腺癌细胞的体外迁移与侵袭.
- 唐莉葛梦圆韦达严枫
- 关键词：乳腺癌
- miR-9通过调控UHRF1的表达影响细胞增殖和凋亡
- 目的 UHRF1 蛋白在DNA 甲基化和异染色质形成中发挥关键作用，继而抑制肿瘤抑制基因的表达促进肿瘤的发生，本文旨在探讨在结直肠癌(CRC)中调控UHRF1 表达的影响因子。
- 严枫竺明晨葛梦圆桂珍李金昌
- 关键词：结直肠癌MIR-9预后肿瘤发生
- miRNAs对乳腺癌诊断价值的系统评价
- 2014年
- 目的系统评价微小RNA（miRNA）定量PCR检测对乳腺癌的诊断价值。方法通过对Medline、Embase以及Cochrane Library数据库的检索,选出miRNA与乳腺癌诊断相关的研究。按照纳入和排除标准独立筛选文献,提取相关数据建立四格表,用诊断性实验准确性质量评价工具（QUADAS）评价纳入研究的文献质量。统计分析软件选用MetaDisc1.4、STATA11.0,分析miRNA的诊断价值。结果 16个研究被纳入,其中包括1 303例病例组样本,711例对照组样本。研究间存在阈值效应（Spearman相关系数为-0.758,P=0.001）。采用随机效应模型进行meta分析,miRNA的合并敏感度为0.77（95%CI：0.75-0.79）,合并特异度为0.77（95%CI：0.74-0.80）,阳性似然比为4.19（95%CI：2.79-6.30）,阴性似然比为0.25（95%CI：0.19-0.35）,诊断比值比为19.91（95%CI：9.68-40.95）。综合受试者工作特征（SROC）曲线的曲线下面积（AUC）为0.895 0。结论评价结果提示miRNA在乳腺癌诊断中一定的精确性,但它还不足以替代现有的诊断方法,乳腺癌的诊断仍然需要结合临床症状和传统检查共同进行。
- 葛梦圆桂珍唐锦莉竺明晨严枫
- 关键词：微小RNA乳腺癌META分析
