杨璐
- 作品数：5 被引量：15H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 甲基营养菌MP681基因组测序文库的构建
- 2010年
- 目的:建立甲基营养菌MP681基因组文库,用于鸟枪法测序。方法:提取MP681基因组DNA,经超声随机片段化及T4 DNA聚合酶末端修平处理后,与经SmaⅠ酶切、小牛肠碱性磷酸酶(CIP)去磷酸化处理的pUC19载体连接,电击转化大肠杆菌DH5α感受态,并通过末端双向测序对文库质量进行评价。结果:分别构建了2～4 kb和4～6 kb基因组文库,电泳结果显示插入片段长度与预期符合,文库库容均在10万以上。结论:构建了插入片段大小和库容符合要求的甲基营养菌MP681全基因组鸟枪法2～4 kb、4～6 kb测序文库。
- 杨璐熊向华汪建华张惟材
- 关键词：甲基营养菌基因组测序鸟枪法文库构建吡咯喹啉醌
- 食甲基菌吡咯喹啉醌合成相关基因簇及其编码蛋白系统
- 本发明公开了一种食甲基菌吡咯喹啉醌合成基因簇及其编码蛋白系统，分别为pqqABCDE和pqqFG。本发明还公开了编码上述吡咯喹啉醌合成基因簇，其核苷酸序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.12所示。本发明提供...
- 熊向华张惟材汪建华杨璐李淼鑫智静娟杨延新韦娜安佳佳
- 文献传递
- 氧化葡糖杆菌吡咯喹啉醌合成蛋白系统及其编码的基因簇
- 本发明公开了一种吡咯喹啉醌合成基因簇及其编码蛋白系统，其由1)由SEQ ID No.3、SEQ ID No.5、SEQ ID No.7、SEQ ID No.9、SEQ ID No.11所示的蛋白质组成；或由2)在EQ I...
- 熊向华张惟材汪建华杨延新智静娟杨璐李淼鑫韦娜安佳佳
- 文献传递
- 吡咯喹啉醌研究进展被引量：12
- 2009年
- 吡咯喹啉醌(PQQ)是继烟酰胺和黄素核苷酸之后发现的氧化还原酶的第3种辅酶,具有多种生理功能,在食品、医药及农业等行业有广泛的应用前景。我们简要综述了PQQ参与醌酶电子传递、增强微生物对极端环境的适应能力、促进植物生长、刺激神经生长因子生成等生物学功能及相关作用机制,介绍了PQQ生产菌、PQQ合成基因及PQQ生物合成的调控等方面的研究进展。
- 杨璐熊向华汪建华张惟材
- 关键词：吡咯喹啉醌生理功能辅酶生物合成基因
- 大肠杆菌pqqL基因敲除与功能分析被引量：3
- 2010年
- 【目的】通过构建大肠杆菌pqqL基因缺陷突变株,研究大肠杆菌pqqL基因的功能。【方法】首先通过PCR扩增得到pqqL基因和kan抗性基因,在体外构建线性打靶片段pqqL-kan-pqqL。然后通过Red同源重组敲除大肠杆菌的pqqL基因,构建大肠杆菌缺失突变体DH5αΔpqqL。在此基础上通过DCIP法检测山梨糖脱氢酶活性来比较大肠杆菌突变株与亲本株中PQQ合成的情况。【结果】成功敲除了大肠杆菌的pqqL基因,DCIP法检测结果显示大肠杆菌pBCP162/DH5αΔpqqL和pMD19T Simple-pqqABCDE/DH5α能够合成PQQ,而大肠杆菌pMD19T Simple-pqqABCDE/DH5αΔpqqL不能合成PQQ。【结论】大肠杆菌pqqL基因和pqqF基因具有同样的功能。
- 熊向华杨璐韩晓东汪建华张惟材
- 关键词：吡咯喹啉醌RED同源重组基因敲除
