安佳佳
- 作品数：13 被引量：19H指数：3
- 供职机构：滨州医学院附属医院更多>>
- 发文基金：山东省医药卫生科技发展计划项目滨州市科技发展计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- A型肉毒毒素内肽酶免疫检测方法的建立被引量：5
- 2019年
- 目的建立一种A型肉毒毒素内肽酶生物活性定量检测方法。方法首先构建参考底物蛋白SNAP251-197质粒并表达纯化,合成检测目标8肽序列且于兔体内制备并纯化其抗体;96孔板包被底物蛋白,利用ELISA方法建立A型肉毒毒素生物活性定量检测体系,并对检测方法的检测限、重复性及精密度等因素进行评价。结果成功表达纯化了SNAP251-197底物蛋白,制备并纯化了8肽兔多抗,建立了BoNT/A ELISA检测体系。结论成功建立了一种简便、灵敏、快速、稳定、可靠的A型肉毒毒素内肽酶生物活性定量检测方法。
- 安佳佳安佳佳汪建华熊向华张惟材
- 关键词：酶联免疫吸附测定
- 雌激素及孕酮及β-人绒毛膜促性腺激素联合检测在早期异位妊娠诊断中的应用价值被引量：2
- 2020年
- 目的探讨雌激素、孕酮及β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)联合检测在早期异位妊娠诊断中的应用价值。方法选取医院2018年1—12月收治的78例疑似早期异位妊娠患者作为研究对象,患者均行雌激素、孕酮及β-HCG检测,以病理学诊断结果为金标准,比较3项指标单一检测和联合检测的诊断价值。结果3项指标单一检测的诊断准确度、灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值比较,差异不大;联合检测的诊断准确度、灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值均高于3项指标单一检测。结论雌激素、孕酮及β-HCG联合检测在早期异位妊娠诊断中的应用价值较高,可提升诊断准确度,减少漏诊、误诊情况,为临床治疗提供精准依据。
- 杨晔李元焘彭新国董璐艳王雪安佳佳刘敬波
- 关键词：雌激素孕酮Β-人绒毛膜促性腺激素早期异位妊娠
- 突触小体相关蛋白SNAP25的原核表达、纯化及鉴定
- 2011年
- 目的:克隆突触小体相关蛋白(SNAP25)基因,原核表达、纯化并鉴定SNAP25蛋白。方法:PCR扩增SNAP25基因,克隆至表达质粒pTIG-Trx,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,Ni2+-NTA亲和层析纯化目的蛋白,SDS-PAGE及Western印迹分析肉毒神经毒素BoNT/A轻链对该蛋白的裂解情况。结果:构建了pTIG-SNAP25表达质粒,经IPTG诱导表达,目的蛋白占全菌蛋白的26.2%,表达形式为可溶性表达,表达量达115.4mg/L,纯化后蛋白纯度达95%以上;经SDS-PAGE及Western印迹分析,SNAP25蛋白可被BoNT/A轻链特异降解。结论:克隆了SNAP25基因,在原核系统中表达、纯化并鉴定了重组SNAP25蛋白。
- 安佳佳韦娜熊向华汪建华张惟材
- 关键词：基因克隆可溶性表达
- A型肉毒神经毒素轻链人源性抗体的筛选、表达与检测被引量：4
- 2016年
- 目的从全合成人源性噬菌体单链抗体库中筛选抗A型肉毒神经毒素轻链(Bo NT/A LC)特异性单抗,并进行全抗的表达、纯化与鉴定。方法根据大肠杆菌密码子偏好性优化并合成Bo NT/A LC序列,克隆至p TIG质粒,转化BL21(DE3)plys S感受态细胞,IPTG诱导表达后Ni-NTA亲和层析纯化目的蛋白。利用纯化的轻链蛋白从噬菌体抗体库中经"吸附-洗脱-扩增"程序淘选富集抗体并进行特异性筛选。PCR扩增抗体轻重链可变区分别连入L293-CL和H293载体,瞬时共转染293-F细胞,培养上清经Protein A柱纯化,通过SDS-PAGE、Western印迹和ELISA检测抗体纯度和特异性。结果可溶性表达的Bo NT/A LC占全菌蛋白的36.8%,纯化后蛋白纯度达99%。从噬菌体抗体库中筛选到10株单抗,选择其中特异性最好的两株单抗Lab1、Lab2制备了全抗,Western印迹和ELISA检测结果显示其可特异性识别结合Bo NT/A LC蛋白。结论该研究得到了两株特异性的Bo NT/A LC抗体,可能用于A型肉毒毒素检测和肉毒中毒治疗。
- 赵鹏胡颖安佳佳韦娜熊向华汪建华张惟材徐威
- 关键词：噬菌体抗体库
- 脐血与成人外周血中淋巴细胞分泌细胞因子能力的分析被引量：1
- 2016年
- 目的探讨脐血与成人外周血中淋巴细胞分泌细胞因子能力的关系。方法 2011年6月—2014年6月,从该院选取60例健康产妇志愿者和召集60例正常志愿者,分为观察组和对照组作为临床研究对象。取60例健康产妇志愿者分娩后的脐带血进行研究,同时对60例正常志愿者的外周血进行研究,将两组志愿者的淋巴细胞分泌细胞因子能力进行对比,并分析讨论。结果观察组和对照组志愿者在经过淋巴细胞分泌细胞因子能力的观察后,其中观察组淋巴细胞分泌细胞因子能力低于对照组(如脐血和成人外周血IFN-γ、TNF-α、TNF-α、IL-2、IL-4的t值分别为46.7382、65.267 7、54.904 3、18.404 6,P<0.05)。结论脐血与成人外周血中淋巴细胞分泌细胞因子能力相比较,在一定范围内充质干细胞和淋巴细胞分泌细胞因子能力有关,对植物血凝素诱导的淋巴细胞增殖具有抑制作用。
- 彭新国安佳佳董艳王健韩晓蓓
- 关键词：淋巴细胞细胞因子流式细胞术
- 硒通过核内积累IKKα诱导Jurkat细胞自噬依赖的caspase8激活
- 2016年
- 目的重点探索超营养剂量的亚硒酸钠诱导白血病Jurkat细胞自噬和凋亡的分子机制。方法 Western blot实验,明确亚硒酸钠对IKKα、P73、UVRAG以及凋亡标志性蛋白天冬氨酸蛋白水解酶8(caspase 8)的表达及活性影响。用细胞转染技术,明确相关信号分子在Jurkat细胞死亡过程中发挥的作用。间接免疫荧光实验用于判断相关分子在细胞内的定位情况。结果 20μmol/L亚硒酸钠可有效促进Jurkat细胞发生自噬和caspase 8相关的细胞凋亡(P<0.05),且caspase 8的活化依赖于细胞内的自噬水平(P<0.05)。此外,IKKα在细胞核内发生积累(P<0.05),进一步调节P73及自噬关键蛋白UVRAG的含量改变(P<0.05)。结论超营养剂量的亚硒酸钠通过核内积累IKKα,诱导Jurkat细胞发生自噬依赖的caspase 8激活及凋亡。
- 史可鉴吴成爱王莹安佳佳杨洋田伟
- 关键词：亚硒酸钠自噬CASPASE
- 亚硒酸钠对肺癌细胞迁移和血管生成的影响及其机制探究
- 2024年
- 目的:探讨亚硒酸钠(SS)对人非小细胞肺癌H520和A549细胞活力、迁移和血管形成模式的影响,并初步阐明其作用机制。方法:体外培养H520细胞、A549细胞及人脐静脉内皮细胞(HUVEC),分为对照组(0μmol/L SS)、低剂量组(5μmol/L SS)、中剂量组(10μmol/L SS)和高剂量组(20μmol/L SS)。采用CCK-8法检测各组细胞活力,计算半抑制浓度(IC_(50));细胞划痕实验检测各组细胞划痕愈合率;Transwell小室实验检测各组细胞迁移能力;血管形成实验检测亚硒酸钠对HUVEC血管管腔、肺癌细胞血管生成拟态管腔及肺癌细胞和HUVEC共同形成的“马赛克”血管管腔的影响;化学发光法检测各组肺癌细胞上清血管内皮生长因子(VEGF)表达量;RT-qPCR法检测VEGF、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)及血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)的mRNA表达水平;Western blot法检测H520和A549细胞中VEGF、p-PI3K和p-Akt蛋白水平。结果:SS处理48 h对HUVEC、A549细胞和H520细胞的IC_(50)值分别为6.762、9.003和7.356μmol/L。与各自对照组相比,SS处理48 h各组细胞划痕愈合率均降低(P<0.01);HUVEC中,中、高剂量组迁移细胞数减少(P<0.01);肺癌细胞系中,SS处理后各组迁移细胞数均减少(P<0.01);高剂量SS组VEGF、VEGFR2和Ang Ⅱ的mRNA水平表达量均降低(P<0.05,P<0.01);在H520细胞中,SS处理组VEGF、p-PI3K和p-Akt蛋白水平均降低(P<0.05,P<0.01)。结论:亚硒酸钠可抑制HUVEC、H520细胞及A549细胞活力及迁移,抑制肺癌细胞血管生成拟态及马赛克血管的形成,其机制可能与抑制PI3K-Akt信号通路激活及调控VEGF有关。
- 韩宇晨陈微微白玉杜静王飞王飞
- 关键词：亚硒酸钠血管内皮生长因子血管生成PI3K/AKT信号通路
- 异基因造血干细胞移植后细胞免疫重建与真菌感染的相关性被引量：3
- 2020年
- 目的探讨血液恶性肿瘤患者异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后CD^4+T细胞免疫重建及其与侵袭性真菌感染(IFI)的关系。方法选取2010年2月-2014年10月滨州医学院附属医院行allo-HSCT的血液恶性肿瘤患者47例,以同期体检健康者40名作为对照组。分别于移植后1、2、3个月采用流式细胞术检测患者移植后免疫细胞亚群数,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞因子浓度。观察患者移植后IFI发生情况,及其与CD^4+T细胞免疫重建的相关性。结果移植后CD^4+T细胞及其免疫细胞亚群数随时间递增,但移植后3个月免疫细胞亚群数仍低于对照组;与对照组比较,移植后白细胞介素(IL)-6和IL-10水平升高,转化生长因子(TGF)-β水平降低;IFI发生率为19.15%(9/47)。多因素Logistic回归分析结果显示,IFI可能与辅助性T细胞(Th)17的细胞数有关,而与Th1、Th2、调节性T细胞细胞数以及IL-6、IL-10、TGF-β和干扰素(IFN)-γ水平无关。结论CD^4+T细胞免疫重建延迟、Th17细胞数明显减少可能与allo-HSCT后IFI的发生有关。
- 彭新国孙长华安佳佳崔艳芳董艳王健高梅兰
- 关键词：异基因造血干细胞移植免疫重建侵袭性真菌感染
- A型肉毒毒素轻链表达及其生物活性检测
- 肉毒神经毒素(Botulinum neurotoxin, BoNT)是由厌氧的肉毒梭状芽孢杆菌产生的一种烈性蛋白毒素。肉毒毒素是目前已知毒性最强的蛋白毒素,被列入6种顶级生物恐怖剂之一,在民间误食肉毒毒素造成食物中毒的事...
- 安佳佳
- 关键词：肉毒毒素轻链内肽酶生物活性
- 文献传递
- 食甲基菌吡咯喹啉醌合成相关基因簇及其编码蛋白系统
- 本发明公开了一种食甲基菌吡咯喹啉醌合成基因簇及其编码蛋白系统，分别为pqqABCDE和pqqFG。本发明还公开了编码上述吡咯喹啉醌合成基因簇，其核苷酸序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.12所示。本发明提供...
- 熊向华张惟材汪建华杨璐李淼鑫智静娟杨延新韦娜安佳佳
- 文献传递
