陈姗 作品数:20 被引量:64 H指数:5 供职机构: 第三军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 新世纪高等教育教学改革工程 重庆市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
自主实验设计在七年制教学中的尝试 被引量:1 2003年 生物化学是医学专业的重要基础课,同时也是学生将来运用较多的工具学科.生物化学实验教学是生物化学教学的重要组成部分,是学生掌握基本生化技术,培养理论与实践相结合能力,提高科学思维能力和独立操作能力的最佳途径.为了加强对医学院校学生科研能力的训练和培养,我们连续 2年在七年制的实验教学中试行了以自主实验设计取代以往单纯的操作考试的实验考核方法,取得了满意效果. 陈姗 何凤田 李蓉芬 周建新 彭家和 江渝关键词:生物化学实验课 素质教育 人β-防御素3的cDNA克隆和表达载体的构建 被引量:9 2003年 目的 克隆人 β 防御素 3 (hβD 3 )cDNA并构建其原核表达载体 ,为更深入的抗菌肽活性研究及制备新型肽类抗生素创造条件。方法 从人扁桃体组织中提取总RNA ,经RT PCR扩增编码hβD 3成熟肽的cDNA序列 ,将其克隆至pUC18载体进行序列测定 ,然后构建于新型原核表达载体pQE 80L中。结果 RT PCR扩增得到约 13 5bp的目的DNA片断 ,序列分析与GenBank中报道的编码hβD 3成熟肽的cDNA序列完全一致。 结论 hβD 3cDNA的克隆和原核表达载体的构建 ,为进一步制备抗耐药菌的肽类抗生素奠定了基础。 陈姗 董燕麟 何凤田 李蓉芬 高会广 陈敏 彭家和关键词:抗菌肽 基因克隆 法尼酯衍生物X受体(FXR)在糖尿病肾病中的研究进展 2012年 糖尿病肾病(DN)是糖尿病常见的慢性微血管并发症,最初是由高血糖引起的肾脏适应性高滤过率,进而导致肾脏细胞的代偿性增生、炎症以及纤维化。法尼酯X受体(FXR)被证明对糖尿病肾病有负性调节的作用,FXR可以通过不同的方面(血糖、血脂、炎症以及纤维化)对糖尿病肾病进行调控,从而有效的控制糖尿病肾病的发生和发展。本文将对FXR以及FXR调控糖尿病肾病的不同方面予以综述。 熊浩君 赵凯 陈姗 何凤田 陈丙波关键词:糖尿病肾病 FXR 血糖 肾纤维化 炎症 GSK3β促进TGF-β1诱导的肾小管上皮HK-2细胞纤维化 被引量:5 2012年 目的阐明GSK3β对于肾脏小管间质纤维化的作用。方法以TGF-β1诱导的体外肾小管间质纤维化模型为研究对象,以GSK3β特异抑制剂LiCl处理细胞和不同GSK3β表达质粒(野生型GSK3β表达质粒GSK3β-WT;第9位点上丝氨酸突变为丙氨酸,由此不能再被磷酸化失活而具有固有活性的GSK3β突变质粒GSK3β-S9A;第85、86位点上赖氨酸突变为丙氨酸、失去激酶活性的GSK3β突变质粒GSK3β-KD)转染细胞,观察肾脏纤维化的标志性分子纤维连接素蛋白(fibronectin,FN)表达水平的改变,以及对TGF-β/Smad信号通路的作用。结果 LiCl增加HK-2细胞GSK3β的磷酸化,抑制GSK3β的活性,同时降低了细胞基础水平和TGF-β1诱导的FN表达。过表达的GSK3β-WT增强TGF-β1诱导的FN表达,而这种效应在GSK3β-S9A转染细胞更为显著。过表达GSK3β-KD抑制TGF-β1诱导的FN表达。分析对TGF-β/Smad信号通路的作用,LiCl可以抑制TGF-β1诱导的Smad3磷酸化,而对Smad2磷酸化水平无影响。同时,LiCl也不改变Smad3的总蛋白表达。结论 GSK3β通过TGF-β1/Smad3信号通路促HK-2细胞纤维化,抑制GSK3β可以抗纤维化。 赵凯 陈姗 龚如军 黎松 何凤田关键词:肾脏纤维化 糖原合成酶激酶3 腺病毒介导MCP-1-siRNA对人单核细胞体外迁移能力的影响 2008年 目的构建针对单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein 1,MCP-1)基因的小分子干扰RNA(siRNA)重组腺病毒,探讨干扰MCP-1表达对人单核细胞白血病株THP-1迁移能力的影响。方法设计并合成针对人MCP-1的siRNA的靶DNA序列,克隆于穿梭载体pAdTrack-CMV中,与带有腺病毒骨架质粒pAdeasy-1的BJ5183细菌中进行同源重组,获得重组腺病毒载体pAdeasy-si-MCP-1,转染人胚肾细胞株293细胞,包装并扩增病毒颗粒。体外感染能表达MCP-1的293细胞,RT-PCR检测siRNA对MCP-1转录水平影响。Millicell细胞迁移实验检测对人单核细胞白血病株THP-1体外迁移能力的影响。结果高糖诱导下,人293细胞MCP-1的表达增强;而Ad-si-MCP-1感染后,能够显著抑制高糖刺激的MCP-1 mR-NA水平的升高;Ad-si-MCP-1感染293细胞后的培养上清对THP-1的趋化作用较高糖刺激组及其siRNA阴性对照组显著降低。结论成功构建了抑制MCP-1表达的siRNA腺病毒载体,其抑制MCP-1表达可明显抑制高糖诱导的THP-1的趋化作用,提示MCP-1表达的干预可能为糖尿病肾病等MCP-1相关疾病提供新的预防和治疗手段。 谭力 缪洪明 甘立霞 卢忠燕 陈姗关键词:单核细胞趋化蛋白1 糖尿病肾病 抗人结肠癌单抗MC5的功能性ScFv在大肠杆菌中的可溶性表达(英文) 2003年 目的 制备抗人结肠癌单抗MC5的具功能活性的可溶性单链可变区片段 (ScFv)。方法 从分泌MC5的杂交瘤细胞分离mRNA ,RT PCR分别扩增抗体质量、轻链可变区基因 (VH和VLDNA) ,经linkerDNA连接形成ScFvDNA。将ScFvDNA与噬粒载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1,转化菌经辅助噬菌体M13KO7感染后 ,获得重组噬菌体。以高表达MC5结合抗原的人结肠癌细胞系SW4 80对重组噬菌体进行 2轮筛选后 ,经ELISA筛选呈现抗体ScFv片段的噬菌体单克隆。取 2个强阳性克隆的噬菌体感染大肠杆菌HB2 15 1,用于表达可溶性ScFv。经点印迹和Western印迹对可溶性ScFv进行鉴定 ,经ELISA检测可溶性ScFv的抗原结合活性。结果 所获得的VH、VL和ScFvDNA分别约为 340、32 0和 75 0bp。对重组噬菌体经 2轮亲和筛选后 ,经ELISA从 2 5个克隆中筛检出 10个抗原阳性克隆。源于 2个强阳性克隆的可溶性ScFv的分子质量为32 0 0 0u ,且浓集于细菌周质腔中 ,可溶性ScFv具有抗原结合活性 ,其结合位点与亲本单抗MC5相同。结论 针对MC5的具功能活性的可溶性ScFv的成功制备 ,为人结肠癌的体外 (乃至体内 ) 何凤田 郑英如 高会广 陈姗 李蓉芬 江渝 彭家和 钟小林关键词:大肠杆菌 可溶性表达 结肠癌 噬菌体呈现 人可溶性TRAILcDNA的克隆及新型原核表达载体的构建 2002年 目的 克隆人可溶性TRAIL (sTRAIL)cDNA并构建其原核表达载体 ,为制备新型抗癌分子创造条件。方法 提取HL 60细胞总RNA ,经RT PCR扩增编码人TRAIL 114~ 2 81氨基酸残基的cDNA序列 ,将其克隆至载体pUC19进行序列测定 ,然后构建于新型原核表达载体pQE 80L中。结果 RT PCR扩增得到了 5 0 4bp的DNA片段 ,序列分析表明与GeneBank中报道的编码人TRAIL 114~ 2 81氨基酸残基的cDNA序列完全一致。结论 sTRAILcDNA的克隆及其原核表达载体的构建 ,为进一步制备具有抗肿瘤活性的sTRAIL奠定了基础。 李蓉芬 何凤田 高会广 陈姗 江渝 叶治家 彭家和 陈敏关键词:STRAIL RT-PCR 克隆 CDNA 原核表达载体 胆固醇和其他脂蛋白成份检测中的几个问题 2001年 心血管疾病的影响使人们日益关注Tch、HDL ch、LDL ch等CAD相关危险因子在临床中的检测。国际合作将注意集中在了脂类 /脂蛋白试验的可靠性与方便性上。酶法、均相法、免疫法等方法的使用使临床检测更加广泛、快捷和精确 。 陈姗 董燕麟关键词:胆固醇 脂蛋白 甘油三酯 心血管疾病 生物化学中英文双语教学的点滴体会 从教师遴选、培训,教材选择,合理安排教学内容等方面,对高等院校生物化学课程的中英文双语教学模式进行了详细的研究,指出了教学环节需要注意的4个问题,以及正确处理中文和英文教学的关系. 何凤田 连继勤 戴双双 陈姗关键词:生物化学课程 双语教学 19S调节复合体中亚基之间的相互关系 2001年 陈姗 董燕麟 何凤田关键词:泛素 亚基