高会广
- 作品数：52 被引量：138H指数：5
- 供职机构：解放军第404医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市应用基础研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 我院加强抗菌药物合理应用的做法被引量：3
- 2014年
- 本文在提高认识、制度规范、跟踪问效等方面,总结了加强抗菌药物合理应用的做法。
- 王兵李福平祖鲁宁高会广
- 关键词：抗菌药物
- 人可溶性B淋巴细胞刺激因子结合小肽的筛选及其免疫抑制功能分析
- 2004年
- 目的筛选和鉴定B淋巴细胞刺激因子(BLyS)的抑制性小肽。方法用重组人BLyS筛选噬菌体构象型7肽库,人工合成小肽鉴定其免疫抑制功能。结果经过筛选,得到两个阳性噬菌体克隆,人工合成的两个小肽在体外能特异性地抑制BLyS刺激细胞增生的活性。结论获得了两个能够抑制BlyS功能的小肽。
- 吉清郑英如李蓉芬钟小林高会广何凤田
- 关键词：B淋巴细胞刺激因子免疫抑制噬菌体刺激细胞体外
- 肿瘤坏死因子家族的B细胞激活因子免疫抑制分子的表达及免疫原性分析
- 2007年
- 目的制备异源性T辅助细胞表位修饰的人可溶性肿瘤坏死因子家族的B细胞激活因子(BAFF)突变体,并对其免疫抑制功能进行分析。方法经原核表达和Ni-NTA层析纯化制备异源性T辅助细胞表位修饰的人可溶性BAFF突变体;用所制备的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清中抗人BAFF抗体的滴度;四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验检测免疫小鼠血清抑制重组sBAFF和天然sBAFF功能的情况。结果重组蛋白在大肠杆菌中均获得了高效表达;经Ni-NTA层析纯化后,目的蛋白的纯度均达90%以上;用重组蛋白免疫小鼠均可诱导产生高滴度抗人可溶性BAFF抗体;免疫小鼠血清可抑制重组sBAFF和天然sBAFF刺激淋巴细胞增殖的功能。结论成功制备了可诱导产生高滴度特异性抗体的BAFF免疫抑制分子,为进一步探讨其治疗作用奠定了基础。
- 高会广何凤田李蓉芬吉清黄刚胡大强张立龚薇胡颖
- 关键词：肿瘤坏死因子类
- 重组人可溶性B淋巴细胞激活因子的制备及活性分析被引量：1
- 2004年
- 目的 制备具有功能活性的人TNF家族的B细胞激活因子 (BcellactivatingfactortotheTNFfamily ,BAFF)胞外区 134～ 2 85氨基酸残基段 ,为BAFF的深入研究创造条件。方法 提取人新鲜扁桃体组织总RNA ,经RT PCR扩增编码人BAFF胞外区 134～ 2 85氨基酸残基cDNA ,经序列测定后 ,构建于原核表达载体 pQE 80L并转化大肠杆菌DH5α ,经IPTG诱导表达及Ni2 + NTA柱层析纯化目的蛋白 ,行SDS PAGE和Western印迹检测。最后经MTT法检测其增殖活性。结果 RT PCR扩增得到了 4 5 9bp的cDNA片段 ,序列分析与GenBank中报道的编码人BAFF13 4 2 85的cDNA序列一致 ,SDS PAGE及Western印迹证实表达蛋白确实为 6×His BAFF13 4 2 85融合蛋白并存在于包涵体中。活性检测证实其能明显刺激肿瘤细胞的增殖。结论 利用大肠杆菌可高效表达rhBAFF13 4 2 85,得到的纯化蛋白具有较高的生物学活性 ,为进一步的研究奠定了基础。
- 陈麟凤何凤田李蓉芬钟小林张艳高会广吉清
- 关键词：CDNA克隆原核表达淋巴细胞活化
- 人β-防御素3的cDNA克隆和表达载体的构建被引量：10
- 2003年
- 目的 克隆人 β 防御素 3 (hβD 3 )cDNA并构建其原核表达载体 ,为更深入的抗菌肽活性研究及制备新型肽类抗生素创造条件。方法 从人扁桃体组织中提取总RNA ,经RT PCR扩增编码hβD 3成熟肽的cDNA序列 ,将其克隆至pUC18载体进行序列测定 ,然后构建于新型原核表达载体pQE 80L中。结果 RT PCR扩增得到约 13 5bp的目的DNA片断 ,序列分析与GenBank中报道的编码hβD 3成熟肽的cDNA序列完全一致。 结论 hβD 3cDNA的克隆和原核表达载体的构建 ,为进一步制备抗耐药菌的肽类抗生素奠定了基础。
- 陈姗董燕麟何凤田李蓉芬高会广陈敏彭家和
- 关键词：抗菌肽基因克隆
- N-乙酰半胱氨酸对慢性阻塞性肺疾病患者听功能损害的预防作用
- 2014年
- 目的探讨口服N-乙酰半胱氨酸（N—AC）对减轻慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者听功能损害的预防作用。方法选择COPD患者237例，按计算机简单随机法分为两组：试验组166例和对照组71例，分别给予口服N—AC片剂600mg／d和等量安慰剂，随访观察2年。两组受试者治疗前、后均行听性脑干诱发反应（ABR）和血气分析检查，对检查结果进行统计学分析。结果两组患者治疗后的ABR波V阈值、波I潜伏期及I—V波间期比较，有统计学差异（P〈0．05），其中，治疗组与本组治疗前比较有统计学差异（P〈0．05），对照组与本组治疗前比较有显著统计学差异（P〈0．01）。结论口服N—AC能有效减轻COPD患者的听功能损害。
- 葛振民蔡岩高会广黄宗文宋丽
- 关键词：N-乙酰半胱氨酸慢性阻塞性肺疾病听阈
- 异型输血未发生急性溶血性输血反应1例报告被引量：1
- 2000年
- 王景胜姜志高夏志勇何海松高会广
- 关键词：异型输血输血反应
- 噬菌体抗体库技术制备胃癌单抗MGd1的抗独特型抗体
- 2005年
- 目的获得胃癌单抗MGd1的噬菌体呈现型抗独特型抗体(抗-Id),为研制针对MGd1的抗-Id重组胃癌瘤苗创造条件。方法分离经单抗免疫鼠脾脏的mRNA,经RT-PCR分别扩增抗体VH和VLDNA,进而连接形成ScFvDNA。将ScFvDNA与载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经M13KO7挽救后获得噬菌体呈现型ScFv文库。以MGd1对文库进行4轮筛选后,随机挑取克隆经ELISA筛选呈现抗-IdScFv的噬菌体单克隆,进而经竞争ELISA对其所属抗-Id类型进行初步鉴定。结果VH、VL和ScFvDNA分别约为340、320和750bp。抗体ScFv文库经4轮筛选后,在随机筛检的40个克隆中得到17个呈现抗-IdScFv的噬菌体单克隆。在17个克隆中,有3个呈现β或γ型抗-IdScFv。结论应用噬菌体抗体库技术成功制备了针对单抗MGd1的抗-IdScFv,从而为筛选新的胃癌重组抗-Id瘤苗奠定了基础。
- 何凤田李蓉芬郑英如高会广吉清龚薇胡颖
- 关键词：胃癌抗独特型抗体噬菌体抗体库
- 人可溶性TRAILcDNA的克隆及新型原核表达载体的构建
- 2002年
- 目的 克隆人可溶性TRAIL (sTRAIL)cDNA并构建其原核表达载体 ,为制备新型抗癌分子创造条件。方法 提取HL 60细胞总RNA ,经RT PCR扩增编码人TRAIL 114～ 2 81氨基酸残基的cDNA序列 ,将其克隆至载体pUC19进行序列测定 ,然后构建于新型原核表达载体pQE 80L中。结果 RT PCR扩增得到了 5 0 4bp的DNA片段 ,序列分析表明与GeneBank中报道的编码人TRAIL 114～ 2 81氨基酸残基的cDNA序列完全一致。结论 sTRAILcDNA的克隆及其原核表达载体的构建 ,为进一步制备具有抗肿瘤活性的sTRAIL奠定了基础。
- 李蓉芬何凤田高会广陈姗江渝叶治家彭家和陈敏
- 关键词：STRAILRT-PCR克隆CDNA原核表达载体
- 从噬菌体构象型7肽库中筛选BLyS的抑制性短肽被引量：2
- 2004年
- 目的 :从噬菌体构象型 7肽库中筛选BLyS的抑制性短肽。方法 :用重组人BLyS筛选噬菌体构象型 7肽库 ,用间接ELISA、竞争ELISA和细胞增殖活性试验鉴定噬菌体克隆。结果 :经过 3轮亲和筛选 ,噬菌体的回收率增加 ,阳性克隆得到富集。所获两个阳性噬菌体克隆能特异性地抑制BLyS刺激细胞增殖的活性。结论 :获得了噬菌体呈现的能够抑制BLyS的两个短肽。
- 吉清何凤田李蓉芬高会广郑英如钟小林郑汉其
- 关键词：BLYS噬菌体肽库小肽
