李蓉芬 作品数:65 被引量:179 H指数:7 供职机构: 第三军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 新世纪高等教育教学改革工程 重庆市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 农业科学 更多>>
人可溶性增殖诱导配体促HeLa细胞增殖作用的研究 2007年 目的观察人可溶性增殖诱导配体(soluble a proliferation-induced ligand,sAPRIL)是否具有促进宫颈癌细胞株HeLa增殖的作用及其机制。方法用Brdu法检测sAPRIL蛋白对人宫颈癌HeLa细胞增殖的作用,进而用RT-PCR法检测HeLa细胞APRIL受体的表达情况。结果原核表达的sAPRIL蛋白能促进HeLa细胞增殖。HeLa细胞表达APRIL的受体HSPG1、HSPG2,而不表达BCMA、TACI及HSPG4。结论sAPRIL有明确的促HeLa细胞增殖作用。由于HeLa细胞有APRIL受体HSPG1、HSPG2的表达,我们初步推测该作用可能是通过HSPG1及HSPG2起作用的。 郑英如 李力 刘宝英 李媛 李蓉芬 郭建新关键词:增殖诱导配体 受体 宫颈癌 细胞增殖 探索教学法在分子生物学教学中的实践研究 2003年 近年来,我校在临床医学、预防医学和检验医学等不同专业五年制本科的分子生物学教学中进行了"探索教学法"尝试.通过对300名学生进行问卷调查,结果表明:有90%的学生认为探索教学法能激发学生的学习兴趣,提高思维能力,并能引导同学们将分子生物学理论和临床实际相联系.进一步分析发现,上述结果在不同专业的五年制学生之间没有显著差异. 钟小林 周建新 江渝 李蓉芬 彭家和 何凤田关键词:探索教学法 分子生物学 教学 课堂教学 以问题为基础的学习在生化实验教学中的应用 被引量:7 2003年 "以问题为基础的学习"(Problem-based Learning,简称PBL)是一种以问题作为学生的动力和引导,启发学生掌握学习内容的教学方法.PBL教学在临床教学和桥梁学料中应用较为广泛,而在基础教学中应用相对较少.这其中又以在大班理论课的知识讲授中运用较多,在实验教学中则相对涉及较少.我们将PBL教学法扩展,在生物化学与分子生物学实验教学中予以应用,取得了较好效果,现介绍如下. 陈姗 何凤田 江渝 李蓉芬 彭家和 周建新关键词:实验教学 PBL教学 生物化学 分子生物学 医学院校 人β-防御素3的cDNA克隆和表达载体的构建 被引量:9 2003年 目的 克隆人 β 防御素 3 (hβD 3 )cDNA并构建其原核表达载体 ,为更深入的抗菌肽活性研究及制备新型肽类抗生素创造条件。方法 从人扁桃体组织中提取总RNA ,经RT PCR扩增编码hβD 3成熟肽的cDNA序列 ,将其克隆至pUC18载体进行序列测定 ,然后构建于新型原核表达载体pQE 80L中。结果 RT PCR扩增得到约 13 5bp的目的DNA片断 ,序列分析与GenBank中报道的编码hβD 3成熟肽的cDNA序列完全一致。 结论 hβD 3cDNA的克隆和原核表达载体的构建 ,为进一步制备抗耐药菌的肽类抗生素奠定了基础。 陈姗 董燕麟 何凤田 李蓉芬 高会广 陈敏 彭家和关键词:抗菌肽 基因克隆 人高迁移率族B1的表达及其多克隆抗体的制备与鉴定 被引量:5 2005年 目的以原核表达的人高迁移率族B1(Highmobilitygroupbox1,HMGB1)蛋白为免疫原免疫日本大耳白兔,制备其兔多克隆抗体并进行鉴定。方法将人HMGB1cDNA克隆于原核表达载体pQE-80L并转化大肠杆菌DH5α,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导HMGB1表达,Ni2+-NTA层析纯化后,用其免疫兔。以ELISA检测抗体效价,Westernblot鉴定抗体特异性。结果成功表达并纯化了人HMGB1蛋白,纯化后纯度可达96%;ELISA法测定抗体效价为1∶25600;Westernblot结果显示所制备的抗体可特异性与人HMGB1蛋白结合。结论成功制备了兔抗人HMGB1多克隆抗体,为进一步研究HMGB1与相关疾病的关系打下了基础。 邢效如 杨朝辉 郑英如 胡大强 黄刚 龚薇 何凤田 李蓉芬关键词:原核表达 多克隆抗体 浅谈“五改四”后搞好生化教学的措施 2001年 何凤田 李蓉芬 等关键词:生物化学 新教学模式 大鼠脾脏20S蛋白酶体的分离纯化及电镜观察 2000年 目的 分离纯化正常大鼠脾脏 2 0S蛋白酶体 ,并观察其形态特征。方法 采用分级盐析、离子交换层析及凝胶过滤方法 ,分离纯化了正常大鼠脾脏 2 0S蛋白酶体 ,并进行透射电镜观察。结果 所制备的2 0S蛋白酶体纯度较高 ,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)显示 1条带 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)显示 8条带 ,分子量为 ( 19.8~ 31.7)× 10 3;电镜观察显示 ,脾脏 2 0S蛋白酶体呈现典型的圆筒状 ,具有同其它细胞 2 0S蛋白酶体一样的形态特征。结论 这为进一研究 2 0S蛋白酶体结构与功能的关系奠定了基础。 李蓉芬 倪兵 李渝萍 周建新关键词:纯化 电镜 脾脏 提高生物化学实验教学质量的几点尝试 2002年 生物化学是一门实验科学,必须重视提高实验教学的质量.笔者在多年的教学实践中,做了以下几点尝试并取得了较满意的效果:1.充分发挥带教教员的主导作用;2.大力加强学员的技能培训;3.重视发挥学员的主体作用. 李蓉芬 陈敏 康运生 何凤田关键词:实验教学 生物化学 医学教育 教学质量 教学方法 针对单克隆抗体MGb1的重组抗独特型抗体的筛选与鉴定(英文) 被引量:1 2006年 目的利用噬菌体呈现技术筛选针对抗胃癌单克隆抗体(简称单抗)MGb1的重组抗独特型抗体(抗-Id),为研制胃癌重组抗-Id瘤苗提供候选分子。方法以单克隆抗体MGb1免疫Balb/c小鼠,取脾分离mRNA。RT-PCR分别扩增抗体VL和VHcDNA,经linker DNA连接形成ScFv DNA。将ScFv DNA与载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经M13KO7感染后,获得重组噬菌体抗体ScFv文库。以单抗MGb1对文库进行4轮淘选后,随机挑取克隆经ELISA筛选呈现抗-Id ScFv的噬菌体单克隆,进而经竞争ELISA对其所属抗-Id类型进行初步鉴定。结果VL和VHcDNA分别约为320和340 bp,ScFv DNA约为750 bp。抗体ScFv文库经四轮淘选后,在随机筛检的50个克隆中得到18个呈现抗-Id ScFv的噬菌体单克隆。在18个克隆中,有4个呈现β或γ型抗-Id ScFv。结论经重组噬菌体抗体技术成功地筛选到了针对单抗MGb1的噬菌体呈现型抗-IdScFv,从而为进一步获得能诱导抗胃癌免疫的抗-Id ScFv奠定了基础。 郑英如 李蓉芬 李力 黄刚 张立 胡大强关键词:胃癌 抗独特型抗体 噬菌体呈现技术 肿瘤疫苗 噬菌体抗体库技术制备胃癌单抗MGd1的抗独特型抗体 2005年 目的获得胃癌单抗MGd1的噬菌体呈现型抗独特型抗体(抗-Id),为研制针对MGd1的抗-Id重组胃癌瘤苗创造条件。方法分离经单抗免疫鼠脾脏的mRNA,经RT-PCR分别扩增抗体VH和VLDNA,进而连接形成ScFvDNA。将ScFvDNA与载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经M13KO7挽救后获得噬菌体呈现型ScFv文库。以MGd1对文库进行4轮筛选后,随机挑取克隆经ELISA筛选呈现抗-IdScFv的噬菌体单克隆,进而经竞争ELISA对其所属抗-Id类型进行初步鉴定。结果VH、VL和ScFvDNA分别约为340、320和750bp。抗体ScFv文库经4轮筛选后,在随机筛检的40个克隆中得到17个呈现抗-IdScFv的噬菌体单克隆。在17个克隆中,有3个呈现β或γ型抗-IdScFv。结论应用噬菌体抗体库技术成功制备了针对单抗MGd1的抗-IdScFv,从而为筛选新的胃癌重组抗-Id瘤苗奠定了基础。 何凤田 李蓉芬 郑英如 高会广 吉清 龚薇 胡颖关键词:胃癌 抗独特型抗体 噬菌体 抗体库