程龙
- 作品数：50 被引量：76H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- PES1蛋白与雄激素受体的相互作用及定位
- 2014年
- 目的：研究PES1蛋白与雄激素受体（An）之间的相互作用。方法：利用免疫共沉淀实验检测PES1蛋白与AR之间的相互作用，并进行相互作用定位；利用Western印迹研究PESl对乳腺癌细胞内AR表达水平的影响。结果：免疫共沉淀实验显示PES1蛋白与AR存在相互作用；PES1蛋白的1—110、111-220、221-320和311-588氨基酸残基（aa）区域均能与AR结合，415～588aa不能结合AR；AR的651-918aa区域与PESl结合。PESl不能调节乳腺癌细胞AR的表达水平。结论：PES1多个区域均能与AR相互作用，并且主要结合在AR的转录激活结构域2，为进一步探讨PES1对AR功能的调节奠定了基础。
- 关鑫王洪远任伟杜佩云秘晓林程龙叶棋浓
- 关键词：雄激素受体相互作用乳腺癌
- 组蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活作用检测
- 2013年
- 目的:构建组蛋白H2A、H2B、H3、H4的酵母双杂交诱饵载体,检测其在酵母细胞中的表达和自激活活性,为应用酵母双杂交系统筛选与组蛋白相互作用的蛋白奠定基础。方法:扩增H2A、H2B、H3、H4蛋白基因编码区cDNA序列,克隆至酵母表达载体pGBK-T7中,再将其转化至酵母细胞AH109中,提取酵母总蛋白,检测各种组蛋白的表达,并检测表达的组蛋白在酵母细胞中对报告基因有无自激活作用。结果:将H2A、H2B、H3、H4基因的cDNA克隆至酵母表达载体pGBK-T7中,其中组蛋白H4得到正确表达,且对报告基因LacZ、HIS3、Ade无激活作用。结论:可以利用酵母双杂交系统筛选与H4相互作用的蛋白质。
- 李玮妮李法曾张浩陈立涵程龙徐小洁刘婕叶棋浓
- 关键词：组蛋白酵母双杂交表观遗传
- c-Myb截短突变体的构建及其对c-Myc蛋白表达的调节
- 2014年
- 目的：为了研究c-Myb蛋白各结构域的功能，构建c-Myb的6种截短突变体c-Myb-1~c-Myb-6的真核表达载体，测定不同突变体对c-Myc蛋白表达的影响。方法：以野生型c-Myb为模板，PCR扩增c-Myb-1~c-Myb-6片段，分别克隆到pcDNA3.0-FLAG载体，Western印迹检测克隆载体在293T细胞内的表达；将上述载体与野生型c-Myb转染乳腺癌细胞株MCF-7，检测其对c-Myb下游基因c-Myc表达的影响。结果：构建了c-Myb-1~c-Myb-6表达载体，与野生型c-Myb相比，c-Myb-1、c-Myb-4、c-Myb-5均能够促进MCF-7细胞中c-Myc的表达，而c-Myb-2、c-Myb-3、c-Myb-6则不能。结论：该研究为进一步探讨c-Myb在乳腺癌中的功能奠定了基础。
- 秦玺程龙饶春明高凯杨琦史新昌徐小洁叶棋浓王军志
- 关键词：C-MYB真核表达载体C-MYC
- 人Egr-1启动子的克隆及其在肿瘤细胞中的辐射诱导反应被引量：3
- 2009年
- 目的:克隆人Egr-1基因的启动子,插入荧光素酶报告基因载体中,并检测电离辐射对其活性的影响。方法:采用PCR技术从人乳腺癌细胞系MCF-7基因组中扩增出Egr-1启动子,将其克隆到pGL3-basic载体中;将重组质粒转染人肿瘤细胞,测定Egr-1启动子在不同辐射条件下转录活性的改变。结果:成功构建了Egr-1启动子的荧光素酶报告基因;在不同剂量的γ射线照射后,Egr-1的启动子活性均明显高于未照射组;在同一剂量照射后48 h,Egr-1的启动子活性达峰值。结论:本实验构建的Egr-1启动子具有辐射激活的功能,为进一步研究放射-基因治疗奠定了基础。
- 徐小洁丁丽华王凌雪秦玺程龙蒋凯叶棋浓
- 关键词：EGR-1启动子启动子活性
- RBPMS不同剪接体的真核表达和亚细胞定位
- 2013年
- 目的：构建具有多种剪接形式的RNA结合蛋白（RBPMS）基因的真核表达载体，并在真核细胞中表达，确定不同形式的RBPMS在细胞中的定位。方法：采用PCR技术从人卵巢cDNA文库中扩增RBPMS基因的几种完整编码序列（命名为RBPl～RBP4），克隆到带绿色荧光蛋白标签的pEGFP-C1表达载体上，转染人胚肾细胞293T，Western印迹鉴定RBPMS的表达，并利用激光共聚焦显微镜观察RBPMS不同剪接体在细胞中的定位。结果：限制性内切酶分析和DNA序列测定表明构建的重组表达载体正确，Western印迹实验证明RBP1～RBP4表达成功。通过激光共聚焦显微镜观察，RBP1／4围绕胞核在核膜的周围呈聚集状分布；RBP2则在细胞质和细胞核中均有分布，但会出现斑点状聚集；RBP3呈半月状紧密分布在细胞核周围；RBPMS中的RNA识别基序缺失后，这种现象消失，与空载体对照类似，在细胞核和细胞质中均有分布。结论：构建并表达了RBPMS基因的真核表达载体，RBPMS不同剪接体及RNA识别基序缺失后具有不同的亚细胞分布模式，提示具有不同的功能。
- 付洁王瑜程龙徐小洁张浩宋海峰叶棋浓
- 关键词：剪接体细胞内定位RNA结合蛋白
- c-Fos不同结构域的真核表达及功能鉴定
- 2013年
- 目的:克隆c-Fos蛋白不同结构域基因片段,构建其含FLAG标签的真核表达载体,并鉴定其功能。方法:用PCR方法扩增获得c-Fos不同结构域片段基因,定向克隆至本实验室保存的FLAG-pcDNA3.0载体中,瞬时转染293T细胞进行表达,并以本实验室保存的HA-c-Jun与FLAG-c-Fos不同结构域片段免疫共沉淀鉴定其相互作用区域,以佐证所构建的c-Fos结构域克隆的正确性。结果:测序结果表明c-Fos不同结构域序列正确,Western印迹显示可以在真核细胞中获得表达,并且免疫共沉淀结果显示c-Jun可以与c-Fos的bZIP区域特异性结合。结论:构建并表达了c-Fos不同结构域片段,为进一步研究与c-Fos相互作用的蛋白及其区域定位奠定了基础。
- 付洁王瑜程龙徐小洁张浩宋海峰叶棋浓
- 关键词：C-FOS激活蛋白1C-JUN免疫共沉淀
- FHL3在制备用于治疗肿瘤的药物中的用途
- 本发明涉及FHL3在制备用于治疗肿瘤的药物中的用途。具体地说，本发明涉及FHL3在制备用于调节癌基因和/或抑癌基因在哺乳动物细胞内表达的药物中的用途，以及FHL3在制备用于抑制哺乳动物肿瘤细胞生长的药物中的用途。本发明还...
- 叶棋浓丁丽华秦玺杨晓牛畅程龙严景华黄翠芬
- 文献传递
- 乳腺癌中雌激素受体α表达水平调节的分子机制被引量：6
- 2010年
- 雌激素受体α(ERα)在乳腺癌的发生发展中扮演重要角色,因而ERα成为乳腺癌治疗的分子靶标。ERα的表达水平在乳腺癌患者中差异较大,即使同一患者,在乳腺癌的不同阶段也可能有很大的差别。乳腺癌内分泌治疗的疗效以及预后都与ERα表达水平密切相关。影响ERα表达水平的分子机制复杂,众多调节分子在染色质、转录、转录后、翻译和翻译后等水平参与ERα表达水平的调节。在染色质和转录水平,许多分子通过直接或间接地与ERα启动子的相互作用改变ERα的转录;在转录后/翻译水平,一些microRNA通过诱导ERαmRNA的降解和/或抑制其翻译降低ERα的水平;在翻译后水平,许多分子通过泛素-蛋白酶体途径调节ERα蛋白水平。文章从不同水平,对这些调节分子的调节机制进行简要综述。
- 程龙黄翠芬叶棋浓
- 关键词：乳腺癌基因表达调控雌激素受体Α
- 琼脂糖凝胶的合适浓度对于回收酶切后质粒载体的重要性被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨琼脂糖凝胶的不同浓度对回收不同大小的酶切后质粒载体纯度的影响。方法:将2种质粒载体酶切,并经不同浓度的琼脂糖凝胶电泳分析,通过比较酶切前和酶切后载体的相对位置,研究胶浓度对回收酶切后载体纯度的影响。结果:不同浓度的琼脂糖凝胶中,酶切前和酶切后载体的相对位置会发生变化,对能否成功回收到纯度高的酶切后DNA片段有重要影响;质粒大小不同,胶浓度的影响也不同。结论:合适的胶浓度对于回收酶切后质粒载体具有重要意义,应选择合适的胶浓度回收酶切后质粒载体。
- 程龙周岩丁丽华叶棋浓
- 关键词：电泳
- siRNA抑制ErbB2基因的表达及对乳腺癌细胞生长的影响被引量：4
- 2011年
- 目的:设计并构建ErbB2的小干扰RNA,检测其对ErbB2蛋白表达的干扰效果,并检测其对乳腺癌细胞ZR75-1生长的影响。方法:设计2条针对ErbB2的siRNA,并克隆到siRNA表达载体pSliencer 2.1-U6 neo上。经酶切和测序证明构建成功后,将其与pcDNA3-FLAG-ErbB2共转染于293T细胞,以及单转siRNA于乳腺癌SKBR3和ZR75-1细胞,通过Western blot分别检测siRNA对外源和内源ErbB2的干扰效果。通过结晶紫实验研究siRNA对ZR75-1生长的影响。结果:Western blot证明构建的两条ErbB2 siRNA均能有效抑制外源和内源ErbB2蛋白的表达,并抑制乳腺癌ZR75-1细胞的生长。结论:构建的siRNA能有效地抑制ErbB2蛋白的表达并抑制ZR75-1细胞的生长。
- 蒋凯杨智洪王朝云徐小洁程龙张浩韩永健叶棋浓
- 关键词：ERBB2SIRNA乳腺癌细胞生长
