周末
- 作品数:11 被引量:35H指数:5
- 供职机构:延边大学农学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金吉林省教育厅资助项目吉林省科技厅资助项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生理学更多>>
- 牛瑟氏泰勒虫P23和P33表面蛋白双基因融合表达载体的构建及原核表达被引量:5
- 2008年
- 为探索牛瑟氏泰勒虫的表面蛋白基因融合产物作为双价疫苗的可行性,以牛瑟氏泰勒虫基因组DNA为模板,通过重叠延伸拼接聚合酶链式反应(SOE-PCR)把P23和P33表面蛋白基因连接一起,2个基因之间插入一个linker(Gly4Ser)3,经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切,获得1151bp的双基因融合片段,克隆于表达质粒pGEX-4T-1中,构建了双基因重组表达载体pGEX-4T-P23-P33,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导,表达出预期大小70.0ku的融合蛋白。Western blot检测结果显示,该蛋白与牛瑟氏泰勒虫抗血清呈阳性反应,表明融合蛋白具有反应原性,为进一步研究此融合蛋白作为疫苗候选成分提供了理论依据。
- 曹世诺于龙政薛书江贾立军周末张守发
- 关键词:牛瑟氏泰勒虫融合基因表达
- 嗜水气单胞菌灭活苗对林蛙免疫效果的初步研究被引量:10
- 2009年
- 用分离于患红腿病的长白山中国林蛙的嗜水气单胞菌,采用热灭活的方法制成嗜水气单胞菌灭活苗,通过不同的途径免疫接种林蛙,通过测定受免林蛙血清中凝集抗体效价,探讨林蛙对热灭活的嗜水气单胞菌菌苗的免疫应答状况。结果表明,受免林蛙血清中凝集抗体效价可达到27,明显高于对照组。通过检测免疫林蛙的免疫保护率发现受免林蛙中口服免疫组、浸泡免疫组、腹腔注射组、肌肉注射组的免疫保护力可达71%、76%、59%、47%。
- 周末李艳茹曹世诺王开艳李太元
- 关键词:嗜水气单胞菌灭活苗免疫
- 犬源乳酸菌高密度培养条件的优化被引量:5
- 2007年
- 本文研究了犬源乳酸菌生长繁殖的环境条件(温度、接种量、起始pH等)和培养基组成(氮源、碳源等),优化确定了犬源乳酸菌密度培养的适宜培养条件为:起始pH为6.5,培养温度为37℃,培养基配比为麦芽糖∶乳糖(1∶1)2%、牛肉浸膏1.0%、缓冲盐A0.5%,NaCl 0.25%,MgSO40.1%,接种量5%,结合优化的培养条件,可使犬源乳酸菌活菌数得到进一步提高。
- 谷长维李太元常巧呈周末赵义龙
- 九种植物提取物对嗜水气单胞菌抑菌效果的观察被引量:5
- 2007年
- 陈雪李太元李云华周末赵义龙
- 关键词:嗜水气单胞菌植物提取物抑菌效果药物残留淡水养殖业细菌分类
- 牛瑟氏泰勒虫P33表面蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
- 2009年
- 应用PCR方法扩增了牛瑟氏泰勒虫吉林株P33表面蛋白基因片段,并将扩增产物与pMD18-T载体连接,重组质粒经PCR、双酶切鉴定后测序;构建P33重组pGEX-4T-3表达载体,转化大肠杆菌BL-21,经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE、免疫印记分析。结果显示,获得P33基因完整开放阅读框长868 bp,编码292个氨基酸,与中国株同源性为99.1%;表达的融合蛋白相对分子质量为59 000,能被牛瑟氏泰勒虫阳性血清识别,表明该融合蛋白具有较好的免疫原性。
- 曹世诺于龙政薛书江周末刘廷张守发
- 关键词:牛瑟氏泰勒虫克隆
- 腐植酸对部分肠道菌群的影响被引量:1
- 2008年
- 李云华姚鹏周末赵义龙陈雪李太元
- 关键词:肠道菌群腐植酸肠道微生态
- 林蛙嗜水气单胞菌外膜蛋白基因的克隆、分析及蛋白结构预测被引量:6
- 2009年
- 根据GenBank上发表的嗜水气单胞菌外膜蛋白基因的核苷酸序列设计并合成1对特异性引物,采用PCR方法,扩增出与预期设计的740 bp大小相符的片段,将扩增产物连接到pMD18-T载体上,进行序列测定和分析。结果表明,所克隆的目的基因的核苷酸长为740 bp,共编码246个氨基酸。该基因片段与已发表的嗜水气单胞菌外膜蛋白基因核苷酸序列同源性为98.78%,氨基酸同源性为98.78%。利用生物信息学和分子生物学软件,对嗜水气单胞菌外膜蛋白的结构进行预测,结果表明其为外膜孔蛋白。本试验为嗜水气单胞菌外膜蛋白的表达及基因工程疫苗的研制奠定了基础。
- 周末曹世诺李艳茹李云华于海茹王开艳李太元
- 关键词:基因克隆蛋白结构预测
- 嗜水气单胞菌LY-1株培养条件的优化研究
- 2009年
- 人工养殖中国林蛙是20世纪90年代后期新兴起的一种养殖模式,但疾病问题已成为制约林蛙规模化养殖的主要问题。分析发现,这主要是因为林蛙患嗜水气单胞菌感染引起的败血症(俗称“红腿病”或“出血病”)而造成大批死亡。该病传染性强,死亡率高。目前嗜水气单胞菌疫苗研究的热点主要集中在基因工程苗、亚单位疫苗、弱毒疫苗、灭活苗上。然而,上述各种疫苗的研制均需要嗜水气单胞菌的大规模培养。为大规模发酵嗜水气单胞菌,更好地收获所需抗原,作者对培养基成分进行优化并从生长因子、葡萄糖、不同接种量、pH值、微量元素等方面进行研究,为规模化制备成本低廉的疫苗提供理论依据。
- 周末李太元曹世诺陈雪李艳茹
- 关键词:嗜水气单胞菌感染嗜水气单胞菌疫苗中国林蛙基因工程苗亚单位疫苗
- 林蛙肠道中乳酸菌的分离及鉴定被引量:1
- 2009年
- 用2种方法从健康林蛙肠道菌群中分离乳酸菌,并进一步纯化及鉴定。试验结果表明,用乳酸菌半选择性培养基液体培养液先富集后分离得到了11株单一的乳酸杆菌,经过一系列生化鉴定,11株菌为同一种菌即嗜酸乳杆菌。该菌对嗜水气单胞菌具有抑制作用,抑菌圈直径为12 mm。在胆盐含量为0.3%,pH值为3时仍然生长,表明该菌株完全能适应动物胃肠道环境,作为微生态制剂用菌种具有较好的潜力。
- 王开艳朱明秋李艳茹张宗植周末白雪梅李太元
- 关键词:林蛙乳酸菌
- 林蛙红腿病的诊断及病原的鉴定被引量:2
- 2007年
- 针对龙井市林蛙养殖场中出现的后腿肌肉变成红色、肝肿大呈紫红色、肾脏充血呈鲜红色心肌缺血性坏死为主要症状的患病林蛙,进行了细菌分离培养、生化试验、毒力检测、人工感染、药物敏感度等试验研究,结果证明引起该病的病原菌为嗜水气单胞菌。药敏试验结果表明,该病原菌对链霉素,诺氟沙星、庆大霉素等高度敏感,而对红霉素、青霉素等不敏感。
- 周末李云华李太元
- 关键词:林蛙嗜水气单胞菌红腿病药敏试验