曹世诺
- 作品数：23 被引量：58H指数：6
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省教育厅资助项目吉林省科技厅资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 延边黄牛新孢子虫NcSAG1基因工程疫苗的免疫试验
- 为了解新孢子虫NcSAG1表面蛋白基因工程疫苗对实验动物的免疫效果,本试验提取延边黄牛新孢子虫野毒株基因组DNA,用PCR技术扩增新孢子虫NcSAG1表面蛋白基因,并在大肠杆菌中进行原核表达,将Western-blott...
- 贾立军栾杨焦石曹世诺张守发
- 文献传递
- 林蛙嗜水气单胞菌外膜蛋白基因的克隆、分析及蛋白结构预测被引量：6
- 2009年
- 根据GenBank上发表的嗜水气单胞菌外膜蛋白基因的核苷酸序列设计并合成1对特异性引物,采用PCR方法,扩增出与预期设计的740 bp大小相符的片段,将扩增产物连接到pMD18-T载体上,进行序列测定和分析。结果表明,所克隆的目的基因的核苷酸长为740 bp,共编码246个氨基酸。该基因片段与已发表的嗜水气单胞菌外膜蛋白基因核苷酸序列同源性为98.78%,氨基酸同源性为98.78%。利用生物信息学和分子生物学软件,对嗜水气单胞菌外膜蛋白的结构进行预测,结果表明其为外膜孔蛋白。本试验为嗜水气单胞菌外膜蛋白的表达及基因工程疫苗的研制奠定了基础。
- 周末曹世诺李艳茹李云华于海茹王开艳李太元
- 关键词：基因克隆蛋白结构预测
- 牛新孢子虫病LAMP检测方法的建立被引量：11
- 2009年
- 为建立一种快捷、灵敏的牛新孢子虫病检测方法,根据GenBank上登录的新孢子虫NcSAG1基因(AF132217)序列设计合成了2对环介导等温扩增(LAMP)特异引物,建立了检测牛新孢子虫病的LAMP技术,并优化了LAMP的各反应条件,进行了敏感性和特异性试验。结果显示,LAMP方法扩增牛新孢子虫的电泳产物呈特征性梯状条带,显色反应呈现绿色荧光,酶切鉴定出现目的条带,LAMP方法检测的敏感性为5×105copies/μL;特异性试验显示,新孢子虫检测管显色后呈阳性,而瑟氏泰勒虫、弓形虫和附红细胞体等对照组均呈阴性。表明,本研究建立的LAMP方法具有灵敏、特异、快速等优点,适合于牛新孢子虫病的检测。
- 金超贾立军曹世诺栾杨王娜李月梅张守发
- 关键词：犬新孢子虫环介导等温扩增
- 嗜水气单胞菌灭活苗对林蛙免疫效果的初步研究被引量：10
- 2009年
- 用分离于患红腿病的长白山中国林蛙的嗜水气单胞菌,采用热灭活的方法制成嗜水气单胞菌灭活苗,通过不同的途径免疫接种林蛙,通过测定受免林蛙血清中凝集抗体效价,探讨林蛙对热灭活的嗜水气单胞菌菌苗的免疫应答状况。结果表明,受免林蛙血清中凝集抗体效价可达到27,明显高于对照组。通过检测免疫林蛙的免疫保护率发现受免林蛙中口服免疫组、浸泡免疫组、腹腔注射组、肌肉注射组的免疫保护力可达71%、76%、59%、47%。
- 周末李艳茹曹世诺王开艳李太元
- 关键词：嗜水气单胞菌灭活苗免疫
- Asia-I口蹄疫病毒P1-2A基因真核表达质粒的构建及小鼠免疫试验被引量：1
- 2008年
- 目的:构建含有Asia-Ⅰ型口蹄疫病毒(FMDV)衣壳蛋白前体P1-2A基因的真核表达质粒pVAXⅠ-P1-2A,并用pVAXⅠ-P1-2A免疫小鼠,评价其体液免疫和细胞免疫水平。方法:通过RT-PCR方法扩增得到含有FMDVP1-2A编码区的目的基因,并将其克隆到pMD18-T载体上。将pMD18-T-P1-2A和pVAXⅠ分别经EcoRⅤ和XbaⅠ双酶切后连接构建真核表达质粒pVAXⅠ-P1-2A。将酶切鉴定正确后的重组质粒转染HeLa细胞进行IFA检测。再进行小鼠血清特异性抗体试验、小鼠T淋巴细胞增殖试验和IFN-γ ELISPOT试验。结果:酶切结果与预期目的条带大小相符;荧光结果表明经pVAXⅠ-P1-2A转染的细胞有明显的黄绿色荧光,说明P1-2A基因在HeLa细胞中得到了表达;小鼠免疫结果表明,免疫的小鼠都产生了较强的体液免疫和细胞免疫,并且T淋巴细胞增殖数和产生IFN-γ的细胞数和对照组相比显著提高(P<0.05)。间接ELISA试验表明,在免疫第14天抗体水平比对照组明显增高(P<0.05)。结论:成功构建了真核表达质粒pVAXⅠ-P1-2A,并通过小鼠免疫试验发现重组质粒试验组能够诱导产生特异性的体液免疫和细胞免疫应答。
- 牟伟锋金宁一鲁承霍晓伟胡博屈勇刚常巧呈于长勇颜雯丛艳昭曹世诺
- 关键词：FMDV
- 中药复方连黄对小鼠T淋巴细胞亚群CD4^+、CD8^+的影响被引量：6
- 2009年
- 目的探讨中药复方连黄对小鼠T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+的影响。方法T淋巴细胞亚群测定采用单克隆抗体直接免疫荧光技术,通过流式细胞仪测定。结果经统计学分析,与对照组比较,中药复方连黄能不同程度地使CD4+、CD4+/CD8+升高,而使CD8+下降。结果表明,中药复方连黄对细胞免疫功能具有调节作用。
- 刘廷鞠玉琳李杨曹世诺赵敏
- 关键词：小鼠T淋巴细胞亚群CD4^+CD8^+
- 牛瑟氏泰勒虫吉林株18S rRNA基因的扩增及系统发育研究
- 2008年
- 本研究根据GenBank上发表的牛瑟氏泰勒虫18S rRNA基因的核苷酸序列设计并合成1对特异性引物,对寄生于牛体内的瑟氏泰勒虫基因组DNA进行扩增,得到1 356 bp的18S rRNA基因片段,测序后blast分析表明该虫种属牛瑟氏泰勒虫。将该基因片段序列与GenBank中8种已知泰勒虫的相应序列进行比较分析,建立系统发育树。结果表明,牛瑟氏泰勒虫吉林分离株与水牛泰勒虫亲缘关系最近,与小泰勒虫亲缘关系较远。这一结果说明宿主因素对泰勒虫的基因型影响较大。
- 曹世诺牟伟峰于龙政薛书江贾立军张守发
- 关键词：牛瑟氏泰勒虫PCRRRNA系统发育树
- 牛新孢子虫LAMP检测方法的建立
- 为建立一种快捷、灵敏的牛新孢子虫检测方法,本研究根据GenBank上发表的新孢子虫NcSAG1基因(AF132217)序列设计合成两对LAMP特异引物,建立了检测牛新孢子虫环介导等温扩增(LAMP)技术,并优化了LAMP...
- 金超贾立军曹世诺张守发
- 文献传递
- 牛瑟氏泰勒虫环介导等温扩增检测的相关研究方法的建立
- 牛瑟氏泰勒虫病是由泰勒科、泰勒属的瑟氏泰勒虫(T.sergenti)寄生于牛红细胞和淋巴细胞引起的以高热、贫血、出血、消瘦和体表淋巴结肿大为主要临床症状的一种血液原虫病,该病已给畜牧业带来了巨大的经济损失。为建立一种快捷...
- 王中光张守发曹世诺贾立军薛书江田万年王暖成
- 关键词：牛瑟氏泰勒虫环介导等温扩增
- 文献传递
- 牛瑟氏泰勒虫P23和P33表面蛋白双基因融合表达载体的构建及原核表达被引量：5
- 2008年
- 为探索牛瑟氏泰勒虫的表面蛋白基因融合产物作为双价疫苗的可行性,以牛瑟氏泰勒虫基因组DNA为模板,通过重叠延伸拼接聚合酶链式反应(SOE-PCR)把P23和P33表面蛋白基因连接一起,2个基因之间插入一个linker(Gly4Ser)3,经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切,获得1151bp的双基因融合片段,克隆于表达质粒pGEX-4T-1中,构建了双基因重组表达载体pGEX-4T-P23-P33,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导,表达出预期大小70.0ku的融合蛋白。Western blot检测结果显示,该蛋白与牛瑟氏泰勒虫抗血清呈阳性反应,表明融合蛋白具有反应原性,为进一步研究此融合蛋白作为疫苗候选成分提供了理论依据。
- 曹世诺于龙政薛书江贾立军周末张守发
- 关键词：牛瑟氏泰勒虫融合基因表达
