张守发
- 作品数：380 被引量：838H指数：16
- 供职机构：延边大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项吉林省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 犬新孢子虫NcAMA1基因重组腺病毒穿梭质粒的构建及其真核表达被引量：2
- 2014年
- 为构建犬新孢子虫NcAMA1基因重组腺病毒穿梭质粒,并在真核细胞中表达,以重组质粒pVAX1-NcAMA1为模板,PCR扩增了NcAMA1基因,以此构建了pMD18T-NcAMA1重组克隆质粒;对该重组克隆质粒进行双酶切鉴定后,将其亚克隆至腺病毒穿梭载体pCR259中。应用脂质体介导转染法将经PCR鉴定和酶切鉴定正确的pCR259-NcAMA1重组穿梭质粒转染293细胞,应用IFAT和Western-blot技术检测了AMA1基因在293细胞中的表达情况。结果显示,扩增的NcAMA1基因长度为1 695bp,构建的重组腺病毒穿梭质粒pCR259-NcAMA1能在293细胞中获得瞬时表达,表达蛋白的分子质量约为68ku。
- 郭焕平贾立军于龙政薛书江高洋李男礼张守发
- 关键词：犬新孢子虫
- 猪附红细胞体PCR-ELISA检测方法的建立被引量：7
- 2013年
- 根据猪附红细胞体OxaA膜蛋白基因设计了1对分别标记生物素和地高辛的引物,将PCR扩增产物固定至链霉亲和素包被的酶标板中进行酶联显色检测,并优化PCR扩增及ELISA检测步骤,建立了猪附红细胞体PCR-ELISA。结果显示,该方法较传统的PCR-ELISA节约近2h,最低能检出0.36pg的猪附红细胞体DNA,敏感性比常规PCR高10倍,且与猪链球菌、猪肺炎霉形体、大肠杆菌等无交叉反应。用该方法对64份猪血液中提取的DNA样品进行检测,结果阳性检出率为35.9%,明显高于常规PCR的28.1%。结果表明,建立的猪附红细胞体PCR-ELISA具有敏感、特异、安全和快速的特点。
- 夏晓辉丁晓双张晓轩海旭南贾立军张守发许应天
- 关键词：猪附红细胞体PCR-ELISA
- 猪附红细胞体吉林株免疫蛋白组学研究
- 目的:为了筛选和鉴定猪附红细胞体吉林株免疫原性蛋白。方法:采用二维电泳分析猪附红细胞体蛋白质表达谱,应用感染血清和3F7株单抗与猪附红细胞体2-DE凝胶进行免疫印迹,并对筛选出的猪附红细胞体免疫原性蛋白进行质谱鉴定。结果...
- 薛书江张守发许应天于龙政李积旭贾立军
- 关键词：猪附红细胞体二维电泳质谱鉴定
- 文献传递
- 新孢子虫NcGRA2基因真核表达质粒的构建及其在293细胞内的表达
- 2015年
- [目的]为了构建新孢子虫Nc GRA2基因的真核表达载体,探讨重组载体在体外细胞的表达。[方法]从含有Nc GRA2基因的重组质粒p GEX-4T1-Nc GRA2中,用限制性内切酶进行酶切获得带有粘性末端的Nc GRA2基因片段。经琼脂糖凝胶电泳切胶回收Nc GRA2基因片段,与pc DNA3.1载体连接。将构建的真核表达质粒pc DNA3.1-Nc GRA2转染到293细胞中表达。[结果]经酶切分析和序列测定,证实了重组质粒的正确连接。经免疫荧光抗体试验验证pc DNA3.1-Nc GRA2能在293细胞中表达Nc GRA2蛋白。[结论]获得重组质粒pc DNA3.1-Nc GRA2,并能在体外细胞中表达Nc GRA2蛋白,为进一步研究核酸疫苗的动物免疫试验奠定了基础。
- 金春梅朱慧敏于龙政张守发
- 关键词：新孢子虫NC真核表达
- 牛新孢子虫抗体Dot-ELISA检测方法的建立
- 贾立军张守发
- 吉林株犬新孢子虫SAG1基因真核表达载体的构建
- 栾杨王娜贾立军张守发
- 吉林省白山地区牛新孢子虫病流行病学调查被引量：5
- 2015年
- 为了解吉林省白山地区牛新孢子虫病的流行情况,本研究应用间接ELISA方法对采自吉林省白山地区5个县区193份牛血清样品进行了检测,并对不同地区、不同养殖方式、不同品种及不同年龄段牛新孢子虫病感染情况进行了比较分析。结果显示,检测样本的总体阳性率为35.8%(69/193);经统计学分析,不同地区、不同养殖方式及不同年龄段牛新孢子虫感染率差异显著(P<0.05);而不同品种牛新孢子虫感染率差异不显著(P>0.05)。调查表明,吉林省白山地区是牛新孢子虫病的流行区域,此次调查为该地区牛新孢子虫病的防控提供了科学的理论依据。
- 李男礼张守发李积旭张蕾贾立军
- 关键词：新孢子虫病流行病学
- 间接荧光抗体试验诊断犬吉氏巴贝斯虫病被引量：5
- 2002年
- 利用冷藏抗原玻片 ,用间接荧光抗体试验检测感染吉氏巴贝斯虫犬血清 ,具有特异性强、敏感性高、快速、准确、操作简单等特点。对疫区 82份犬血清的检查 ,阳性率为 37 8% ;对非疫区 50份犬血清的检查 ,假阳性率为 2 %。与血液涂片染色检查比较 ,该法检出率高 ,结果可靠 。
- 董君艳张守发王力光
- 关键词：吉氏巴贝斯虫荧光抗体间接荧光抗体试验
- 熊消化道寄生虫调查及驱虫试验
- 1989年
- 1988年10～11月,对延边几个人工养熊场进行了消化道寄生虫调查及驱虫试验。共查出4种虫体,分属2门、2纲、3科、4属,并以盐酸左旋咪唑按5～6mg/kg 进行驱虫,收到了较好的效果。
- 姜昌武李松雄车大山金仁淑张守发
- 关键词：驱虫药盐酸左旋咪唑猪蛔虫球虫卵囊
- 附红细胞体病研究进展
- 附红细胞体病（Eperythroz0Onosis）是由附红细胞体（Eperythrozoon）寄生于红细胞表面、血浆及骨髓内的一种以红细胞压积降低、血红蛋白浓度下降、白细胞增多、贫血、黄疸、发热等为主要临床特征的人兽共患...
- 贾立军张守发
- 关键词：附红细胞体病病原学
- 文献传递
