张守发
- 作品数：355 被引量：844H指数：16
- 供职机构：延边大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项吉林省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 犬新孢子虫NcAMA1基因重组腺病毒穿梭质粒的构建及其真核表达被引量：2
- 2014年
- 为构建犬新孢子虫NcAMA1基因重组腺病毒穿梭质粒,并在真核细胞中表达,以重组质粒pVAX1-NcAMA1为模板,PCR扩增了NcAMA1基因,以此构建了pMD18T-NcAMA1重组克隆质粒;对该重组克隆质粒进行双酶切鉴定后,将其亚克隆至腺病毒穿梭载体pCR259中。应用脂质体介导转染法将经PCR鉴定和酶切鉴定正确的pCR259-NcAMA1重组穿梭质粒转染293细胞,应用IFAT和Western-blot技术检测了AMA1基因在293细胞中的表达情况。结果显示,扩增的NcAMA1基因长度为1 695bp,构建的重组腺病毒穿梭质粒pCR259-NcAMA1能在293细胞中获得瞬时表达,表达蛋白的分子质量约为68ku。
- 郭焕平贾立军于龙政薛书江高洋李男礼张守发
- 关键词：犬新孢子虫
- 猪附红细胞体PCR-ELISA检测方法的建立被引量：7
- 2013年
- 根据猪附红细胞体OxaA膜蛋白基因设计了1对分别标记生物素和地高辛的引物,将PCR扩增产物固定至链霉亲和素包被的酶标板中进行酶联显色检测,并优化PCR扩增及ELISA检测步骤,建立了猪附红细胞体PCR-ELISA。结果显示,该方法较传统的PCR-ELISA节约近2h,最低能检出0.36pg的猪附红细胞体DNA,敏感性比常规PCR高10倍,且与猪链球菌、猪肺炎霉形体、大肠杆菌等无交叉反应。用该方法对64份猪血液中提取的DNA样品进行检测,结果阳性检出率为35.9%,明显高于常规PCR的28.1%。结果表明,建立的猪附红细胞体PCR-ELISA具有敏感、特异、安全和快速的特点。
- 夏晓辉丁晓双张晓轩海旭南贾立军张守发许应天
- 关键词：猪附红细胞体PCR-ELISA
- 猪附红细胞体吉林株免疫蛋白组学研究
- 目的:为了筛选和鉴定猪附红细胞体吉林株免疫原性蛋白。方法:采用二维电泳分析猪附红细胞体蛋白质表达谱,应用感染血清和3F7株单抗与猪附红细胞体2-DE凝胶进行免疫印迹,并对筛选出的猪附红细胞体免疫原性蛋白进行质谱鉴定。结果...
- 薛书江张守发许应天于龙政李积旭贾立军
- 关键词：猪附红细胞体二维电泳质谱鉴定
- 文献传递
- 新孢子虫NcGRA2基因真核表达质粒的构建及其在293细胞内的表达
- 2015年
- [目的]为了构建新孢子虫Nc GRA2基因的真核表达载体,探讨重组载体在体外细胞的表达。[方法]从含有Nc GRA2基因的重组质粒p GEX-4T1-Nc GRA2中,用限制性内切酶进行酶切获得带有粘性末端的Nc GRA2基因片段。经琼脂糖凝胶电泳切胶回收Nc GRA2基因片段,与pc DNA3.1载体连接。将构建的真核表达质粒pc DNA3.1-Nc GRA2转染到293细胞中表达。[结果]经酶切分析和序列测定,证实了重组质粒的正确连接。经免疫荧光抗体试验验证pc DNA3.1-Nc GRA2能在293细胞中表达Nc GRA2蛋白。[结论]获得重组质粒pc DNA3.1-Nc GRA2,并能在体外细胞中表达Nc GRA2蛋白,为进一步研究核酸疫苗的动物免疫试验奠定了基础。
- 金春梅朱慧敏于龙政张守发
- 关键词：新孢子虫NC真核表达
- 吉林省白山地区牛新孢子虫病流行病学调查被引量：5
- 2015年
- 为了解吉林省白山地区牛新孢子虫病的流行情况,本研究应用间接ELISA方法对采自吉林省白山地区5个县区193份牛血清样品进行了检测,并对不同地区、不同养殖方式、不同品种及不同年龄段牛新孢子虫病感染情况进行了比较分析。结果显示,检测样本的总体阳性率为35.8%(69/193);经统计学分析,不同地区、不同养殖方式及不同年龄段牛新孢子虫感染率差异显著(P<0.05);而不同品种牛新孢子虫感染率差异不显著(P>0.05)。调查表明,吉林省白山地区是牛新孢子虫病的流行区域,此次调查为该地区牛新孢子虫病的防控提供了科学的理论依据。
- 李男礼张守发李积旭张蕾贾立军
- 关键词：新孢子虫病流行病学
- 间接荧光抗体试验诊断犬吉氏巴贝斯虫病被引量：5
- 2002年
- 利用冷藏抗原玻片 ,用间接荧光抗体试验检测感染吉氏巴贝斯虫犬血清 ,具有特异性强、敏感性高、快速、准确、操作简单等特点。对疫区 82份犬血清的检查 ,阳性率为 37 8% ;对非疫区 50份犬血清的检查 ,假阳性率为 2 %。与血液涂片染色检查比较 ,该法检出率高 ,结果可靠 。
- 董君艳张守发王力光
- 关键词：吉氏巴贝斯虫荧光抗体间接荧光抗体试验
- 熊消化道寄生虫调查及驱虫试验
- 1989年
- 1988年10～11月,对延边几个人工养熊场进行了消化道寄生虫调查及驱虫试验。共查出4种虫体,分属2门、2纲、3科、4属,并以盐酸左旋咪唑按5～6mg/kg 进行驱虫,收到了较好的效果。
- 姜昌武李松雄车大山金仁淑张守发
- 关键词：驱虫药盐酸左旋咪唑猪蛔虫球虫卵囊
- 附红细胞体病研究进展
- 附红细胞体病（Eperythroz0Onosis）是由附红细胞体（Eperythrozoon）寄生于红细胞表面、血浆及骨髓内的一种以红细胞压积降低、血红蛋白浓度下降、白细胞增多、贫血、黄疸、发热等为主要临床特征的人兽共患...
- 贾立军张守发
- 关键词：附红细胞体病病原学
- 文献传递
- 延边地区兔隐孢子虫感染情况调查被引量：9
- 2005年
- 李海峰张守发许应天梁晚枫袁家欣
- 关键词：隐孢子虫病养兔业腹泻性疾病动物感染人兽共患
- PCR方法早期胚胎性别鉴定技术的研究进展与应用展望被引量：6
- 2004年
- 对早期胚胎性别鉴定 PCR方法的原理和特点以及几个关键环节的国内外研究进展进行综述 ,并针对我国早期胚胎性别鉴定技术在养牛业生产中应用现状和存在的问题进行分析与讨论 ,指出 PCR性别鉴定的发展趋势及在我国养牛业中广阔的商业应用前景。
- 王丹王志刚刘云海金成汉张守发
- 关键词：胚胎性别鉴定胚胎移植
