许应天
- 作品数：124 被引量：328H指数：9
- 供职机构：延边大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技厅青年科研基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 牛瑟氏泰勒虫18S rRNA基因的克隆及分子分类学研究
- 为分析牛瑟氏泰勒虫延边株18S rRNA基因序列,根据GenBank上已发表的牛瑟氏泰勒虫18SrRNA基因序列设计两对特异性引物,通过PCR扩增目的基因片段,将扩增产物连接到pMD18-T载体中,经酶切鉴定和PCR鉴定...
- 沈岩许应天李静栾杨杨兴
- 关键词：牛瑟氏泰勒虫克隆
- 文献传递
- 猪附红细胞体双抗体夹心ELISA检测方法的建立和应用被引量：4
- 2021年
- 为建立猪附红细胞体双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测方法,本研究以抗猪附红细胞体单克隆抗体为捕获抗体,兔抗猪附红细胞体多克隆抗体为检测抗体,优化工作条件,建立猪附红细胞体DAS-ELISA检测方法。结果显示:该方法的最佳工作条件为:捕获抗体包被浓度为5.42 g/mL,检测抗体浓度为6.84 g/mL,酶标二抗的稀释倍数为1∶2000;判定标准为:当检测样品OD492>0.290为阳性;该方法与弓形虫、猪链球菌、猪肺炎支原体和猪繁殖与呼吸综合症病毒等常见猪病原微生物均无交叉反应,特异性好,敏感度可达3.25 mg/L,其重复性变异系数均小于10%;平行检测68份猪临床样品,DAS-ELISA检测的阳性率为29.4%,比血涂片染色镜检阳性率(19.1%)高10.3%。本研究所建立的猪附红细胞体DAS-ELISA检测方法可以作为猪附红细胞体的快速检测方法。
- 李月梅金雪梅张守发张守发许应天相思宇薛书江薛书江
- 关键词：猪附红细胞体双抗体夹心ELISA
- 东方泰勒虫PCR-ELISA检测方法的建立
- 2018年
- 为建立东方泰勒虫PCR-ELISA检测方法,根据GenBank中报道的东方泰勒虫p33基因设计1对分别标记生物素(Biot)和地高辛(Dig)的引物,并优化PCR扩增和ELISA检测步骤,建立了东方泰勒虫PCRELISA。结果表明:该方法能检出的东方泰勒虫基因组DNA为18pg/μL,敏感性比常规PCR高10倍;且与环形泰勒虫、新孢子虫和弓形虫等的基因组DNA无交叉反应。对112份待检样本检测的结果,阳性检出率为34.8%(39/112),高于常规PCR的28.6%(32/112)。因此,所建立的东方泰勒虫PCR-ELISA具有敏感、特异、安全和快速的优点,适用于东方泰勒虫病的分子流行病学调查和口岸检疫等批量样本的检测。
- 孙静于龙政薛书江李海峰许应天
- 关键词：PCR-ELISA
- 吉林省延边地区自然生境内蜱种类的调查被引量：6
- 2015年
- 目的 调查吉林省延边地区自然生境内蜱的种类和分布。 方法2014年5—7月在延边地区龙井市、珲春市、延吉市3个市的6个调查位点用布旗法采集游离蜱类样本，显微镜下依据经典蜱类形态学种属鉴定蜱的种类。 结果 共采集的蜱280只，隶属2属2种，其中长角血蜱占94．64％（265／280）、全沟硬蜱占5．36％（15／280）。龙井市采集的86只蜱中，长角血蜱和全沟硬蜱的比例分别为83．72％（72／86）和16．28％（14／86） 珲春市采集的187只蜱中，长角血蜱和全沟硬蜱的比例分别为99．47％（1．86／187）和0．53％（1／187） 延吉市采集的7只蜱全部是长角血蜱。 结论延边地区自然生境内主要以长角血蜱和全沟硬蜱为主，长角血蜱是优势蜱。
- 于龙政海旭南许应天崔明勋梁晚枫金春梅张守发
- 关键词：长角血蜱全沟硬蜱
- 牛瑟氏泰勒虫双拷贝p33表面蛋白基因在原核细胞中的串联表达被引量：4
- 2010年
- 为串联融合表达牛瑟氏泰勒虫(Theileria sergenti)p33表面蛋白,本研究根据GenBank中登录的T.sergenti p33基因序列(D87198),在去掉信号肽的部分设计两对引物。PCR扩增出两段相同的p33基因(p331、p332),大小均为684bp,并将两个基因片段按顺序依次插入原核表达载体pGEX-4T-1中构建pGEX-p331-p332(2p33)。将pGEX-2p33重组质粒转化E.coli BL21中进行诱导表达。经SDS-PAGE电泳显示,该融合蛋白获得了高效表达,分子量约为80ku,表达产物以包涵体的形式存在。Western blot试验表明,融合蛋白可被T.sergenti阳性血清识别,具有较好的反应原性。该蛋白的串联融合表达为T.sergenti新型疫苗的研究奠定了基础。
- 杨兴许应天张守发沈岩白雪梅
- 关键词：牛瑟氏泰勒虫
- 黄牛感染5号病二例被引量：1
- 1996年
- 黄牛感染５号病二例许应天，金成汉，朴顺今，玄成一（延边农学院）（龙井市光新乡兽医站）在门诊工作中遇到临床上罕见的牛人为的感染的病例，将其情况介绍如下。１发病情况：吉林省龙井市某村李某饲养２只长白猪（体重约为９０ｋｇ）和２头母牛（５岁，３岁），均未进行...
- 许应天金成汉朴顺今玄成一
- 关键词：牛病黄牛
- 猪附红细胞体PCR-ELISA检测方法的建立被引量：7
- 2013年
- 根据猪附红细胞体OxaA膜蛋白基因设计了1对分别标记生物素和地高辛的引物,将PCR扩增产物固定至链霉亲和素包被的酶标板中进行酶联显色检测,并优化PCR扩增及ELISA检测步骤,建立了猪附红细胞体PCR-ELISA。结果显示,该方法较传统的PCR-ELISA节约近2h,最低能检出0.36pg的猪附红细胞体DNA,敏感性比常规PCR高10倍,且与猪链球菌、猪肺炎霉形体、大肠杆菌等无交叉反应。用该方法对64份猪血液中提取的DNA样品进行检测,结果阳性检出率为35.9%,明显高于常规PCR的28.1%。结果表明,建立的猪附红细胞体PCR-ELISA具有敏感、特异、安全和快速的特点。
- 夏晓辉丁晓双张晓轩海旭南贾立军张守发许应天
- 关键词：猪附红细胞体PCR-ELISA
- 猪附红细胞体吉林株免疫蛋白组学研究
- 目的:为了筛选和鉴定猪附红细胞体吉林株免疫原性蛋白。方法:采用二维电泳分析猪附红细胞体蛋白质表达谱,应用感染血清和3F7株单抗与猪附红细胞体2-DE凝胶进行免疫印迹,并对筛选出的猪附红细胞体免疫原性蛋白进行质谱鉴定。结果...
- 薛书江张守发许应天于龙政李积旭贾立军
- 关键词：猪附红细胞体二维电泳质谱鉴定
- 文献传递
- 瑟氏泰勒虫血液直接PCR检测方法的应用被引量：1
- 2019年
- 为建立快速、灵敏、特异、低成本的瑟氏泰勒虫检测方法,根据GenBank上发表的瑟氏泰勒虫p33基因序列设计合成1对引物,通过PCR退火温度的筛选、特异性试验、敏感性试验和重复性试验,建立瑟氏泰勒虫血液直接PCR检测方法。该方法能扩增瑟氏泰勒虫p33基因的1段416 bp序列,而与弓形虫、新孢子虫、牛附红细胞体基因序列均无交叉反应。该方法检测出的1μL血液最大稀释倍数为40。应用血液直接PCR方法和常规PCR对吉林省8个地区某牛场采取的210份样本进行检测的结果表明:直接PCR阳性率为30.0%,而常规PCR阳性率为25.7%,差异不显著(P>0.05);两者的总符合率为94%,阳性符合率为80%,阴性符合率为92%;2种方法之间的Kappa值为0.85,说明该法更具有推广和应用价值。该试验成功应用了血液直接PCR检测方法,为瑟氏泰勒虫病的快速诊断和流行病学调查提供了一种新的方法。
- 赵云于龙政闫可心薛书江许应天
- 关键词：瑟氏泰勒虫
- 海狸鼠难产一例
- 1993年
- 近几年来我地区的海狸鼠业较为兴旺。虽然海狸鼠的抗病力较强,但很难避免发生这样那样的疾病。1991年12月30日我们收治一只难产海狸鼠,简介如下。1.
- 许应天金昌深尹熙俊李鹿洙
- 关键词：海狸鼠难产
