王开艳
- 作品数：7 被引量：28H指数：3
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- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 林蛙嗜水气单胞菌外膜蛋白基因的克隆、分析及蛋白结构预测被引量：6
- 2009年
- 根据GenBank上发表的嗜水气单胞菌外膜蛋白基因的核苷酸序列设计并合成1对特异性引物,采用PCR方法,扩增出与预期设计的740 bp大小相符的片段,将扩增产物连接到pMD18-T载体上,进行序列测定和分析。结果表明,所克隆的目的基因的核苷酸长为740 bp,共编码246个氨基酸。该基因片段与已发表的嗜水气单胞菌外膜蛋白基因核苷酸序列同源性为98.78%,氨基酸同源性为98.78%。利用生物信息学和分子生物学软件,对嗜水气单胞菌外膜蛋白的结构进行预测,结果表明其为外膜孔蛋白。本试验为嗜水气单胞菌外膜蛋白的表达及基因工程疫苗的研制奠定了基础。
- 周末曹世诺李艳茹李云华于海茹王开艳李太元
- 关键词：基因克隆蛋白结构预测
- H1N1亚型流感病毒血凝素Th和B细胞表位预测及抗原性分析被引量：7
- 2010年
- 目的:应用生物信息学方法预测H1N1亚型流感病毒血凝素Th和B细胞相关抗原表位,并初步分析其抗原性,为研制H1N1亚型流感病毒的表位疫苗奠定基础。方法:依据近年流感病毒流行趋势,从GenBank下载具有代表性的H1N1亚型流感病毒HA蛋白氨基酸序列。进行生物信息学综合分析预测,获得Th和B细胞相关抗原表位,并比较其保守性和特异性。通过Balb/c小鼠H1N1亚型流感病毒阳性血清与表位肽的结合试验,初步鉴定候选表位抗原性。结果:综合多项预测及空间构像模拟结果,我们获得了三条候选Th和B细胞表位,分别为HA73～87、HA125～139、HA188～205。候选表位处于H1N1亚型流感HA1蛋白序列上相对保守的区域内,且与目前流行的H1N1亚型流感病毒HA相应区域具有较好的一致性。而不同候选表位在BALB/c小鼠H1N1亚型流感病毒阳性血清反应中显示了不同抗体结合能力,预示了其成为功能表位的可能。结论:所筛选的表位具有成为H1N1亚型流感病毒HATh和B细胞相关抗原表位的可能。此研究为深入揭示流感病毒感染与免疫机制,H1N1亚型流感功能表位认知及表位疫苗研究奠定了基础。
- 王开艳李太元鲁会军谭磊南文龙田明尧张金双刘昊金宁一
- 关键词：流感血凝素H1N1
- 林蛙肠道中乳酸菌的分离及鉴定被引量：1
- 2009年
- 用2种方法从健康林蛙肠道菌群中分离乳酸菌,并进一步纯化及鉴定。试验结果表明,用乳酸菌半选择性培养基液体培养液先富集后分离得到了11株单一的乳酸杆菌,经过一系列生化鉴定,11株菌为同一种菌即嗜酸乳杆菌。该菌对嗜水气单胞菌具有抑制作用,抑菌圈直径为12 mm。在胆盐含量为0.3%,pH值为3时仍然生长,表明该菌株完全能适应动物胃肠道环境,作为微生态制剂用菌种具有较好的潜力。
- 王开艳朱明秋李艳茹张宗植周末白雪梅李太元
- 关键词：林蛙乳酸菌
- H3/H1亚型流感核酸疫苗的构建及小鼠免疫试验
- 流行性感冒是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病，对人群健康，社会稳定均产生重大影响。降低流感流行的最有效手段仍是接种流感疫苗，然而，由于流感病毒血清亚型众多，变异性强，因此设计开发安全的且可提供长久保护的，对多亚型流感共保...
- 王开艳
- 关键词：DNA疫苗免疫试验
- 文献传递
- 乙型脑炎病毒E蛋白基因的原核表达及ELISA抗体检测方法的建立被引量：3
- 2010年
- 通过PCR方法扩增流行性乙型脑炎病毒(JEV)E基因,全长1 500 bp,将其连入经双酶切的pET-28a(+)载体,构建了重组原核表达质粒pET28a-E。将pET28a-E转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导,进行SDS-PAGE分析。结果显示,E基因在大肠杆菌BL21中获得高效表达,表达的蛋白分子质量约53 ku。Western-blot分析表明,该表达产物具有良好的抗原性。在此基础上,利用该蛋白初步建立了检测猪JEV抗体的间接ELISA方法,并用武汉科前生物制品公司生产的猪JEV ELISA抗体检测试剂盒同时对250份临床采集的猪血清样品进行了检测,结果这两种方法的符合率达到92%,表明建立的ELISA方法具有较高的灵敏性和特异性。
- 刘昊尹革芬鲁会军张丹谭磊王开艳关莎莎段博芳金宁一段纲
- 关键词：乙型脑炎病毒E基因抗原性
- 季节性和大流行性H1N1流感血凝素DNA疫苗电穿孔免疫小鼠及攻毒保护实验
- 2011年
- 在流感病毒疫苗中,DNA疫苗有望成为常规疫苗的替代品.研究构建了两个分别编码A/New Caledonia/20/99(H1N1)和A/California/04/2009(H1N1)流感病毒株血凝素抗原的DNA疫苗pV1A5和pVEH1,目的抗原经验证能够正确表达后,利用小鼠模型通过电穿孔方法肌肉注射免疫进行疫苗免疫效力评价.采用血凝抑制实验和酶联免疫吸附实验对免疫小鼠的血清进行血凝素特异性抗体检测,对血凝素特异性的T淋巴细胞经IFN-γ酶联免疫斑点实验进行检测.然后选择小鼠适应株A/NewCaledonia/20/99(H1N1)100个半数致死剂量对候选疫苗免疫的小鼠攻毒并监测生存率和体重变化率,以此评价疫苗保护效力.两疫苗组免疫小鼠T淋巴细胞和体液免疫水平显著高于pVAX1空载体对照组(P<0.05).此外,pV1A5组能够100%保护免疫小鼠抵抗100致死剂量同源病毒小鼠适应株的攻毒,而同种病毒下pVEH1组只有40%的保护率.结果表明,本实验构建的季节性流感DNA疫苗能够对同源病毒攻毒提供完全保护,而大流行流感株DNA疫苗只能部分抵抗季节性流感病毒.
- 谭磊鲁会军张丹王开艳田明尧刘存霞刘燕瑜胡博金宁一
- 关键词：血凝素DNA疫苗电穿孔H1N1流感病毒
- 嗜水气单胞菌灭活苗对林蛙免疫效果的初步研究被引量：10
- 2009年
- 用分离于患红腿病的长白山中国林蛙的嗜水气单胞菌,采用热灭活的方法制成嗜水气单胞菌灭活苗,通过不同的途径免疫接种林蛙,通过测定受免林蛙血清中凝集抗体效价,探讨林蛙对热灭活的嗜水气单胞菌菌苗的免疫应答状况。结果表明,受免林蛙血清中凝集抗体效价可达到27,明显高于对照组。通过检测免疫林蛙的免疫保护率发现受免林蛙中口服免疫组、浸泡免疫组、腹腔注射组、肌肉注射组的免疫保护力可达71%、76%、59%、47%。
- 周末李艳茹曹世诺王开艳李太元
- 关键词：嗜水气单胞菌灭活苗免疫
