余抒
- 作品数：33 被引量：44H指数：4
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- 肠出血性大肠埃希菌O157∶H7黏附HeLa细胞模型的建立被引量：4
- 2007年
- 目的建立肠出血性大肠埃希菌O157∶H7体外黏附HeLa细胞模型,为进一步研究其致病机制奠定基础。方法以细菌黏附HeLa细胞数量为指标,分别评价细菌数量、细菌与细胞孵育时间对细菌黏附数量的影响,得到最佳条件,最后肌动蛋白荧光染色(FAS)试验鉴定模型。结果加入细菌为1×105CFU,细菌与细胞孵育4h时,黏附细胞的数量最佳,FAS检测发现该条件下细菌能够引起细胞特异性黏附、擦拭(attaching&effacing,A/E)损伤,模型建立成功。结论成功建立O157∶H7体外黏附HeLa细胞模型,为进一步研究其致病机制提供了条件。
- 余抒顾江曾浩杨琴刘艳青张卫军罗萍王庆旭毛旭虎
- 关键词：肠出血性大肠埃希菌O157:H7细胞模型HELA细胞
- 基于新月柄杆菌RsaA外运机制的EspA及EspA-IL-24融合蛋白胞外分泌表达研究
- 2008年
- 目的:实现大肠杆菌分泌蛋白(Esp)A及EspA与白细胞介素(IL)-24融合蛋白的胞外分泌表达,进一步验证基于新月柄杆菌RsaA外运机制的原核胞外分泌表达载体系统的有效性和通用性,并改造优化该系统。方法:利用分子克隆手段,按RsaA分泌系统操纵子组织方式,将获得的RsaA系统元件编码序列和异源调控序列克隆至pQE30骨架质粒,构建新的胞外分泌表达质粒pQABP2S;以大肠杆菌为宿主菌诱导表达EspA及EspA-IL-24融合蛋白,并通过Westernblot检测目标蛋白在培养上清中的表达。结果:获得了新的胞外分泌表达载体pQABP2S;与对照相比,该载体宿主系统培养上清中目标蛋白EspA及EspA-IL-24的表达量明显增加。结论:在大肠杆菌中通过RsaA分泌系统可实现分子大小不同的EspA及EspA-IL-24融合蛋白的特异性分泌表达,进一步证实该分泌表达策略的有效性和通用性;调整调控序列以优化分泌系统的尝试,为此类基因工程技术平台的开发提供了借鉴。
- 宁亚蕾周立雄毛旭虎张卫军程琰余抒邹全明
- 关键词：白细胞介素-24分泌表达大肠杆菌
- 筛选与鉴定幽门螺杆菌抗原表位肽的方法
- 本发明提供了一种筛选与鉴定幽门螺杆菌抗原HLA限制性免疫显性表位肽的方法。所述方法包括体外放大培养Hp抗原特异性T细胞的方法、抗原特异性T细胞体外应答的检测方法、利用抗原特异性T细胞结合抗原步移合成重叠肽来筛选免疫显性表...
- 吴超邹全明陈立罗萍石云赵卓余抒
- 文献传递
- 致病性大肠杆菌引发宿主细胞A／E损伤分析方法的建立被引量：2
- 2009年
- 目的建立一种能够对由致病性大肠杆菌引发的宿主细胞黏附及擦拭性损伤(A/E损伤)进行半定量分析的方法,为进一步研究其致病性提供评价手段。方法以大肠杆菌黏附HeLa细胞作为感染模型。采用姬姆萨染色和荧光肌动蛋白染色实验,通过菌落计数及肌动蛋白聚集数量定量分析,统计学处理,比较EPEC 43095、EHEC O157∶H7 Sakai株和弱毒株EHEC O157∶H7 00B015以及E.coliDH5α对HeLa细胞的黏附能力,评价它们对细胞的损伤程度。结果EPEC对细胞的黏附及擦拭性损伤程度大于EHEC(P<0.05)。EHEC Sakai和00B015在黏附能力上差异不大(P>0.05),但是,Sakai在肌动蛋白聚集形成能力方面却明显强于00B015(P<0.05)。结论成功建立了一种能够对EPEC或EHEC所引发的宿主细胞黏附及擦拭性损伤进行半定量分析的方法。
- 王海光顾江余抒张卫军邹全明朱凤才毛旭虎
- 关键词：肠致病性大肠杆菌肠出血性大肠杆菌
- 幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的分段表达及免疫学性质分析
- 研究背景:幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)是一种定植于胃内的微需氧菌,与慢性胃炎、消化性溃疡、和胃癌等多种疾病相关,世界卫生组织已将其列为一类致癌因子。尿素酶(Urease)是HP中含量最丰富的...
- 赵卓陈立罗萍余抒吴超邹全明
- 一种重组减毒鼠伤寒沙门氏菌载体疫苗及制备方法
- 本发明涉及一种重组减毒鼠伤寒沙门氏菌载体疫苗，其包含抗原亚单位EspA、IntiminC300和Stx2B，上述抗原亚单位来源于肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7；本发明还涉及上述重组减毒鼠伤寒沙门氏菌载体疫苗的...
- 毛旭虎邹全明肖大平宁元元刘艳青王庆旭易勇余抒程建平童文德张卫军马颖
- 文献传递
- 幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的分段表达及免疫学性质分析被引量：1
- 2010年
- 目的分段表达幽门螺杆菌(HP)尿素酶B亚单位(UreB),并对其进行免疫学性质分析,为精确定位其保护性表位奠定基础。方法用生物信息学软件分析UreB全长基因,选择分段点,PCR分别扩增其5个片段,构建于pET-11c(+)原核表达载体,并转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析蛋白表达情况,ELISA及Western blot分别鉴定其免疫原性及抗原性。结果成功克隆了UreB的5个基因片段,基因测序结果与Genbank公布的序列一致.经SDS-PAGE分析,5个蛋白表达相对分子质量大小都与预期相符,在大肠杆菌中实现了表达。ELISA和Western blot分析显示,表达的5个蛋白表现出良好的抗原性和免疫原性。结论 UreB的分段表达为进一步研究UreB保护性表位及HP疫苗鉴定奠定了新的基础。
- 赵卓陈立罗萍余抒吴超邹全明
- 关键词：幽门螺杆菌尿素酶B亚单位
- 幽门螺杆菌感染蒙古沙鼠模型胃黏膜菌群多样性研究被引量：4
- 2012年
- 目的对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染蒙古沙鼠模型胃黏膜菌群多样性进行研究,探讨Hp感染与胃内菌群的关系。方法建立Hp感染的蒙古沙鼠模型,空白对照组、阴性对照组、直接感染组和预处理感染组各15例,4周后采集胃黏膜样本,同时检测HP定植率,并提取细菌基因组DNA,采用聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳技术(PCR-DGGE)对黏膜局部菌群进行指纹图谱分析,并对特异性条带进行测序鉴定分析。结果预处理感染组感染率(93.3%)与直接感染组感染率(26.7%)有明显差异(P<0.05);各实验组PCR-DGGE指纹图谱分析显示条带数量,空白对照组(21.6±2.5)、阴性对照组(3.3±1.1)、直接感染组(14.6±2.4)和预处理感染组(7.2±2.2),经统计学分析,各组间均有明显差异(P<0.05),提示蒙古沙鼠各组间菌群多样性存在显著的差异性。结论 Hp感染与胃黏膜菌群结构的变化密切相关。
- 宋阳胡琳琳黄薇薇余抒廖亚玲顾江任莉邹全明郭刚
- 关键词：幽门螺杆菌感染
- 幽门螺杆菌抗原HLA限制性免疫显性表位肽及应用
- 本发明涉及一种幽门螺杆菌抗原HLA限制性免疫显性表位肽及应用。所述幽门螺杆菌HpaA抗原免疫显性表位多肽具有SEQ ID No：8、22、30和42所示的氨基酸序列。本发明所述多肽具有高免疫原性，可引发强烈的免疫反应。另...
- 吴超邹全明陈立罗萍石云赵卓余抒
- 治疗和预防幽门螺杆菌感染的重组融合蛋白疫苗及减毒活菌载体疫苗
- 本发明“治疗和预防幽门螺杆菌感染的重组融合蛋白疫苗及减毒活菌载体疫苗”，属于生物制药领域。本发明提供的重组融合蛋白疫苗及表达该重组融合蛋白的减毒活菌载体疫苗，其特征在于所述重组融合蛋白由来源于幽门螺杆菌的幽门螺杆菌细胞毒...
- 邹全明刘开云吴超毛旭虎郭刚石云余抒陈立解庆华
