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李琳
作品数:
1
被引量:5
H指数:1
供职机构:
中国医学科学院北京协和医学院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
刘音
中国医学科学院北京协和医学院
王壮志
中国医学科学院北京协和医学院
史耕先
中国医学科学院北京协和医学院
朱立平
中国医学科学院北京协和医学院
赵方萄
中国医学科学院北京协和医学院
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中国医学科学...
年份
1篇
2001
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6A8α-甘露糖苷酶酶解p-nitrophenyl-α-D-mannopyranoside
被引量:5
2001年
目的明确6A8cDNA编码蛋白质的α-甘露糖苷酶性质。方法利用基因重组技术将克隆到的3个DNA片段拼接成完整6A8cDNA将其插入到真核表达载体pCDI转染COS-7细胞,用酶活性检测与Westernblot对瞬时表达的蛋白质的性质进行鉴定。结果拼接后的cDNA片段经测序完全符合6A8cDNA碱基顺序。转染重组表达载体pCDI-6A8的COS-7细胞的匀浆对p-nitrophenyl-α-D-mannopyranoside的酶解作用为转染空载体pCDI的细胞及野生型细胞的3~4倍,且这种酶解作用不能被swainsonine所抑制。Westernblot检测显示在相对分子质量(Mr)120000处有一明显蛋白带,此带的显影于转染pCDI-6A8cDNA的细胞明显深于转染空载pCDI及野生型细胞。结论6A8cDNA编码的蛋白质确为一种α-甘露糖苷酶,属于Ⅱ类α-甘露糖苷酶。
王壮志
李琳
史耕先
刘音
赵方萄
朱立平
关键词:
COS-7细胞
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