陈新江
- 作品数：7 被引量：8H指数：2
- 供职机构：宁波天一职业技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划浙江省高职教育研究会教育教学改革研究课题更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 马传染性贫血病毒表面蛋白基因的克隆与表达
- 利用RT-PCR技术扩增马传染性贫血病毒表面蛋白(gp90)基因,克隆到原核表达载体pET-28a 的EcoRⅠ／XhoⅠ位点,经PCR、酶切以及DNA测序鉴定,gp90基因片段已正确插入表达载体中,将该重组载体命名为p...
- 陈新江张耀洲张晓燕
- 关键词：免疫印迹试验
- 文献传递
- 马传染性贫血病毒膜蛋白基因的改造及其在真核细胞中的表达研究
- 马传染性贫血病毒(EquineInfectiousAnemiaVirus，EIAV)是逆转录病毒科慢病毒属的成员之一，不仅与人免疫缺陷病毒具有序列同源性，而且与其血清具有交叉反应。马传染性贫血驴白细胞弱毒疫苗是迄今为止唯...
- 陈新江
- 关键词：马传染性贫血病毒真核表达蛋白基因基因改造
- 文献传递
- 马传染性贫血病毒膜蛋白基因的改造及其在真核细胞中的表达被引量：1
- 2008年
- 以马传染性贫血病毒(equine infectious anemia virus,EIAV)天然膜蛋白基因(gp120)为基础设计的DNA疫苗在马体内的表达量很低,这与密码子使用偏嗜性、RNA剪切位点多和导致RNA不稳定性的腺苷丰富区的大量存在有关。为解决这些问题,合成了EIAVgp120基因(Syn-env),使其密码子偏嗜性符合高水平表达的哺乳动物基因。EIAV弱毒疫苗的制备过程中,出现了几个重要而稳定的N-糖基突变位点,以Syn-env为基础,运用重叠延伸PCR定点突变策略获得了6个具有不同N-糖基缺失组合的gp120基因。将突变后的基因克隆到真核表达载体pVRCSV1.0,然后转染Hela细胞,发现这些重组质粒均获得了表达。进而为比较6种质粒诱导机体免疫保护效果,阐明EIAV弱毒疫苗减毒机理奠定了基础。
- 陈新江孟庆来毛洁张晓燕张耀洲
- 关键词：马传染性贫血病毒GP120定点突变真核表达
- 马传染性贫血病毒gp90蛋白的表达及其在诊断中的潜在应用
- 2009年
- 以质粒pVRCSV1.0-syn-gp90为模板,利用PCR扩增马传染性贫血病毒外膜蛋白基因(gp90),构建了原核表达质粒pET-28a(+)-gp90,然后转化大肠杆菌Rosetta(DE3),诱导表达并纯化该重组蛋白,ELISA和Western blot证明马的阳性血清可以识别该重组蛋白。以纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,测定的效价为1∶13,000。
- 陈新江毛洁孟庆来张晓燕张耀洲
- 关键词：GP90基因原核表达纯化EIAV
- 幽门螺杆菌的左氧氟沙星耐药性及其基因分析被引量：2
- 2010年
- 分析了宁波地区幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)对左氧氟沙星的耐药情况,探讨了Hp对左氧氟沙星的耐药机制.取患者胃黏膜组织分离培养Hp,检测Hp对左氧氟沙星的耐药率;提取左氧氟沙星耐药Hp DNA,PCR扩增并测序比较.结果表明:宁波地区Hp对左氧氟沙星的耐药率为22.5%,左氧氟沙星耐药Hp菌株gyrA基因91位密码子发生点突变.提示宁波地区Hp对左氧氟沙星已产生一定的耐药性;左氧氟沙星耐药Hp gyrA基因突变可能是本地区左氧氟沙星耐药的重要原因之一.
- 寿佩勤费红军岑叶平王布江陈新江
- 关键词：幽门螺杆菌左氧氟沙星耐药性基因突变
- 微生物学检验实验教学的改革与实践被引量：2
- 2011年
- 改革传统的微生物学检验实验教学,组织学生到大型医院和医学检验类企业开展实验。按照微生物检验室工作流程,分接种、培养、鉴定3大项目进行实验教学。同时,让学生与企业员工进行深入交流,体验企业文化氛围,感受人文关怀,提高了实验教学质量,让学生树立更科学合理的就业观和择业观。
- 陈新江施培铨费红军裘莉佩
- 关键词：微生物学检验教学改革教学质量
- EIAV减毒疫苗克隆株诱导体液免疫反应的时相研究被引量：3
- 2009年
- 为研究马传染性贫血病毒病(EIAV)减毒疫苗免疫动物后体液免疫反应的成熟时相,选用健康马4匹,2匹接种EIAV感染性克隆减毒疫苗pLGFD3毒后,另2匹接种生理盐水做对照,接种后定期采集血样,采用ELISA方法检测各个时相点血清中gp90,p26的结合抗体滴度,并采用细胞蚀斑染色检测病毒中和抗体滴度,分析抗体反应的规律。结果显示,感染性克隆pLGFD3毒免疫后,针对envgp90和gagp26蛋白均产生了特异性的体液免疫反应,gp90结合抗体在2个半月左右达峰值,随后尽管有轻微的波动,一直维持在较高的水平直至免疫后5～6个月,随后开始轻微回落,在免疫后32个月时仍能检测到抗体的稳定存在,而p26结合抗体在1～2个月左右达峰值后则呈明显回落,在4个月时降至检测水平以下。gp90诱导的特异性中和抗体的水平同样在2个月左右达峰值,在整个观测期内持续稳定存在。结果表明,EIAV感染性克隆减毒疫苗免疫后,能诱导产生特异性的gp90,p26结合抗体以及中和抗体,而且gp90特异性抗体和中和抗体可持续稳定存在,这些抗体可能参与减毒疫苗诱导的免疫保护作用。
- 阳凯孟庆来陈新江马燕相文华张耀洲邵一鸣张晓燕
- 关键词：EIAV减毒疫苗体液免疫
