毛洁
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：浙江理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 马传染性贫血病毒膜蛋白基因的改造及其在真核细胞中的表达被引量：1
- 2008年
- 以马传染性贫血病毒(equine infectious anemia virus,EIAV)天然膜蛋白基因(gp120)为基础设计的DNA疫苗在马体内的表达量很低,这与密码子使用偏嗜性、RNA剪切位点多和导致RNA不稳定性的腺苷丰富区的大量存在有关。为解决这些问题,合成了EIAVgp120基因(Syn-env),使其密码子偏嗜性符合高水平表达的哺乳动物基因。EIAV弱毒疫苗的制备过程中,出现了几个重要而稳定的N-糖基突变位点,以Syn-env为基础,运用重叠延伸PCR定点突变策略获得了6个具有不同N-糖基缺失组合的gp120基因。将突变后的基因克隆到真核表达载体pVRCSV1.0,然后转染Hela细胞,发现这些重组质粒均获得了表达。进而为比较6种质粒诱导机体免疫保护效果,阐明EIAV弱毒疫苗减毒机理奠定了基础。
- 陈新江孟庆来毛洁张晓燕张耀洲
- 关键词：马传染性贫血病毒GP120定点突变真核表达
- 家蚕小热休克蛋白BmHSP20.1的表达及其功能分析
- 小热休克蛋白(smal.Hea.Shoc.Protein，sHSP)是一种应激诱导的分子伴侣，分子量大约在12-4.kDa，有一个由80-100氨基酸组成α-晶体蛋白结构域。小热休克蛋白在生理和功能上和其他热休克蛋白有很...
- 毛洁
- 关键词：分子伴侣家蚕蛹间接免疫荧光
- 文献传递
- 马传染性贫血病毒gp90蛋白的表达及其在诊断中的潜在应用
- 2009年
- 以质粒pVRCSV1.0-syn-gp90为模板,利用PCR扩增马传染性贫血病毒外膜蛋白基因(gp90),构建了原核表达质粒pET-28a(+)-gp90,然后转化大肠杆菌Rosetta(DE3),诱导表达并纯化该重组蛋白,ELISA和Western blot证明马的阳性血清可以识别该重组蛋白。以纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,测定的效价为1∶13,000。
- 陈新江毛洁孟庆来张晓燕张耀洲
- 关键词：GP90基因原核表达纯化EIAV
