王浩
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心更多>>
- 发文基金：上海市浦东新区科技发展基金上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 小鼠Sca-1阳性心脏干细胞的分离提取和表型鉴定被引量：1
- 2015年
- 【目的】探索可靠的小鼠心脏干细胞（ cardiac stem cells ，CSCs）分离方法，并对体外培养的 CSCs进行表型鉴定。【方法】选用 SPF 级3-4周龄 ICR 小鼠，无菌条件下处理心脏组织，胶原酶 A 消化，40μm 筛网过滤，制备单细胞悬液，利用免疫磁珠分选法结合抗干细胞抗原‐1（stem cell antigen‐1，Sca‐1）的磁珠抗体来分离 Sca‐1阳性干细胞，并进一步行免疫荧光、流式细胞及基因表达等鉴定。【结果】利用磁珠分选法结合特异的抗 Sca‐1的磁珠抗体，成功地从小鼠心脏组织中分离出 Sca‐1阳性细胞群。这些细胞具有小、圆、亮等特征，能在体外培养扩增，传代后仍绝大部分表达 Sca‐1抗原，但基本不表达内皮系或造血细胞系的特异抗原 c‐kit 、Flk‐1、CD31、CD34、CD45等。这些 Sca‐1阳性细胞表达多能干细胞特征的 Nanog 、TERT 基因，心脏胚层特异的 ISL‐1、TBX5基因及心肌特异性转录因子 GATA4、Nkx2．5、MEF2C ，但不表达成熟心肌的标志基因α‐M HC 。【结论】利用磁珠分选法结合抗特异干细胞表面标志物 Sca‐1的磁珠抗体能在短期内获得高纯度的Sca‐1阳性 CSCs ；小鼠 Sca‐1阳性 CSCs 能在体外培养增殖，有助于 CSCs 相关的组织工程或分子机制的实验研究。
- 周春霞张海波陈皓王浩
- 关键词：细胞分离荧光免疫测定
- 成体小鼠心脏Sca-1^+细胞体外分化潜能的实验研究被引量：3
- 2016年
- 目的:研究成体小鼠心脏Sca-1^+细胞体外诱导分化的潜能。方法:利用免疫磁珠分选法分离成体小鼠心脏Sca-1^+细胞,通过BMP-2/FGF-4,TGF-β1及VEGF165等三种不同的体外诱导方法使其向心脏"三系"分化,并从细胞形态的变化、RT-PCR和免疫荧光染色等方面鉴定其分化潜能。结果:经BMP-2/FGF-4诱导,小鼠心脏Sca-1^+细胞发生形态改变,上调心肌细胞特征基因α-MHC、β-MHC、MLC-2a和MLC-2v的mRNA表达,同时表达心肌特征性蛋白cTNT和cMHC。经TGF-β1诱导,小鼠心脏Sca-1^+细胞亦发生形态改变,上调平滑肌特征基因α-SMA和Calponin的mRNA表达,同时表达平滑肌特征性蛋白SMA、sMHC和Calponin的表达。经VEGF165诱导,小鼠心脏Sca-1^+细胞同样发生了形态改变,上调内皮细胞特征基因CD31、vWF和VE-Cadherin的mRNA表达,同时表达内皮细胞特征性抗原CD31。结论:成体小鼠心脏Sca-1^+细胞在体外多种因素的分别作用下,能向心肌样细胞、平滑肌样细胞和内皮样细胞分化,具有心脏干细胞特性的多向分化潜能。
- 王浩陈浩张海波周春霞
- 关键词：SCA-1心脏干细胞诱导分化
