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陈皓
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心
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发文基金:
上海市浦东新区科技发展基金
上海市自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
王浩
上海交通大学医学院附属上海儿童...
周春霞
上海交通大学医学院附属上海儿童...
张海波
上海交通大学医学院附属上海儿童...
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张海波
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陈皓
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医学临床研究
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2015
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小鼠Sca-1阳性心脏干细胞的分离提取和表型鉴定
被引量:1
2015年
【目的】探索可靠的小鼠心脏干细胞( cardiac stem cells ,CSCs)分离方法,并对体外培养的 CSCs进行表型鉴定。【方法】选用 SPF 级3-4周龄 ICR 小鼠,无菌条件下处理心脏组织,胶原酶 A 消化,40μm 筛网过滤,制备单细胞悬液,利用免疫磁珠分选法结合抗干细胞抗原‐1(stem cell antigen‐1,Sca‐1)的磁珠抗体来分离 Sca‐1阳性干细胞,并进一步行免疫荧光、流式细胞及基因表达等鉴定。【结果】利用磁珠分选法结合特异的抗 Sca‐1的磁珠抗体,成功地从小鼠心脏组织中分离出 Sca‐1阳性细胞群。这些细胞具有小、圆、亮等特征,能在体外培养扩增,传代后仍绝大部分表达 Sca‐1抗原,但基本不表达内皮系或造血细胞系的特异抗原 c‐kit 、Flk‐1、CD31、CD34、CD45等。这些 Sca‐1阳性细胞表达多能干细胞特征的 Nanog 、TERT 基因,心脏胚层特异的 ISL‐1、TBX5基因及心肌特异性转录因子 GATA4、Nkx2.5、MEF2C ,但不表达成熟心肌的标志基因α‐M HC 。【结论】利用磁珠分选法结合抗特异干细胞表面标志物 Sca‐1的磁珠抗体能在短期内获得高纯度的Sca‐1阳性 CSCs ;小鼠 Sca‐1阳性 CSCs 能在体外培养增殖,有助于 CSCs 相关的组织工程或分子机制的实验研究。
周春霞
张海波
陈皓
王浩
关键词:
细胞分离
荧光免疫测定
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