朱宏飞
- 作品数：5 被引量：25H指数：2
- 供职机构：武汉大学口腔医院更多>>
- 发文基金：贝朗麻醉科学研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 阿米洛利预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响
- 2010年
- 目的 探讨阿米洛利预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响.方法 清洁级雄性SD大鼠32只,体重200～250 g,随机分为4组（n=8）：对照组（C组）、急性肺损伤组（ALI组）、阿米洛利组（A组）和阿米洛利预先给药组（AL组）.C组股静脉输注生理盐水3 ml,ALI组股静脉输注生理盐水1 ml、内毒素6 mg/kg,A组股静脉输注阿米洛利10 mg/kg、生理盐水2 ml,AL组股静脉输注阿米洛利10 mg/kg、内毒素6 mg/kg,输注速率均为0.05 ml/rain,给药间隔均为30 min.于输注内毒素结束后6 h时处死大鼠取肺,观察肺组织病理学,并行病理学评分,称重后计算肺湿干重比,检测髓过氧化物酶（MPO）活性,测定支气管肺泡灌洗液总蛋白、TNF-α和巨噬细胞炎性蛋白-2（MIP-2）的浓度,采用Western blot法检测肺组织钠氢交换体1（NHE1）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）和细胞外信号调节激酶（ERK）的表达水平.结果 与C组比较,ALI组和AL组肺组织病理学评分、肺湿干重比、MPO活性、支气管肺泡灌洗液总蛋白、TNF-α和MIP-2浓度、肺组织NHE1、p38MAPK和ERK的表达水平明显升高（P＜0.01）,A组上述指标差异无统计学意义（P＞0.05）;与ALI组比较,AL组肺组织病理学评分、肺湿干重比、MPO活性、支气管肺泡灌洗液总蛋白、TNF-α和MIP-2浓度、肺组织NHE1和ERK的表达水平明显降低（P＜0.01）,p38MAPK表达差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 阿米洛利预先给药可减轻大鼠内毒素性急性肺损伤,其机制可能与抑制ERK信号转导通路激活有关.
- 朱宏飞桂平姚尚龙武庆平冯丹程瑾
- 关键词：阿米洛利内毒素血症预先给药
- 脂多糖诱导大鼠急性肺损伤中钠氢交换体的表达被引量：1
- 2011年
- 目的:建立脂多糖诱导大鼠急性肺损伤实验模型,观察实验模型中大鼠肺组织上钠氢交换体1mRNA和蛋白的表达水平变化情况。方法:40只(250~350g)雄性清洁级SD大鼠随机均分成空白对照组(C组)、脂多糖2h组(L-2h组)、脂多糖4h组(L-4h组)和脂多糖6h组(L-6h组)。监测各组大鼠基本生命体征;光学显微镜下观察大鼠肺组织病理改变;计算急性肺损伤评分和肺组织湿/干重比值;检测支气管肺泡灌洗液中总蛋白、肿瘤坏死因子-α和巨噬细胞炎性蛋白的浓度;测定肺组织髓过氧化物酶活性;免疫组化、RT-PCR和Western Blot检测肺组织钠氢交换体1mRNA和蛋白的表达水平。结果:空白对照组大鼠肺组织肺泡结构正常,肺泡腔无渗出物;脂多糖各组大鼠肺组织病理改变明显,肺泡间隔增厚,肺泡腔内可见较多的炎性细胞,肺泡腔内有血性渗出液。和空白对照组比较,脂多糖各组大鼠支气管肺泡灌洗液中总蛋白、肿瘤坏死因子-α和巨噬细胞炎性蛋白的浓度均依次明显增高(FTP=31.67、FTNF-α=275.33、FMIP-2=239.26,均P<0.05);肺组织急性损伤评分、湿/干重比、髓过氧化物酶活性、钠氢交换体1的免疫组化表达水平、钠氢交换体1mRNA和蛋白的表达水平均依次明显增高(F=85.27;F=63.92;F=67.35;F=71.39;F=57.38;F=49.56;均P<0.05)。结论:以6mg.kg-1的剂量给予大鼠静脉注射脂多糖后4h就产生了明显的急性肺损伤,表现为大鼠基本生命体征的内毒素休克症状出现;大鼠组织学炎症病理改变;肺组织含水量增加;肺组织及支气管肺泡灌洗液中相关炎性因子增加;与此同时,脂多糖各组大鼠肺组织钠氢交换体1mRNA和蛋白的表达水平也随着急性肺损伤炎症反应的加重而明显增加。
- 杨超朱宏飞姚尚龙桂平冯丹
- 关键词：脂多糖急性肺损伤急性炎症反应钠氢交换体核转录因子-ΚB
- 大潮气量机械通气对大鼠肺组织急性炎症、氧化应激及细胞凋亡的影响被引量：15
- 2010年
- 目的建立大鼠机械通气肺损伤(VILI)动物模型,研究VILI对肺组织急性炎症、氧化应激及细胞凋亡的影响。方法40只雄性SD大鼠,随机均分成A、B、C、D 4组,每组各10只。A组为空白对照组;B组为大潮气量(VT=40mL/kg)通气1 h组;C组为大潮气量通气2 h组;D组为大潮气量通气4 h组。B、C、D组通气频率均为40次/min。观测各组肺组织病理改变;凝胶电泳迁移率实验(EMSA)检测肺组织细胞NFκ-B的活性,Western blot检测肺细胞核内NF-κB亚基P65蛋白表达水平;采用DNA断端末端标记(TUNEL)法检测肺细胞的凋亡;同时检测肺湿干重比值(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD);检测肺灌洗液中总蛋白、白细胞计数的水平。结果和A组相比,B、C、D组急性肺损伤(ALI)评分、W/D比值、MPO活性、总蛋白、白细胞计数、凋亡指数(AI)、肺组织MDA值、NF-κB的活性及P65蛋白的表达均显著增高(均P<0.01);而SOD值显著下降(P<0.01)。和B组比较,C、D组上述指标均显著增高(均P<0.05);而D组SOD值显著下降(P<0.05)。和C组比较,D组上述指标明显增高(均P<0.05);而SOD值明显下降(P<0.05)。结论大潮气量机械通气产生了明显的VILI,表现为渗透性肺水肿、急性炎症反应、氧化应激反应的激活以及广泛的肺细胞凋亡,其程度随着通气时间的延长而加重。
- 朱宏飞冯丹姚尚龙武庆平
- 关键词：机械通气肺损伤急性炎症反应氧化应激细胞凋亡
- 机械通气肺损伤时肾素-血管紧张素系统激活的实验研究被引量：9
- 2010年
- 目的研究大鼠机械通气肺损伤（VILI）时肾素-血管紧张素系统（RAS）的激活。方法24只健康雄性SD大鼠,体重300~350 g,随机分成4组（n=6）。A为空白对照组;B、C、D组均行大潮气量机械通气（40 mL/kg）,通气频率均为40次/min;通气时间分别为1、2和4 h。观测各组肺组织病理改变并行急性肺损伤（ALI）评分;检测肺湿/干重比值（W/D）;同时检测肺灌洗液（BALF）中肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性、总蛋白,中性粒细胞计数;RT-PCR检测肺组织中血管紧张素原（AGT）、血管紧张素转化酶（ACE）以及血管紧张素Ⅱ（ANGⅡ）1型受体（AT1）mRNA的表达水平;Western blot检测肺组织ACE蛋白的含量;ELISA法检测肺组织中ANGⅡ的含量;免疫组化法检测肺组织AT1受体的表达。结果肺组织病理观察显示：A组肺组织无明显病理改变,B、C、D组出现急性炎性损伤性改变。和A组比较,B、C、D组肺组织ALI评分、W/D,BALF中MPO活性、总蛋白浓度、中性粒细胞计数值,肺组织AGT、ACE、AT1mRNA的表达水平、ACE及ANGⅡ的含量显著增高（均P〈0.01）;和B组比较,C、D组上述各指标均显著增高（均P〈0.05）;和C组比较,D组上述各指标均显著性增高（均P〈0.05）。A组肺组织肺上皮细胞AT1仅有较微弱的表达,而B、C、D组肺组织肺上皮细胞AT1表达显著增多（均P〈0.05）;和B组相比,C、D组AT1表达水平显著升高（均P〈0.05）;C和D组AT1的表达水平差异无统计学意义。结论大潮气量机械通气导致VILI的同时,显著激活了RAS,肺上皮细胞AT1表达显著增多;肺组织AGT、ACE、AT1mRNA的表达水平、ACE及ANGⅡ的含量可随通气时间的延长而显著增加,这可能是VILI的致病机制之一。
- 朱宏飞冯丹姚尚龙武庆平
- 关键词：机械通气肺损伤肾素-血管紧张素系统
- 血管紧张素Ⅱ诱导A549细胞趋化因子的分泌
- 2010年
- 目的 通过研究人重组血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对人肺腺癌A549细胞核转录因子-κB（NF-κB）和趋化因子白细胞介素-8（IL-8）的影响,探讨机械通气肺损伤的致病机制.方法 人肺腺癌A549细胞株以2.0×10^5/mL接种在12孔细胞培养板内,随机（随机数字法）将细胞分为4组（n=24）：（A）对照组不加药物;（B）AngⅡ1 h组培养液中加入终浓度为1×10^-6mmol/L的AngⅡ刺激1 h;（C）AngⅡ2 h组培养液中加入终浓度为1×10^-6 mmol/L的AngⅡ刺激2 h;（D）AngⅡ4 h组培养液中加入终浓度为1×10^-6 mmol/L的AngⅡ刺激4 h.收集细胞培养上清液,用ELISA法测定IL-8含量;提取细胞总RNA,采用逆转录PCR技术检测Ⅱ-8 mRNA的表达水平;提取细胞核蛋白,用凝胶电泳迁移率法检测NF-κB的活性,Western Blot法检测NF-κB p65亚基的水平.采用方差分析检验总体差异,组间两两比较使用q检验.结果 ELISA法测得AngⅡ1 h组细胞培养上清液中IL-8含量（135.35±28.93）pg/mL较对照组（29.59±8.36）pg/mL显著增高（P＜0.01）;AngⅡ2 h组IL-8含量（357.12±57.21）pg/mL较AngⅡ1 h组显著增高（P＜0.01）;AngⅡ4 h组IL-8含量（1732.13±261.73）pg/mL较AngⅡ2 h组显著增高（P＜0.01）,4组总体差异具有统计学意义（F=58.41,P＜0.05）.PCR检测AngⅡ1 h组IL-8 mRNA的表达（Au·mm）水平（0.49±0.08）较对照组（0.13±0.03）显著增高（P＜0.01）;AngⅡ2 h组IL-8 mRNA的表达（Au·mm）水平（0.71±0.10）较AngⅡ1 h组显著增高（P＜0.01）;AngⅡ4 h组IL-8 mRNA的表达（Au·mm）水平（0.88±0.11）较AngⅡ2 h组显著增高（P＜0.05）,4组总体差异具有统计学意义（F=19.08,P＜0.05）.凝胶电泳迁移率法测得AngⅡ1 h组NF-κB的活性（Au·mm）（139.76±11.72）较对照组（70.37±6.57）显著增高（P＜0.01）;AngⅡ2 h组NF-κcB的活性（Au·mm）（198.90±18.95）较AngⅡ1 h组显著增高（P＜0.05）;AngⅡ4 h组NF-κB的活性（388.73±26.27）（Au·m）较AngⅡ2 h�
- 朱宏飞冯丹桂平姚尚龙
- 关键词：血管紧张素上皮细胞核转录因子-ΚB白细胞介素-8
