周钦
- 作品数：7 被引量：2H指数：1
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Miox基因在爪蟾胚胎发育中的时间和空间表达谱分析被引量：1
- 2014年
- 目的研究肌醇加氧酶（myo-inositol oxygenase，Miox）基因在物种进化及爪蟾胚胎发育过程中的时间和空间表达的分布特点。方法利用半定量RT-PCR观察Miox在爪蟾胚胎发育过程中的时间表达模式，利用整体原位杂交方法观察Miox在爪蟾胚胎发育过程中的空间表达模式。结果RT-PCR结果显示Miox基因在胚胎发育第26期以前都没有表达，至胚胎发育第28期开始有微量表达，随着胚胎的发育其表达量逐渐增高；胚胎发育第40期表达明显升高，第41期时达到最高，第45期时表达有所下降。与胚胎发育第28、34期相比，第40、41、45期表达上调（P〈0．05）；与胚胎发育第40期相比，第41期表达上调（P〈0．05）；然而，同胚胎发育第41期相比，第45期表达下调（P〈0．05）。整体原位杂交方法发现在胚胎发育30期以前均没能检测到Miox在爪蟾任何器官中的表达，从33期开始，Miox在爪蟾前肾有很微弱的表达，且Miox的表达随着发育的进展逐渐升高。整体原位杂交方法结果同RT-PCR结果相类似，直至第39～40期，Miox的表达才明显升高，并且在随后的时期都以同样高的水平表达。另外，Miox基因在爪蟾胚胎发育过程中均仅仅在原肾小管表达。结论Miox是一个肾脏特异性基因，对于研究肾脏发育可能提供一个特异性标记。
- 傅小娟陈雪梅周钦杜晓刚
- 关键词：胚胎发育
- 热带爪蛙LAP家族基因在胚胎早期发育中的表达图式
- 2011年
- LAP家族蛋白含有特征性的富含亮氨酸的重复序列和PDZ结构域.在脊椎动物和无脊椎动物中,LAP家族基因在细胞极性、上皮组织的动态平衡与肿瘤抑制等的调控中具有重要作用.在脊椎动物中,这一家族基因包括4个成员:densin,erbin,scribble和lano.本研究根据热带爪蟾(Xenopus tropicalis)的基因组与EST序列,推测了其LAP家族的4个基因,克隆了其基因片段并研究了它们在胚胎发育中的表达图式.爪蛙的LAP蛋白在结构上与其他脊椎动物中的同源蛋白相似.这4个基因均有母源性表达,在卵裂期胚胎动物极细胞中表达较强,到原肠胚期在动物帽细胞中可检测到.在胚胎发育晚期,这些基因在上皮细胞中表达较广,包括神经上皮、耳泡、视泡和前肾.上述结果表明,LAP基因可能参与调控爪蛙早期发育中的上皮细胞极性和形态发生.在爪蛙胚胎头部,erbin和lano具有相似的时空表达图式,这表明二者在体内的功能可能是相关的.
- 杨秋潭吕小岩孔清华李朝翠周钦毛炳宇
- 关键词：基因家族ERBIN表达图式
- 系统性红斑狼疮血管炎相关自身抗原的血清学筛选被引量：1
- 2007年
- 目的通过重组cDNA表达文库的血清学分析(SEREX)技术获得系统性红斑狼疮(SLE)血管炎相关自身抗体所对应自身抗原的cDNA序列。方法收集SLE病人血清作为筛选血清,采用SEREX技术筛选人微血管内皮细胞(HM VEC)cDNA文库。结果通过两轮筛选获得11个阳性克隆。通过生物信息学分析发现这11个阳性克隆cDNA序列编码三种不同的自身抗原,分别为SSA、SSB和YB-1。其中YB-1尚未被报道过与SLE血管炎相关。结论首次发现YB-1与SLE血管炎相关。通过SEREX技术,我们可能找到有助于SLE诊断、治疗和判断预后的自身抗原。
- 杨满秦伟冯胜刚邓洪新樊均明周钦魏于全
- 关键词：CDNA表达文库YB-1系统性红斑狼疮
- 小鼠Pkhd1条件性基因打靶载体的构建
- 2007年
- 目的构建小鼠Pkhd1条件性基因打靶载体,为建立Pkhd1条件性敲除小鼠模型奠定基础。方法以正常小鼠(129xl/SvJ)基因组DNA为模板,扩增小鼠包括第6号外显子的Pkhd1基因部分序列,通过引入LoxP和Neo基因等步骤,建立条件性敲除Pkhd1第6号外显子的条件性基因打靶载体。结果经多个限制性核酸内切酶酶切鉴定和测序证实,构建的小鼠Pkhd1基因条件性打靶载体符合设计要求。结论成功构建了小鼠Pkhd1条件性基因打靶载体,为建立Pkhd1基因条件性敲除小鼠打下了基础。
- 杨季云周钦张铮郭红张思仲
- 关键词：同源重组
- 小鼠Pkd2基因条件性敲除打靶载体的构建
- 2008年
- [目的]构建小鼠Pkd2条件性基因敲除打靶载体,为建立Pkd2基因条件性敲除小鼠模型奠定基础。[方法]以正常小鼠(129x1/SvJ)基因组DNA为模板,扩增小鼠Pkd2基因一段包括第9号外显子的长为9.3kb的序列,通过引入LoxP和Neo基因等步骤,建立条件性敲除Pkd2第9号外显子的条件性基因打靶载体。[结果]经多个限制性核酸酶酶切鉴定和测序证实,所构建的Pkd2基因条件性敲除打靶载体符合设计要求。[结论]成功构建小鼠条件性Pkd2基因敲除打靶载体,为建立Pkd2基因条件性敲除小鼠模型奠定基础。
- 郭红边国慧周钦
- 关键词：PKD2基因成人多囊肾病
- 小鼠锌指蛋白基因Znf230条件基因打靶载体的构建
- 2007年
- 目的构建用于小鼠锌指蛋白基因Znf230条件基因打靶的载体,为产生Znf230基因敲除的小鼠模型准备条件。方法设计和合成引物,经PCR从小鼠的基因组中扩增出5′同源臂、3′同源臂及锚定序列,长度分别为4,4,1kb的片段,反向插入pBS载体的neo基因的两侧,从而构建小鼠Znf230条件基因打靶载体Znf230-pBS(5)。结果经过限制性内切酶及DNA测序鉴定,证实该条件基因打靶载体含有的同源序列与Genebank公布的基因序列一致,表明载体构建成功。结论PCR技术和定向克隆技术是构建条件基因打靶载体简单而可靠的方法。运用该技术可获得小鼠锌指蛋白基因Znf230的条件基因打靶载体。
- 刘英刘运强周钦陶大昌彭艳刘合焜张思仲
- 关键词：基因聚合酶链反应
- 条件性基因敲除及其在肾病研究中的应用
- 2005年
- 条件性基因敲除克服了传统的基因打靶的缺陷,有助于在特定的组织细胞和(或)特定的时间研究特定基因的功能以及更好地模拟和研究人类疾病。本文综述条件性基因敲除的基本原理、操作程序及其在肾病研究中的应用。
- 杨满周钦樊均明
- 关键词：肾疾病基因
