唐丽霞
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 尿酸酶基因工程菌的构建与分泌表达
- 尿酸是嘌呤分解代谢产物，部分动物将尿酸通过尿酸酶（Uricase,EC1.7.3.3）的作用转化为水溶性更好的尿囊素排出体外，由于人类在进化过程中尿酸酶基因发生突变，因此，只能以尿酸的形式排出。尿酸排出体外有两种途径，一...
- 唐丽霞
- 关键词：尿酸酶基因工程菌高尿酸血症
- 尿酸酶基因工程菌的构建与分泌表达
- 2018年
- 目的:将产朊假丝酵母菌尿酸酶编码基因克隆至已改造的表达载体p ET-28a中,使尿酸酶在大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli)中以分泌的形式持续表达,并具有生物学活性。方法:(1)利用重组PCR技术删除p ET-28a中Lac O和Lac I序列构建表达载体;(2)金黄色葡萄球菌蛋白A(Staphylococal Protein A,SPA)信号肽编码基因与尿酸酶基因N端融合成目的基因;(2)将目的基因克隆至表达载体中,再转化至E.coli DH5ɑ中,使之表达;(4)利用SDS-PAGE鉴定并测定表达产物生物学活性。结果:尿酸酶在E.coli中以分泌的形式持续表达,并具有生物学活性。结论:利用肠道内正常菌群E.coli构建可分泌、持续表达蛋白的载体p ET-28a-s UOX,可将表达的尿酸酶作用于高尿酸血症模型上,为应用于动物实验通过肠道降低尿酸水平提供依据。
- 唐丽霞刘杰刘先俊蒋雪
- 关键词：尿酸酶大肠埃希菌分泌
