刘先俊
- 作品数：44 被引量：189H指数：6
- 供职机构：重庆医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国高等教育学会医学教育专业委员会医学教育研究立项课题重庆市教育委员会科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- 胎盘肥胖基因表达水平与胎盘重量和新生儿体重的关系研究被引量：11
- 1999年
- Ｌｅｐｔｉｎ 是由肥胖基因（ Ｏｂｅｓｅ Ｇｅｎｅ ， Ｏｂ 基因） 表达的一种内分泌激素，具有多种重要的生理功能。有证据表明，在母血、羊水、胎盘、新生儿血液等处可检测出一定浓度的 Ｌｅｐｔｉｎ ， 表明 Ｌｅｐｔｉｎ 在妇女怀孕过程中具有重要的作用。先前的资料证实， Ｏｂ 基因主要在脂肪组织中表达。近来发现， 胎盘 Ｏｂ 基因 可表达产生 Ｌｅｐｔｉｎ ， 本文用反转录－ Ｐ Ｃ Ｒ（ Ｒ Ｔ － Ｐ Ｃ Ｒ） 荧光定量分析人胎盘 Ｏｂ 基因ｍ Ｒ Ｎ Ａ 的表达水平，并分析其与胎盘重量、新生儿体重、性别、孕周、产妇体重等的关系。发现，胎盘 Ｏｂ 基因表达水平与新生儿体重有较好的相关性，与胎盘重量也相关， 但与孕周、胎儿性别和产妇体重无明显相关性。
- 刘先俊漆洪波汪炼刘方欣
- 关键词：胎盘重量新生儿体重
- 以器官系统为中心的基础医学课程改革初探被引量：33
- 2013年
- 随着现代医学教育的发展,传统的"以学科为中心"的课程模式存在诸多弊端,而"以器官系统为中心"的课程模式受到诸多好评。重庆医科大学初步探索适应校情的基础医学课程教学体系改革,为全面开展以器官系统为中心的基础医学课程模式,为培养具有创新精神和综合能力的实用型人才打下基础。
- 朱慧芳刘先俊张莹卜友泉
- 关键词：教学改革课程整合器官系统
- 地方医学院校新进教师进行生物化学课程备课的体会
- 2017年
- 生物化学课程是医学专业学生必修的基础主干课程之一,在学生学习基础理论知识过程中具有重要的地位。由于生物化学课程涉及的内容多、概念抽象,因此想要取得良好的教学质量和教学效果,需要做好教学前的准备工作。尤其是对于教学经验尚缺的新进教师,备好课就显得尤为重要。本文详述了地方医学院校青年教师可从树立教师责任感、了解教学对象的专业和课时数、充分利用教学团队资源、搜集教学资源并深入掌握教学内容和学习并掌握现代化教学技术等五个方面开展教学前的准备工作。
- 陈全梅刘先俊卜友泉
- 关键词：生物化学备课教学改革
- 聚合酶链反应及其应用
- 1991年
- 聚合酶链反应(Polymerase ChainReaction)简称PCR.它由引物介导的在体外将特定DNA序列在DNA聚合酶的作用下进行扩增的方法.为要从生物材料中获得某一段特定的DNA序列(基因),往往需要经过非常繁琐的步骤并花费大量的时间,PCR技术的发明则是在该方面取得了重大突破.
- 刘先俊吕懿娟
- 关键词：聚合酶链反应聚合酶DNA
- 高等医学院校生物学科主干课程整合与教学体系重构初探被引量：11
- 2015年
- 课程整合及相应的教学体系重构是当前高等医学教育改革的核心与热点。医学教育中,生物学学科主干课程的整合很有必要,但目前尚无成熟的模式。作者尝试将《生物化学》、《分子生物学》、《细胞生物学》和《医学遗传学》四门生物学主干课程进行整合,对原有教学内容进行优化、精简和融合,形成了一门新的整合课程。在课程教学中,"以学生为中心",采用基于案例和问题的小组讨论式教学;采取形成性评价与总结性评价相结合的方法进行课程考核和成绩评定;跨科室组建教学团队,实行多学科联组教学。这些尝试为高等医学院校生物学相关课程的整合提供了有益的借鉴和经验。
- 李轶张莹刘先俊陈俊霞易发平唐吟宇朱慧芳卜友泉
- 关键词：细胞生物学医学遗传学整合课程
- 人瘦素分离纯化的实验研究(英文)被引量：1
- 2005年
- 背景:瘦素是脂肪组织产生的一种激素,具有广泛的生理作用,也是近年能量代谢研究的热点之一,所用瘦素主要是大肠杆菌的表达产物,后者以不溶解的包含体形式存在,需要通过烦琐的复性过程才能获得具有生物学活性的人瘦素。目的:为获得天然溶解形式的人瘦素,探索其非亲和层析纯化条件,为进一步可能的产业化提供依据。设计:实验观察。单位:一所医学院的生化教研室分子生物学实验室。材料:选择强阴离子交换剂(SepharoseQ)和疏水介质(PhenylSepharose6)在不同条件下进行层析的方法,以尽可能除去样品中的杂质。方法:将培养获得的上清液在pH7.5的条件下首先经过Q柱柱层析纯化,收集目的蛋白;随后在高盐犤mol/L(NH4)2SO4犦状态下通过疏水层析进一步纯化。主要观察指标:经凝胶扫描分析,纯化前的培养上清液人瘦素纯度为42.3%,Q柱柱层析纯化后纯度达到89.6%,疏水层析进一步纯化后纯度达到96.2%。结果:纯化产物在SDS-PAGE上呈现单一条带。经凝胶扫描分析,纯化前的培养上清液人瘦素纯度为42.3%,Q柱柱层析纯化后纯度达到89.6%,疏水层析进一步纯化后纯度达到96.2%。结论:通过强阳离子交换层析和疏水层析的合并应用,可将毕赤酵母表达系统表达的人瘦素进行有效纯化,纯度可达镍柱亲和层析的纯化结果,为进一步可能的产业化生产?
- 刘先俊刘方欣漆洪波
- 关键词：基因表达
- 胸腺素α1与复合α干扰素融合蛋白的表达及其生物学活性被引量：3
- 2008年
- 实验旨在获得具有双重生物学活性的重组胸腺素α1(Thymosin alpha1,TM-α1)与复合α干扰素(IFNα-con)融合蛋白。选择大肠杆菌偏爱的密码子,将合成的TM-α1与IFNα-con编码序列构成的融和基因克隆至大肠杆菌表达载体pET-22b(+)、在宿主菌BL21(DE3)-Codon plus-RP-X中成功表达了可溶性融合蛋白(TM-α1-IFN-con)。表达量占总蛋白的20%以上。通过硫酸铵沉淀、疏水层析、阴离子交换层析、阳离子交换层析、分子筛层析后,产品纯度达到96%以上。采用细胞病变抑制法测定融合蛋白的抗病毒活性,采用细胞增殖实验检测融合蛋白对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。结果表明,融合蛋白的抗病毒活性优于市售的IFNα1b和IFNα2a。对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响与市售的合成胸腺素α1相同。已有研究证实,该融合蛋白具有良好的体外抗HBV作用,其体外抗HBV活性比联合应用TM-α1和干扰素α强,且细胞毒性明显低于联合应用TM-α1和干扰素α。以上结果表明,通过大肠杆菌表达的可溶性融合蛋白(TM-α1-IFN-con),既具有良好的干扰素α抗病毒作用,也具有胸腺素α1促淋巴细胞增殖作用。
- 刘先俊刘方欣黎波周辉云王琴琴
- 关键词：胸腺素Α1融合蛋白活性
- 人肺腺癌中癌相关成纤维细胞的分离培养与初步分析
- 2019年
- 目的:分离鉴定人肺腺癌组织中的癌相关成纤维细胞(cancer-associataed fibroblasts,CAFs),分析CAFs对肺癌细胞增殖和迁移能力的影响,为进一步探索CAFs在肺癌发生发展中的作用及机制奠定基础。方法:获取人肺腺癌患者手术样本,分离并培养癌组织中的成纤维细胞。采用相差显微镜观察细胞形态,采用间接免疫荧光实验分析关键分子标志物的表达。采用CCK-8法检测细胞增殖,采用流式细胞仪分析细胞周期;采用Transwell实验分析细胞迁移能力。采用共培养和制备条件培养基方法分析CAFs对肺腺癌细胞A549增殖和迁移能力的影响。采用qRT-PCR检测关键基因表达的变化。结果:从人肺腺癌新鲜组织中分离获得CAFs,其形态为长梭形,表达纤粘蛋白和波形蛋白等成纤维细胞标志物,不表达上皮细胞角蛋白8/18(CK8/18)等上皮细胞标志物。肺腺癌CAFs增殖活跃。肺腺癌CAFs能明显促进A549的增殖和迁移能力,并明显上调A549细胞中c-Myc、PIM1、SOCS3和CCND1基因的表达。结论:成功分离了人肺腺癌CAFs,其能明显促进肺癌细胞的增殖和迁移能力。
- 孙世杰田雷李丹刘先俊卜友泉
- 关键词：肺癌成纤维细胞癌相关成纤维细胞原代培养
- 膀胱癌患者尿液中CK-20 mRNA检测的临床意义
- 2004年
- 目的 探讨检测尿液中CK 2 0mRNA诊断膀胱癌的可行性。方法 采用RT PCR技术检测 41例膀胱移形细胞癌、4例膀胱非移形细胞癌、15例膀胱炎伴血尿患者及 10例健康者的尿液脱落细胞中CK 2 0mRNA的表达 ,还包括 7种不同的肿瘤细胞系 (膀胱癌T2 4、肾癌 786 0和GRC 1、乳腺癌MCF 7和MDA MB 43 5、卵巢癌SKOV3 和 3AO)。结果 膀胱移形细胞癌中 3 6例CK 2 0阳性 ( 87 80 % ) ,GⅠ为 18/ 2 1( 85 71% ) ,GⅡ为 11/ 13 ( 84 62 % ) ,GⅢ为 7/ 7( 10 0 % ) ,统计差别无显著性意义 (P >0 0 5 ) ,Ta～ 1为 2 0 / 2 2 ( 90 91% ) ,T2～ 4为 16/ 19( 84 2 1% ) ,两组差别亦无显著性意义 (P >0 0 5 ) ;膀胱非移形细胞癌均无CK 2 0阳性 ;膀胱炎伴血尿患者中 4例CK 2 0阳性 (特异性为 73 3 3 % ) ;19例膀胱癌组织及T2 4细胞系均有CK 2 0mRNA的表达 ,其余 6种细胞系及 10例健康者均为阴性。结论 CK 2 0在诊断膀胱癌有较高的敏感性和特异性 ,与膀胱癌的大小、数目、分期及分级无关 ,可用于膀胱癌的早期诊断和手术后随访。
- 王德林陈在贤吴小候苟欣刘航尹志康张云美赵勇张徽刘先俊
- 关键词：膀胱肿瘤细胞角蛋白聚合酶链反应
- 蔗蜡高级烷酸和高级烷醇分离与降胆固醇的作用(英文)被引量：3
- 2007年
- 背景:甘蔗蜡作为制糖工业的副产品,在非医药方面已有广泛的用途。有实验证实,甘蔗蜡在降低血胆固醇方面具有良好的作用,但其效应及适用于医药应用的甘蔗蜡的分离手段有待进一步研究。目的:从国产甘蔗蜡中分离适合医药用途的高级烷酸混合物、高级烷醇混合物,并观察其对高脂血症模型大鼠的降胆固醇作用。设计:随机对照动物实验。单位:重庆康尔威药业股份有限公司药物研究所。材料:实验于2005-04/2006-01在重庆康尔威药业股份有限公司药物研究所完成。选用65只成年Wistar雌性大白鼠,体质量180～220 g,鼠龄3～6个月,SPF级,由重庆中药研究院实验动物中心提供。粗甘蔗蜡购自北京嘉德鸿盛生物化学科技有限公司。26C醇、28C醇、30C醇、32C醇和28C酸、30C酸、32C酸、34C酸为Sigma产品(气相色谱标准品)。其余试剂为国产分析纯级。方法:①将粗甘蔗蜡通过乙醇等有机溶剂反复提取后成为精制甘蔗蜡,进一步通过皂化、加钙等,将高级烷酸混合物与高级烷醇混合物分离。用气相色谱分析其主要成分,高级烷醇混合物主要分析C26、C28、C30和C32,高级烷酸混合物主要分析C26、C28、C30和C32。②按照参考文献叙述的方法,将大白鼠适应性饲养3d后,随机摸球法分为空白组(n=10)和实验组(n=55),断尾采血,自动生化分析仪测定所有大鼠三酰甘油、总胆固醇与高密度脂蛋白胆固醇。空白组给予普通颗粒饲料,实验组给予高脂饲料(猪油质量分数0.1、蛋黄粉质量分数0.1、胆固醇质量分数0.01、猪胆盐质量分数0.002、普通饲料质量分数0.788)[3],自由摄食与饮水。7 d后尾尖再次采血测定三酰甘油、总胆固醇与高密度脂蛋白胆固醇。按血清三酰甘油的高低随机将实验组大白鼠分为5个亚组:阴性对照组、高级烷醇低剂量组、高级烷醇高剂量组、高级烷酸低剂量组、高级烷酸高剂量组,每组1
- 刘方欣张玉诺李晓愚谢娟王敏刘先俊
- 关键词：胆固醇
