李罗刚
- 作品数：10 被引量：3H指数：1
- 供职机构：云南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省应用基础研究基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 一种猪舍喂料系统
- 本实用新型涉及一种猪舍喂料系统；所述的猪舍喂料系统主要包括料槽、称重传感器、射频片、滑动座、滑杆、丝杆、驱动电机、给料箱、叶轮喂料器、出料管、RFID读片器、控制器、单片机、上位机。本实用新型将传统的喂料车改进为丝杆和滑...
- 王淑燕霍金龙王配曾日彬李罗刚
- 文献传递
- 版纳微型猪近交系雄激素受体AR基因的克隆和表达分析被引量：2
- 2018年
- 为探讨猪雄激素受体(Androgen receptor,AR)基因的序列、结构、表达和功能,以版纳微型猪近交系(Banna mini-pig inbred line,BMI)睾丸组织为材料,用RT-PCR技术获得猪AR基因cDNA序列,进行生物信息学分析,应用荧光定量技术明确其mRNA的多组织表达特征。结果表明:BMI AR基因cDNA长3 257bp(GenBank登录号:KU705631),包含2 688bp的全长编码区,位于猪X染色体,含有9个外显子和8个内含子;推导出的BMI AR蛋白含有1个核定位信号、1个DBD结构域和1个LBD结构域,无信号肽,无跨膜螺旋;与黄牛、山羊、人、猩猩、大鼠和小鼠的AR蛋白依次有94.2%、94.0%、90.2%、89.0%、88.1%和87.5%的同源性;其二级结构中以无规则卷曲和α螺旋为主,延伸链和β转角只在局部出现;在二级结构预测结果的基础上利用同源建模构建了其三级结构;AR基因mRNA在被检测的BMI 15个组织中呈现差异表达现象,表达量最高的组织为睾丸。该研究结果为进一步研究AR基因在BMI中的生理功能及调节机制提供了依据。
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- 关键词：雄激素受体组织表达谱生物信息学
- 一种猪自动采精系统
- 本实用新型涉及一种猪自动采精系统，养殖技术领域；所述弧形卧板底部四角位置铰接有设置在套筒内的伸缩杆，套筒底部与底座固定连接，且套筒外壁设有紧固螺栓，底座上设置有控制器、真空泵、固定瓶座、放置支架，固定瓶座上放置有储液瓶，...
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- 文献传递
- 版纳微型猪近交系SLA-DOA基因克隆、mRNA表达及蛋白质功能生物信息学分析
- 2017年
- 目的:克隆版纳微型猪近交系(Banna mini-pig inbred line,BMI)白细胞抗原DO座位alpha亚基(SLA-DOA)的编码序列,并对其19个重要组织mRNA表达作半定量分析。方法:RT-PCR方法获得SLA-DOA的全长cDNA序列;半定量RTPCR方法分析其在BMI重要组织的mRNA表达谱,并运用生物信息学对其核酸及蛋白序列进行分析,构建系统进化树。结果:BMI SLA-DOA cDNA长度为1 079 bp,编码250个氨基酸,蛋白质分子量为27.81 k D,等电点为6.48;位于猪7号染色体,由4个外显子和3个内含子构成;其mRNA高表达于淋巴结和胃,低表达于心脏、皮肤和十二指肠,在其他14种组织中不表达;SLA-DOA蛋白存在1个信号肽,1个跨膜螺旋,3个保守域,4个O连接的糖基化位点,18个磷酸化位点,位于细胞质的概率是94.1%;系统进化分析表明,在所选择的6个物种中,BMI(猪)与牛的亲缘关系最近。结论:本研究成功克隆了版纳微型猪近交系SLA-DOA基因并进行了生物信息学功能分析和多种组织表达分析,为版纳微型猪近交系的异种器官移植研究奠定基础。
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- 一种通风隔热奶牛舍
- 本实用新型涉及一种通风隔热奶牛舍，属于牛养殖技术领域，双层屋顶通过支架Ⅰ固定在所述墙体顶部，顶盖通过支架Ⅲ安装在双层屋顶顶部，双层屋顶包括上顶板和下顶板，上顶板与下顶板通过支架Ⅱ相互安装连接；墙体上设有通风窗，通风窗外侧...
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- 文献传递
- 版纳微型猪近交系ARRDC5基因亚细胞定位研究
- 2020年
- 【目的】抑制蛋白5(ARRDC5)的功能尚不清楚,前期发现其可能与公猪繁殖力有关,本研究旨在克隆猪ARRDC5基因以及确定猪ARRDC5蛋白的亚细胞定位。【方法】通过NCBI下载猪近缘物种ARRDC5基因序列,在线BLAST比对获得猪EST序列,电子克隆猪ARRDC5基因编码区及部分侧翼序列。构建真核融合表达载体并瞬时转染猪睾丸细胞系ST,利用倒置荧光显微镜检测蛋白表达。【结果】获得版纳微型猪近交系(BMI)ARRDC5基因的cDNA序列1045 bp,包含1014 bp的CDS区,编码337个氨基酸,与牛及人的同源性高。成功构建了表达载体pEGFP-C1-ARRDC5,ARRDC5蛋白主要定位于细胞质中,部分细胞核中也有分布。【结论】研究结果为进一步研究该蛋白功能奠定基础。
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- 关键词：基因克隆亚细胞定位
- 版纳微型猪近交系RNF148基因生物信息分析、组织差异表达及亚细胞定位
- 2018年
- 指环蛋白RNF148与睾丸形成和精子发生密切相关。本研究以猪及其他近缘物种的RNF148 mRNA为参考序列,设计特异引物从版纳微型猪近交系(Banna mini-pig inbred line,BMI)睾丸组织中扩增RNF148基因完全编码序列;对RNF148蛋白质序列进行生物信息学分析,预测其功能,并构建RNF148的多物种系统进化树;应用实时荧光定量PCR技术检测BMI 15个重要组织的RNF148 mRNA转录表达水平;构建真核表达载体,转染猪睾丸细胞系,并进行亚细胞定位分析,检测该蛋白在细胞中的表达部位。结果表明:扩增得到BMI RNF148编码区序列长912bp,编码303个氨基酸;RNF148包含3个保守结构域PA_GRAIL_like、RING_Ubox和zf-rbx1超家族,存在1个跨膜螺旋结构,有N端信号肽序列,二级结构以α螺旋为主,N末端和C末端均疏水,有4类功能活性位点,在进化中高度保守,91.4%位于细胞质中;在睾丸中特异高表达,在心、肝等其他14个组织中相对低表达;成功构建了融合的绿色荧光蛋白真核表达载体,并确定RNF148多在细胞质中表达。研究结果为探索RNF148基因在BMI公猪繁殖性能方面的作用奠定了基础。
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- 关键词：亚细胞定位
- 一种奶牛舍用饮水系统
- 本实用新型涉及一种奶牛舍用饮水系统，属于牛养殖技术领域，所述奶牛舍用饮水系统包括牛舍的墙体、牛栏，墙体外侧设有风冷机、隔热储水罐，隔热储水罐外侧设有隔热层，风冷机出水端与隔热储水罐连通，牛栏内设有发酵床，牛栏内的墙体上装...
- 张霞霍金龙王配王淑燕李罗刚
- 文献传递
- 小猪饲料采食器
- 本实用新型涉及小猪饲料采食器，属于养殖设备领域，所述采食槽顶部固定设有安装支架，安装支架内部连接有储料桶，储料桶底部为锥形结构，储料桶顶部中央设有安装套筒，安装套筒内由上到下依次安装有微型风机和云母支架，云母支架上缠绕有...
- 霍金龙王配李罗刚宋雪王丽娜
- 文献传递
- 版纳微型猪近交系CPN10克隆、亚细胞定位、组织表达和生物信息学分析被引量：1
- 2019年
- 【目的】以版纳微型猪近交系(BMI)为材料克隆CPN10基因,从亚细胞、m RNA水平及生物信息学方面初步探索其结构及功能特性,为该基因在猪—人异种器官移植免疫排斥中的作用研究奠定基础。【方法】采用RT-PCR方法获得CPN10基因c DNA序列,应用分子克隆技术构建目的基因和报告基因EGFP的重组真核表达载体pEGFP-C1-CPN10,将其转染猪肾细胞PK15进行瞬时表达,通过EGFP示踪CPN10在PK15细胞中的表达和定位。进一步应用荧光定量技术明确其mRNA的多组织表达特征。最后利用生物信息学分析CPN10蛋白质的结构特征。【结果】得到BMI CPN10 CDS 309 bp序列(GenBank登录号:KM098149),成功构建了BMI CPN10基因的绿色荧光蛋白融合表达载体pEGFP-C1-CPN10,转染PK15细胞且主要在细胞质中检测到绿色荧光蛋白表达。多组织荧光定量表达分析表明:BMI CPN10 mRNA在皮肤中具有最高表达量,在肝和肾上腺中的表达量较高,在其余各组织中呈中低度表达或几乎不表达。生物信息学分析表明:CPN10编码102个氨基酸,其蛋白分子量为10.93 ku,等电点为8.89,含1个CPN10保守结构域和5个磷酸化位点,二级结构以延伸链结构为主,无跨膜螺旋结构和信号肽。【结论】CPN10基因定位在细胞质中,在皮肤中高表达,该研究结果为进一步研究该基因在免疫排斥方面的功能奠定了理论基础。
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- 关键词：异种移植亚细胞定位生物信息学
