李雪 作品数:39 被引量:149 H指数:9 供职机构: 辽宁省疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 辽宁省自然科学基金 辽宁省科学技术计划项目 辽宁省科学技术基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 轻工技术与工程 农业科学 环境科学与工程 更多>>
肉与肉制品空肠弯曲菌耐药性和多位点序列分型 2023年 目的了解辽宁省肉与肉制品中分离的空肠弯曲菌的耐药性和多位点序列分型(MLST),为防治食源性空肠弯曲菌感染提供依据。方法于2020年对9株分离自肉与肉制品检测样品的空肠弯曲菌进行全基因组测序,采用琼脂稀释法检测最低抑菌浓度,分析菌株耐药性。采用微生物耐药机制溯源参比数据库及分析系统鉴定MLST型别。结果检出耐药株6株,多重耐药株4株。对四环素、萘啶酸、环丙沙星、氟苯尼考、庆大霉素和链霉素耐药分别为6、5、4、2、1和1株;对阿奇霉素、氯霉素和克林霉素敏感。9株空肠弯曲菌检出6种ST型别,以ST45和ST2274为主,ST未分型1株。ST45型的KW028和KW029亲缘关系较近,同源性较高;ST2274型的KW040和KW042亲缘关系较近,同源性较高;ST6701型的KW007与ST2274型的KW040、KW042遗传亲缘关系较近,仅相差1个pgm管家基因。结论9株分离自肉与肉制品检测样品的空肠弯曲菌对四环素、萘啶酸和环丙沙星耐药率较高,以ST45和ST2274为主。 刘海霞 耿英芝 王伟杰 李雪 张眉眉关键词:空肠弯曲菌 耐药性 多位点序列分型 2020-2021年辽宁省食源性单核细胞增生李斯特菌毒力基因分布 2024年 目的分析2020—2021年辽宁省食源性单核细胞增生李斯特菌(Lm)毒力基因分布特征及分子血清分型情况。方法采用普通PCR方法对Lm的19个毒力基因包括毒力岛Ⅰ在内的6个位点(prfA、plcA、plcB、hlyA、mpl和actA)和毒力岛Ⅱ内化素家族蛋白基因的10个位点(inlA、inlB、inlC、inlD、inlE、inlF、inlG、inlH/C2、inlI、inlJ),以及3个毒力基因相关位点(iap、fbpA、hpt)进行检测。同时应用多重PCR对所有菌株进行5种(1/2a、1/2b、1/2c、4b和3a)血清型分型检测。结果在辽宁省食源性分离到的91株Lm中,36株Lm的19种毒力基因全部检出,其检出率高达39.6%。55株Lm菌株出现2种及2种以上毒力基因的不同缺失。inlG和inlF基因缺失率较高,分别为41.8%(38/91)和52.7%(48/91)。依据毒力基因携带情况,可分为13个基因型,其中携带19种毒力基因的Ⅰ型为辽宁省的优势基因型别。辽宁省Lm被分成4组分子血清型,1/2a(3a)血清型占比为59.3%(54/91),1/2b(3b)占比为34.1%(31/91),1/2c(3c)占比为3.3%(3/91),4b(4d、4e)占比为3.3%(3/91),3株4b血清型均分离自肉及肉制品。结论辽宁省食源性Lm的毒力基因携带率高,毒力基因缺失具有多样性且存在样品种类上的差异。 孙婷婷 王伟杰 李雪关键词:单核细胞增生李斯特菌 毒力基因 食源性致病菌 副溶血性弧菌的3种分子分型方法研究 2023年 目的探讨副溶血性弧菌3种分子分型方法间的关联性和菌株间的亲缘关系,分析辽宁省副溶血性弧菌的流行趋势及分布规律,为食源性疾病的防控提供可靠的技术支持。方法对2020年辽宁省44株VP分离株进行血清分型、PFGE、REP-PCR和ERIC-PCR分子分型和聚类分析。结果44株分离株可共分为15个血清型,8株分离株未能分型,血清群以O3群、O1群和O2群为主。临床分离株分子型相似度高,食品分离株分子型相似度低。PFGE的分辨力(DI)为0.986,REP-PCR的分辨力(DI)为0.947,ERIC-PCR的分辨力(DI)为0.935。血清型O3群菌株与O1群菌株分子型相似度高。结论2020年辽宁省VP分离株流行血清型与近5年流行血清型一致。PFGE分型方法的分辨力更优于REP-PCR和ERIC-PCR分型方法,REP-PCR分辨力要优于ERIC-PCR,这3种分型方法有很好的关联性。O3群菌株很可能来源于O1群菌株。在副溶血性弧菌所引起食源性疾病暴发流行时,有条件的实验室可以应用这3种方法对致病菌进行快速有效溯源。 李雪 孙婷婷 魏彤竹 王伟杰 刁文丽关键词:副溶血性弧菌 分子分型 血清分型 亲缘关系 2017—2019年辽宁省市售食品中食源性致病菌监测结果分析 被引量:6 2021年 目的了解2017—2019年辽宁省市售食品中食源性致病菌的污染及其分布情况。方法2017—2019年辽宁省共采集12类4694份样品,按照《国家食品污染物和有害因素风险监测工作手册》对食源性致病菌进行检测分析。结果4694份样品中各种致病菌的总检出率差异较大,其中蜡样芽胞杆菌的检出率最高为12.78%。不同种类食品中米面制品、婴幼儿奶粉及辅食和水产及其制品中致病菌的检出率较高,分别为15.02%、14.81%、12.46%。不同包装中散装样品的致病菌检出率最高为9.55%,不同抽样场所中网店的致病菌检出率最高为14.06%。结论辽宁省市售食品中存在不同程度的食源性致病菌污染,其中米面制品、婴幼儿奶粉及辅食和水产及其制品受食源性致病菌的污染状况比较严重,监管部门应加大对其监督和管理的力度。 王伟杰 孙婷婷 李雪 魏彤竹 刘海霞 耿英芝 于淼 张铭琰 张眉眉关键词:食品安全 食源性致病菌 辽宁省婴幼儿食品源阪崎克罗诺杆菌生物膜与耐药性分析 2024年 目的探究婴幼儿食品中的阪崎克罗诺杆菌在形成生物膜后对其耐药性表达的影响,并对该致病菌的耐药性监测提供建议。方法本研究对2018—2021年辽宁省婴幼儿配方食品中分离出的58株阪崎克罗诺杆菌进行了15种抗生素的药物敏感性、生物膜成膜力检测和不同生物态下耐药性分析。结果辽宁省婴幼儿食品中检出的阪崎克罗诺杆菌对头孢唑啉、头孢噻肟、复方磺胺、氯霉素、头孢西丁、萘啶酸、氨苄西林/舒巴坦存在不同程度耐药性,88%的受试菌株对多黏菌素的耐药性达到中介,并且存在多重耐药菌;婴幼儿奶粉源阪崎克罗诺杆菌的耐药性均高于婴幼儿谷物辅食源阪崎克罗诺杆菌;生物膜成膜率100%,中等黏附力菌株居多占61.02%;基于生物膜态对应受试菌的药敏试验结果分析,头孢唑啉、头孢噻肟、亚胺培南、四环素和氨苄西林的药物抗性均增加,复方磺胺的药物抗性消失。结论辽宁省市售婴幼儿食品中阪崎克罗诺杆菌不仅对多种抗生素具有单一耐药性,且存在多重耐药株;不同生物态的阪崎克罗诺杆菌均对头孢类抗生素药物抗性较高,同时生物膜态可以改变其药物抗性,应持续对婴幼儿食品源中不同生物态的阪崎克罗诺杆菌进行耐药监测。 魏彤竹 孙婷婷 王伟杰 李雪关键词:耐药性 抗生素 生物膜 食源性致病菌 辽宁省耐药沙门菌PFGE分子分型研究 被引量:5 2014年 目的对辽宁省2011-2012年间鸡肉中检测出的沙门菌进行耐药谱分析和PFGE分子分型分析,为沙门菌的监测、暴发预警提供依据。方法 Phoenix-100全自动微生物鉴定/药敏系统做耐药性分析;PFGE分型依据国际实验室分子分型监测网络PulseNet中沙门菌PFGE分型标准化方案进行。结果鸡肉中38株沙门菌均多重耐药,PFGE指纹图谱与血清具有一定的相关性,相同血清型的菌株聚类后,都能分到同一群。结论同一地区的沙门菌具有很高的相似带型,为以实验室为基础的食源性疾病暴发的发现及疫情控制提供依据。 张旭 李雪 魏彤竹 刚宇晨关键词:沙门菌 脉冲场凝胶电泳 辽宁省2014-2016年副溶血性弧菌毒力基因及血清型、耐药性 被引量:14 2018年 目的研究辽宁省近三年副溶血性弧菌毒力基因携带、血清型分布及抗生素的耐药情况,为副溶血性弧菌疾病防治提供科学依据。方法运用多重荧光定量PCR对2014-2016年共计317株食品中和临床分离出的副溶血性弧菌进行毒力基因tdh、trh和tlh检测,同时进行血清分型,并用肉汤稀释法测定对15种抗生素的耐药性。结果 317株分离菌中均携带tlh基因,其中有50.5%的菌株携带tdh基因。167株临床分离株中158株携带tdh基因,检出率为94.6%。317株副溶血性弧菌中85株不能进行K分型,其他菌株共分为29个血清型,167株临床分离株中71.3%为血清型为O3:K6。150株食品分离株中8%为血清型O2:K28,6%为血清型O2:K3。317株副溶血性弧菌对头孢唑啉耐药率达36.9%。结论辽宁省副溶血性弧菌临床分离株多携带tdh毒力基因,食品分离株毒力基因tdh、trh携带率低。临床分离株中O3:K6血清型菌株均携带tdh基因,且更易产生耐药。辽宁省副溶血性弧菌食源性疾病菌株以携带tdh基因的O3:K6型菌株为主。食品分离株血清型分布比较分散,O2血清群为主要流行血清型。辽宁省地区副溶血性弧菌主要对β-内酰胺类和大环内酯类抗生素产生耐药性。 李雪 张眉眉 马景宏 张铭琰 刘海霞 耿英芝 魏彤竹 于淼 孙婷婷 李飞 王伟杰关键词:副溶血性弧菌 毒力基因 血清学分型 耐药 辽宁食源性沙门菌血清型、耐药谱及PFGE分型特征 被引量:12 2018年 目的分析辽宁食源性沙门菌血清型、耐药谱及脉冲场凝胶电泳(PFGE)型别,探讨辽宁沙门菌污染的同源性,为食源性疾病溯源和预警提供基础。方法对辽宁省2015年食品中、食源性疾病中分离的41株沙门菌进行血清学分型、耐药试验、PFGE分子分型,采用Bio Numerics version 6.6软件分析,比较同源性。结果 41株菌分为15个血清型,居前三位的是15株肠炎沙门菌、5株德尔卑沙门菌、5株姆班达卡沙门菌(辽宁省内少见血清型);对41株菌进行15种抗生素的耐药试验,对单一一种抗生素的耐药率为100.0%,其中红霉素97.6%,萘啶酸61.0%,氨苄西林53.7%;41株菌共分为18种PFGE带型,带型分布分散,只有两种优势,一种带型包含20株菌,有14株肠炎沙门菌,6株其他沙门菌,相似度为92.7%~100%;另一种包含5株菌,4株姆班达卡沙门菌,1株鼠伤寒沙门菌,相似度为96.6%~100.0%。结论辽宁省食源性沙门菌的血清型以肠炎沙门菌为主,生肉制品是其主要污染来源;血清型与PFGE图谱带型分布广泛,相同血清型沙门菌的PFGE带型聚集成簇、菌株具有高度同源性;相同PFGE型别的菌株耐药谱一致或相似;沙门菌的耐药情况较严重。 马景宏 张眉眉 马妮 耿英芝 魏彤竹 李雪 于淼 李飞 张铭琰关键词:沙门菌 血清学分型 耐药 脉冲场凝胶电泳 辽宁省食源性副溶血性弧菌PFGE分子分型及血清型、耐药谱 被引量:13 2017年 目的分析辽宁省副溶血性弧菌脉冲场凝胶电泳(PFGE)型别及血清型、耐药谱,探讨辽宁省副溶血性弧菌污染的同源性,为食源性疾病溯源和预警提供基础。方法对50株从辽宁省2015年食源性疾病和食品中分离的副溶血性弧菌进行PFGE分子分型、血清学分型、药物敏感试验,采用BioNumerics version 6.6软件进行分析,比较同源性。结果 50株副溶血性弧菌共分为19个血清型,食源性疾病分离株分为5个血清群,主要的血清型为O3群,其次为O1群;食品分离株分为9个血清群,主要的血清型为O3群,其次为O1和O4群。50株副溶血性弧菌对15种抗生素的耐药试验,对头孢唑啉耐药率最高达72%。50株副溶血性弧菌共分为4种PFGE优势带型,相似度为90.8%~100.0%。结论辽宁省食源性副溶血性弧的血清型以O3群和O1群为主,致病菌流行株血清型为O3:K6;食品中分离菌株血清型和PFGE带型非常分散,提示这些多为遗传不相关菌株。PFGE图谱可看出,绝大部分相同血清型菌株的PFGE带型相似度很高,O3与O1血清型菌株有高度同源性密切相关,耐药菌株间PFGE带型相似度很高,均具有高度同源性。相比2014年的耐药情况,对头孢唑啉耐药率显著增高。另外,少数菌株出现多重耐药,耐药情况不容乐观。 李雪 张眉眉 马景宏 耿英芝 魏彤竹 于淼 孙婷婷 李飞 王伟杰 张铭琰 刘海霞 韩佳敏关键词:副溶血性弧菌 脉冲场凝胶电泳 血清学分型 耐药 辽宁省溶藻弧菌REP-PCR和PFGE分子分型、耐药谱的研究 被引量:8 2018年 目的利用PFGE和REP-PCR两种分型方法对溶藻弧菌进行分子分型和亲缘关系的研究;并将两种分型方法进行对比,并结合对抗生素耐药试验结果对其关联性进行初步探讨。方法应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法对辽宁省2017年食品中分离的39株溶藻弧菌进行分型,应用BN(7.6版本)软件分析同源性。以基因外重复回文序列(REP)为引物,对40株溶藻弧菌DNA进行扩增,得到DNA指纹图谱,并利用SPSS 13.0统计软件对DNA扩增图谱进行聚类分析,同时将两种聚类分析结果进行比较,并用肉汤稀释法测定对15种抗生素的耐药性。结果 PFGE和REP-PCR两种方法的聚类分析结果均可分出两种优势带型A型和B型,且包含的菌株一致。PFGE分型方法在一些菌株中出现的DNA条带更多更复杂一些,分辨力指数(DI)为0.974,REP-PCR分型方法的DI为0.936。溶藻弧菌对头孢唑啉耐药率最高达57.5%,其次是氨苄西林(20.0%)和红霉素(12.5%),三重耐药菌比例达12.5%。结论 PFGE和REP-PCR两种方法均可以对溶藻弧菌进行分型,且均具有较好的分型能力,分辨力和再现性都很好,但PFGE分型方法的分辨力更优于REP-PCR分子分型。耐药菌株间带型具有高度同源性,优势带型菌株易耐药。综上所述,PFGE和REP-PCR两种分子分型方法对于评估溶藻弧菌流行及分布规律均是有用的,并且分型结果是一致的,都可以对菌株间亲缘关系进行有效溯源,因此在溶藻弧菌所致疾病爆发流行时,在普遍缺乏昂贵的PFGE专业设备和昂贵的配套BN软件以及专业操作人员的实验室,可以应用REP-PCR方法和SPSS统计软件代替PFGE方法和BN软件对菌株进行快速有效溯源。 李雪 张眉眉 张铭琰 刘海霞关键词:溶藻弧菌 分子分型 REP-PCR PFGE