路遥
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：石河子大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 加工番茄SlAGO4A基因过表达及干扰载体构建与遗传转化被引量：1
- 2017年
- [目的]构建加工番茄SlAGO4A基因过表达及干扰载体,获得相应的转基因番茄植株。[方法]利用PCR技术从番茄c DNA文库中获得2 727 bp的加工番茄SlAGO4A基因。构建SlAGO4A基因的过量表达载体35S:SlAGO4A。以获得的SlAGO4A基因为模板,获得了SlAGO4A PIWI的220 bp的片段,构建SlAGO4A基因的RNAi干扰载体RNAi-PIWI,通过农杆菌介导的遗传转化,获得SlAGO4A过表达及干扰转基因番茄阳性植株,并利用实时荧光定量PCR(QRTPCR)技术检测过表达番茄阳性植株中的SlAGO4A基因的表达水平。[结果]经PCR鉴定获得5株独立转化的里格87-5干扰转基因加工番茄株系,获得6株独立转化的里格87-5过量表达转基因加工番茄株系,其6株SlAGO4A基因过表达的阳性植株的表达量均有不同程度的上调。[结论]为阐明SlAGO4A基因在加工番茄抗病毒信号通路中的功能奠定基础。
- 许鹏程路遥周东刘丽刘丽娜郑银英
- 关键词：加工番茄PCR
- 新疆加工番茄马铃薯Y病毒株系鉴定被引量：1
- 2016年
- 马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)是世界范围内对茄科属植物造成影响的重要病毒,为了解PVY对新疆加工番茄的危害,本文采集205份加工番茄样品进行血清学检测,结果 PVY^O、PVY^(O\N\C)、PVY^N检出率分别为20%、18.05%和0%,且PVY不同株系总检出率达24.9%。根据血清学检测结果,在苋色藜(Chenopodium amaranticolor)上进行单斑分离获得2个PVY分离物S1-10、S2-12,其基因组序列分析结果显示,S1-10分离物是PVY^O与PVY^N的重组体,属于PVY^(N∶O)株系,S2-12属于PVY^O株系。本研究表明新疆加工番茄上的PVY主要为PVY^(N∶O)和PVYO株系。
- 梁学超路遥刘丽娜郑银英向本春
- 关键词：血清学基因组
- 加工番茄PVY^(N:O) HC-Pro、STV RdRp酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活验证
- 2018年
- 马铃薯Y病毒(potato virus Y,简称PVY)和南方番茄病毒(southern tomato virus,简称STV)是加工番茄上非常普遍的病毒,以从加工番茄c DNA文库中筛选与病毒功能蛋白互作的基因为目标,构建PVY HC-Pro、STV RdRp Cyto Trap酵母双杂交诱饵载体,为抗病基因的筛选工作奠定基础。通过PCR技术,扩增PVY HC-Pro、STV RdRp片段分别克隆到诱饵载体p Sos,用酶切、测序结果正确的2个诱饵载体重组质粒转化酵母感受态cdc25H,进行自激活检测及毒性验证。将不同组合的酵母转化液涂布于SD/Glu(-UL)培养基(SD/Glu指含有葡萄糖的SD培养基,-UL指缺失尿嘧啶、亮氨酸2种氨基酸)平板上,于25℃培养4 d后,挑取3个单菌落分别划线于2个SD/Glu(-UL)和2个SD/Gal(-UL)培养基上,并分别置于25、37℃继续培养5 d。结果表明,在25℃培养条件下,SD/Glu(-UL)和SD/Gal(-UL)培养基上酵母菌生长正常;在37℃培养条件下,SD/Glu(-UL)培养基上无酵母菌的生长,SD/Gal(-UL)培养基上阳性组合酵母生长正常,阴性组合酵母均不生长。构建的p Sos-HC-Pro、p Sos-RdRp诱饵载体没有转录自激活活性和毒害作用,可用于Cyto Trap酵母双杂交系统。
- 路遥周东郑银英
- 关键词：加工番茄PVY酵母双杂交自激活诱饵载体
