张磊
- 作品数：6 被引量：18H指数：2
- 供职机构：湖南农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：湖南省科技计划项目家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪瘟E^rns蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及其抗体间接ELISA方法的建立
- 2020年
- 将人工合成的CSFV E^rns基因插入到pFastBac1获得重组转移载体pFastBac1-E^rns,在DH10Bac大肠杆菌中转座后提取杆粒并转染Sf9细胞,用获得的重组杆状病毒感染High Five细胞表达E^rns蛋白并通过亲和层析进行纯化。以纯化后E^rns蛋白作为诊断抗原,通过摸索抗原包被量和抗体血清稀释倍数等条件,建立检测CSFV E^rns抗体的间接ELISA方法(E^rns-iELISA)。结果显示,E^rns蛋白得到有效表达,相对分子质量约为35000;确定的ELISA抗原包被量为120ng/孔、血清稀释100倍,酶标二抗稀释6000倍,封闭条件为37℃30min,TMB底物作用15min,临界值为0.329。用E^rns-iELISA方法检测92份阴性血清,其特异性为88.04%,与猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸系统综合征病毒和猪流行性腹泻病毒阳性血清均无交叉反应;对171份阳性血清的敏感性为92.98%;批内和批间重复的平均变异系数为7.4%和10.74%。结果表明,本试验所建立的E^rns-iELISA方法重复性好,具有较高的检测特异性,且对CSFV疫苗毒和国内流行毒株都具有较高的检测敏感性,具有潜在的开发和应用价值。
- 任杰葛猛李润成郑金凌同黎满香李岱霞张磊余兴龙
- 关键词：猪瘟病毒杆状病毒表达系统抗体间接ELISA
- 湖南健康猪源与流行性腹泻病猪肠球菌毒力基因检测分析被引量：10
- 2017年
- 为研究猪流行性腹泻(PED)病猪群中肠球菌及其携带毒力基因的变化情况,本研究采用PCR方法对115株猪源肠球菌检测其11种毒力基因的分布情况及进行了其溶血试验和明胶液化试验。结果,共检测到9种毒力基因:EF3314、efaA、gelE、ace、asal、cylA、esp、Hyl和EF0591,其中asa373和AS未检测到。72株健康猪源分离菌中毒力基因检出率分别为12.5%、9.7%、5.6%、2.8%、13.9%、4.2%、8.3%、15.3%和1.4%。43株PED病猪分离菌毒力基因阳性率分别为20.9%、25.6%、2.3%、18.6%、51.2%、11.6%、20.9%、0和7.0%。溶血试验结果显示115株肠球菌中溶血的占88.7%,其中α-溶血占40%,β-溶血占48.7%,共有8株检测到溶血素A基因(clyA),检出率为6.9%。11株粪肠球菌全部表现溶血,其中健康猪源分离株为α-溶血,PEDV感染猪分离株为β-溶血。明胶液化试验表明115株肠球菌中只有两株能液化明胶,均为粪肠球菌,一株为健康猪源分离株,一株为PEDV感染猪分离株,而且从这两株菌中均检测到了明胶酶E(gelE)基因。表明PED猪源肠球菌毒力基因检出率明显高于健康猪源肠球菌(p<0.05)。明胶液化试验和溶血试验结果表明,粪肠球菌的这两种表型与基因型为肠球菌种中表达一致性是最高的,其携带毒力基因为肠球菌中所占比例最高。通过两种不同来源肠球菌毒力基因的比较,为PED的分析治疗与防控提供依据。
- 朱娜夏宇飞张磊方超柴强强周成捷王送林黎满香
- 关键词：肠球菌屎肠球菌毒力基因溶血试验
- 一例猪传染性胸膜肺炎的实验室检测与分析
- 2018年
- 湖南衡阳一猪场母猪出现急性死亡,临床症状仅见咳嗽、气喘及呈腹式呼吸。病例剖检可见肺出血、水肿,肝、脾肿大,气管、支气管中充满泡沫状血性粘液及渗出物,喉头鼻腔充满血性液体。经细菌分离与鉴定确诊为急性型传染性胸膜肺炎,随后对分离细菌进行了药敏试验分析。通过采取药物治疗、加强饲养管理及消毒等措施,病情得到有效控制。
- 张磊黎满香
- 关键词：猪传染性胸膜肺炎DNA药敏试验
- 益生菌发酵复方中草药对妊娠后期奶牛血清生化、抗氧化和生殖激素指标的影响
- 2024年
- 本研究旨在探究复方中草药经益生菌发酵后的效果以及益生菌发酵复方中草药对妊娠后期奶牛血清生化、抗氧化和生殖激素指标的影响。采用枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌制备发酵复方中草药。选取处于妊娠后期体况良好的荷斯坦奶牛24头,随机分为3个组,每组8个重复,每个重复1头牛。各组分别在基础饲粮中添加0(对照组)、1%和2%的发酵复方中草药。预试期15 d,正试期45 d。结果表明:1)与未发酵复方中草药相比,发酵复方中草药的粗蛋白质和粗纤维含量极显著升高(P<0.01)。2)与未发酵复方中草药相比,发酵复方中草药的总多糖、总黄酮和总皂苷含量极显著升高(P<0.01),总多酚含量极显著降低(P<0.01)。3)与对照组相比,饲粮中添加1%发酵复方中草药显著提高奶牛血清高密度脂蛋白胆固醇含量(P<0.05),显著降低血清谷草转氨酶活性(P<0.05)。4)与对照组相比,饲粮中添加1%发酵复方中草药显著提高奶牛血清谷胱甘肽过氧化物酶活性(P<0.05);饲粮中添加1%和2%发酵复方中草药显著或极显著提高奶牛血清总抗氧化能力(P<0.05或P<0.01),显著降低血清丙二醛含量(P<0.05)。5)与对照组相比,饲粮中添加1%和2%发酵复方中草药奶牛显著提高奶牛血清孕酮含量(P<0.05),显著或极显著降低血清雌二醇含量(P<0.05或P<0.01);饲粮中添加2%发酵复方中草药显著提高奶牛血清促黄体生成素含量(P<0.05)。综上所述,复方中草药经益生菌发酵后具有更高的生物活性。饲粮中添加益生菌发酵复方中草药能调控妊娠后期奶牛的生殖激素含量,增强奶牛的抗氧化能力。
- 马晓婉肖红波杨晓肖丽林梁孙圳谢欣欣李少旭张磊刘业君唐烨王水莲
- 关键词：益生菌中草药奶牛抗氧化指标
- 猪源荚膜血清F型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定、毒力基因检测与致病性研究被引量：8
- 2017年
- 为调查多杀性巴氏杆菌(P.multocida)在湖南猪群中的流行情况,本实验室于2015年6月~2016年3月在湖南大型屠宰场采集猪肺脏222份和猪扁桃体180份临床样品,采用血琼脂培养和PCR方法进行P.multocida的分离鉴定,得到4株F型P.multocida。对分离的4株F型P.multocida进行毒力基因检测以及小鼠的致病性研究,结果显示4株菌均含有ptf A、pfhA、fim A、sodA、sodC、ompA、ompH、oma87、plpB、exbB、exbD、tonB、hgbB、Fur、nan H、hsf-1和hsf-2毒力基因,但tadD、toxA、hgbA、nanB、pm HAS、tbpA毒力基因均为阴性;4株菌致病性试验结果显示,感染小鼠的剂量分别为4 cfu/只、5 cfu/只、11 cfu/只和17 cfu/只时可导致小鼠在60 h内全部死亡,表明这4株菌对小鼠有强致病力。病理切片显示,感染小鼠有明显的肺泡充血、脾淋巴细胞凋亡、肾小管和肾小球萎缩等病理变化。本实验首次在湖南地区分离到猪源荚膜血清F型P.multocida,并进行了较为详细的生物学特性研究,为国内P.multocida的流行情况和生猪多杀性巴氏杆菌病的防控补充了参考资料。
- 方超李润成魏榕王锐胡玉立黎满香张磊余兴龙
- 关键词：多杀性巴氏杆菌毒力基因
- 一株副猪嗜血杆菌的鉴定及药敏试验
- 2017年
- 湖南浏阳地区某猪场发生保育猪急性死亡,临床症状为咳嗽、消瘦和被毛粗乱,剖检可见多发性浆膜炎和关节炎等病变。取3份死亡猪的肺脏做细菌鉴定及药敏试验,根据临床症状、病理变化、显微镜镜检和16S rDNA结果,确定分离到副猪嗜血杆菌。药敏试验结果表明,该菌对丁胺卡那、大观霉素、头孢类药物相对敏感。
- 张磊柴强强李润成黎满香
- 关键词：副猪嗜血杆菌病原鉴定RDNA药敏试验
