方超
- 作品数：11 被引量：31H指数：4
- 供职机构：湖南农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：湖南省科技计划项目家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪源荚膜血清F型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定、毒力基因检测与致病性研究
- 本实验室采集屠宰猪肺脏222份,屠宰猪扁桃体180份,采用血琼脂和PCR方法进行多杀性巴氏杆菌(P.multocida)的分离鉴定,结果分离到4株F型P.multocida。对分离的4株F型P.multocida进行毒力...
- 方超李润成魏榕王锐胡玉立黎满香余兴龙
- 关键词：多杀性巴氏杆菌毒力基因
- 规模猪场肥猪伪狂犬病毒感染的血清学诊断与分析
- 2016年
- 文章对湖南衡阳某规模猪场肥猪表现疑似伪狂犬病毒感染的病例进行了血清学诊断。采集了不同临床表现猪群的血清,进行伪狂犬病毒野毒（gE）抗体检测。结果显示：4份出现发病症状1~2天的猪血清gE抗体检测为阴性,8份出现发病症状4~6天的猪血清中5份gE抗体检测为阳性,3份为可疑。另有4份发病并康复的猪血清和4份同群未发病的猪血清gE抗体检测均为阳性。通过采取针对伪狂犬病毒的紧急措施将该猪场疫情控制在发病流行初期,减少了猪场损失,为血清学方法在伪狂犬病毒疫情诊断中的运用提供了参考数据。
- 王锐方超柴强强李润成
- 关键词：肥猪伪狂犬病毒猪伪狂犬病血清学诊断
- 猪繁殖与呼吸综合征未免疫猪群的抗体消长规律研究被引量：2
- 2015年
- 为研究未免疫猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗的猪场的PRRSV抗体消长规律,试验采集A、B、C三个规模化猪场共147头猪的血液样本,分离血清,用IDEXX试剂盒检测血清中的PRRSV抗体。检测结果表明A、B、C三个猪场的猪群具有相似的PRRSV抗体消长规律,即哺乳仔猪体内存在PRRSV抗体,随着猪周龄的增长,PRRSV抗体水平降低,PRRSV抗体水平下降到最低后,随着PRRSV的感染,机体产生免疫应答,PRRSV抗体水平快速上升。可为猪场制定合理的PRRSV疫苗免疫程序提供指导。
- 郑金黄婕峰朱娜方超葛猛黎满香
- 关键词：PRRSV阳性率
- 湖南健康猪源与流行性腹泻病猪肠球菌毒力基因检测分析被引量：10
- 2017年
- 为研究猪流行性腹泻(PED)病猪群中肠球菌及其携带毒力基因的变化情况,本研究采用PCR方法对115株猪源肠球菌检测其11种毒力基因的分布情况及进行了其溶血试验和明胶液化试验。结果,共检测到9种毒力基因:EF3314、efaA、gelE、ace、asal、cylA、esp、Hyl和EF0591,其中asa373和AS未检测到。72株健康猪源分离菌中毒力基因检出率分别为12.5%、9.7%、5.6%、2.8%、13.9%、4.2%、8.3%、15.3%和1.4%。43株PED病猪分离菌毒力基因阳性率分别为20.9%、25.6%、2.3%、18.6%、51.2%、11.6%、20.9%、0和7.0%。溶血试验结果显示115株肠球菌中溶血的占88.7%,其中α-溶血占40%,β-溶血占48.7%,共有8株检测到溶血素A基因(clyA),检出率为6.9%。11株粪肠球菌全部表现溶血,其中健康猪源分离株为α-溶血,PEDV感染猪分离株为β-溶血。明胶液化试验表明115株肠球菌中只有两株能液化明胶,均为粪肠球菌,一株为健康猪源分离株,一株为PEDV感染猪分离株,而且从这两株菌中均检测到了明胶酶E(gelE)基因。表明PED猪源肠球菌毒力基因检出率明显高于健康猪源肠球菌(p<0.05)。明胶液化试验和溶血试验结果表明,粪肠球菌的这两种表型与基因型为肠球菌种中表达一致性是最高的,其携带毒力基因为肠球菌中所占比例最高。通过两种不同来源肠球菌毒力基因的比较,为PED的分析治疗与防控提供依据。
- 朱娜夏宇飞张磊方超柴强强周成捷王送林黎满香
- 关键词：肠球菌屎肠球菌毒力基因溶血试验
- 猪源荚膜血清F型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定、毒力基因检测与致病性研究
- 本实验室采集屠宰猪肺脏222份,屠宰猪扁桃体180份,采用血琼脂和PCR方法进行多杀性巴氏杆菌(P.multocida)的分离鉴定,结果分离到4株F型P.multocida。对分离的4株F型P.multocida进行毒力...
- 方超李润成魏榕王锐胡玉立黎满香余兴龙
- 关键词：多杀性巴氏杆菌毒力基因
- 文献传递
- 抗红斑丹毒丝菌的rSpaA蛋白猪源单链抗体库构建及单链抗体淘选
- 2016年
- 从免疫过rSpaA的猪的脾淋巴细胞中提取总RNA,采用RT–PCR技术反转录合成cDNA。设计兼并引物扩增抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因片段,采用重叠延伸PCR方法,将VH和VL通过Linker连接成重组单链抗体(以下简写为sc Fv)的基因片段。将sc Fv的基因连接至噬菌粒载体p Comb3Xss,将重组载体电转化至宿主菌XL1-Blue,并经辅助噬菌体M13KO7拯救,获得猪源噬菌体单链抗体库,库容约为2.5×106。以rSpaA为靶抗原,经免疫亲和筛选,获得8株特异性较好的阳性克隆。本研究结果可为制备抗红斑丹毒丝菌的重组sc Fv提供新途径,并为猪丹毒的免疫检测和综合防制提供材料基础。
- 王锐葛猛陈一苇方超柴强强李润成余兴龙
- 关键词：单链抗体红斑丹毒丝菌噬菌体展示技术
- 一株猪源A型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定和药敏试验被引量：1
- 2016年
- 从湖南湘潭地区送检的1头急性病死猪的肺脏中分离到了1株革兰氏阴性短杆菌,通过PCR鉴定和分型,确定该菌为荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌。药敏试验表明该菌对恩诺沙星、氟苯尼考、头孢拉定、头孢唑林、头孢曲松、环丙沙星和头孢噻肟共7种药高度敏感;对多西环素、青霉素、红霉素、阿莫西林和氧氟沙星共5种药中度敏感;对丁胺卡那、链霉素、林可霉素、卡那霉素和庆大霉素共5种药低度敏感。
- 方超朱娜庞培张嘉麟黎满香
- 关键词：多杀性巴氏杆菌药敏试验
- 猪源荚膜血清F型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定、毒力基因检测与致病性研究被引量：7
- 2017年
- 为调查多杀性巴氏杆菌(P.multocida)在湖南猪群中的流行情况,本实验室于2015年6月~2016年3月在湖南大型屠宰场采集猪肺脏222份和猪扁桃体180份临床样品,采用血琼脂培养和PCR方法进行P.multocida的分离鉴定,得到4株F型P.multocida。对分离的4株F型P.multocida进行毒力基因检测以及小鼠的致病性研究,结果显示4株菌均含有ptf A、pfhA、fim A、sodA、sodC、ompA、ompH、oma87、plpB、exbB、exbD、tonB、hgbB、Fur、nan H、hsf-1和hsf-2毒力基因,但tadD、toxA、hgbA、nanB、pm HAS、tbpA毒力基因均为阴性;4株菌致病性试验结果显示,感染小鼠的剂量分别为4 cfu/只、5 cfu/只、11 cfu/只和17 cfu/只时可导致小鼠在60 h内全部死亡,表明这4株菌对小鼠有强致病力。病理切片显示,感染小鼠有明显的肺泡充血、脾淋巴细胞凋亡、肾小管和肾小球萎缩等病理变化。本实验首次在湖南地区分离到猪源荚膜血清F型P.multocida,并进行了较为详细的生物学特性研究,为国内P.multocida的流行情况和生猪多杀性巴氏杆菌病的防控补充了参考资料。
- 方超李润成魏榕王锐胡玉立黎满香张磊余兴龙
- 关键词：多杀性巴氏杆菌毒力基因
- 湖南地区猪源多杀性巴氏杆菌部分保护性抗原基因分子流行病学调查被引量：3
- 2017年
- 为探索多杀性巴氏杆菌(Pm)的保护性抗原基因在A与D血清型之间分布规律及其保守性,本研究通过对湖南地区分离的92株(A型:50株;D型:42株)猪源Pm的ompA、ompH、omp87、plpE、plpP、ptfA、fhab2、vacJ和tbpA等9种保护性抗原基因进行PCR检测。结果显示:在以上9种基因中ompA、ompH、omp87以及ptfA的检出率最高,均为100%;vacJ和plpP基因的检出率分别为91%和66%。而fhab2和plpE基因仅在A型菌株中检出,检出率分别为42%和40%。选取部分菌株,对其4种检出率为100%的基因进行测序显示,omp87的同源性介于99.1%~100%;ptfA的同源性介于97.2%~100%;ompA的同源性介于91.2%~100%;ompH的同源性介于84.6%~100%。此外,经抗原表位预测,omp A和ompH基因在部分抗原表位区域存在明显差异。本研究发现omp87和ptfA两个基因存在于本研究分离的92株猪源Pm,并且相当保守,该结果为巴氏杆菌基因工程亚单位疫苗开发过程中保护性抗原的选择提供了依据。
- 马攀方超李润成胡玉立赵墩余兴龙
- 关键词：多杀性巴氏杆菌保护性抗原分子流行病学亚单位疫苗
- 湖南省猪源肠球菌的分离鉴定被引量：5
- 2016年
- 为了从猪粪便中分离出肠球菌,采用6.5%NaCl pH 9.6 TSB和麦康凯血平板两种方法分别对80个健康猪源样品和53个流行性腹泻猪源样品进行检测。结果显示,共分离出115株肠球菌,其中健康猪源肠球菌72株,包括粪肠球菌2株,屎肠球菌30株,其他肠球菌40株,检测率为90%;从流行性腹泻中共分离到43株肠球菌,其中粪肠球菌9株,屎肠球菌29株,其他肠球菌5株,检出率为81.1%,前者方法中其他肠球菌的检出率比较高,后者方法屎肠球菌的检出率比较高。两种方法各有侧重,为分离不同菌种的肠球菌提供依据。
- 朱娜方超周成捷柴强强王送林黎满香
- 关键词：肠球菌粪肠球菌屎肠球菌
