黄天鹏
- 作品数：13 被引量：31H指数：4
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 内蒙古锡林郭勒盟地区优势蜱种及其基因多样性分析被引量：4
- 2019年
- 为了解内蒙古锡林郭勒盟地区的优势蜱种及其存在的基因多态性,应用传统形态学和分子生物学相结合的方法,对该地区14个主要牧区采样点进行蜱虫种型的鉴定和基因多态性分析。通过传统形态学鉴定方法,对蜱虫样品进行显微镜观察以初步确定蜱属。采用聚合酶链式反应(PCR)对蜱虫的16S rRNA基因序列进行扩增,测序后对蜱种进行分子鉴定和基因序列同源性分析,确定蜱种多样性。应用Mega 6.06软件构建系统进化树,与GenBank数据库中已知蜱虫的16S rRNA进行聚类分析,以确定蜱进化的规律。结果显示14个不同地区的蜱虫均属于草原革蜱,为锡林郭勒盟地区的优势蜱种之一,但不同地区的蜱虫之间存在明显的基因多态性。
- 黄芳黄天鹏贺海燕吴咪朝木丽格王云冲格日勒图
- 关键词：RRNA草原革蜱基因多样性
- 内蒙古额济纳旗亚洲璃眼蜱的鉴定及其基因多态性分析被引量：4
- 2020年
- 为了确定内蒙古额济纳旗边境地区蜱虫种类以及其保守基因16SrRNA是否具有基因多态性。本试验选取该地区3个代表性采样点,收集双峰驼的体表寄生蜱虫383只。通过传统形态学方法,保守基因16S rRNA和线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因PCR序列扩增、测序、系统发育进化树分析进行蜱虫种类鉴定。通过Genetyx-Version 6软件对每个采样点随机选取的10个样本进行16S rRNA序列基因多态性分析。结果显示:本试验所采集的蜱虫形态均符合亚洲璃眼蜱的典型形态特征;经16S rRNA基因和COⅠ基因的序列绘制出的系统发育进化树结果显示该蜱与我国新疆地区的亚洲璃眼蜱在同一个进化分支上,并能够很好的聚类;在蜱虫的16S rRNA基因多态性的结果中发现,只有3个序列与其他的27个序列表现出不同程度的基因多态性,说明亚洲璃眼蜱中存在基因多态性的变化。这为以后蜱虫的鉴定以及探究基因多态性方面提供参考。
- 王云冲黄天鹏格日勒图
- 关键词：形态学鉴定基因多态性
- 口蹄疫诊断技术的研究进展被引量：4
- 2016年
- 口蹄疫的准确诊断是有效控制疫情蔓延的重要环节。随着生物学技术的迅速发展,口蹄疫的诊断已经不再局限于传统方法。目前,常用的口蹄疫诊断方法包括血清学检测、分子生物学诊断和病原学诊断,其中以血清学检测的应用最为广泛。阐述了3种诊断方法的原理及优缺点,并展望了口蹄疫诊断技术未来的发展方向。
- 特尼格尔黄天鹏
- 关键词：口蹄疫血清学检测分子生物学诊断病原学诊断
- PEDV S基因的B细胞表位嵌入型乳杆菌S-层蛋白的原核表达及其鉴定被引量：1
- 2019年
- 利用生物软件和在线数据库中筛选出猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S基因的B细胞表位,通过overlap PCR方法将其嵌入到嗜酸性乳杆菌的S-层蛋白基因中,获得融合基因SLP-EpitopeS。将该融合基因导入到原核表达载体pGEX-4T-3中,成功构建了原核表达载体pGEX-SLP-EpitopeS。经过双酶切和PCR方法以及基因测序方法验证融合表达载体pGEX-SLP-EpitopeS的正确性。应用SDS-PAGE和Western blot方法鉴定表达产物,其中SDS-PAGE结果显示:融合蛋白质的大小约为77000,与理论值相符;Western blot结果显示:融合蛋白SLP-EpitopeS被GST血清所识别,而B细胞表位分别被表位特异的鼠源单克隆抗体(McAb)和表位合成多肽所识别。本试验为进一步嵌入型蛋白SLP-EpitopeS的免疫原性研究奠定了基础。
- 朝木丽格侯殿文韩佳黄天鹏吴咪贺海燕格日勒图
- 关键词：猪流行性腹泻病毒S基因B细胞表位原核表达
- 一种蜱源性耐盐耐碱菌株Oceanobacillus oncorhynchi IMH的首次分离与鉴定被引量：2
- 2019年
- 【目的】本试验以源自呼伦贝尔地区的优势蜱种草原革蜱为材料,从其体内分离得到可疑细菌,应用常规方法和分子生物学方法对该菌株进行分离及鉴定,并对其致病性进行探索,为内蒙古地区蜱虫生物多样性和环境相关性研究奠定了基础。【方法】首先,通过形态学观察,生理生化试验、药物敏感试验以及16S r RNA序列分析,并构建系统发育树,确定该菌株的分类地位;其次对昆明小鼠进行致病性实验。【结果】该菌株革兰氏染色呈G+杆菌,在高盐培养基(5%Na Cl)和p H为9的碱性培养基中生长良好;该菌对不同糖类发酵能力非常有限,只利用部分糖类(如西蒙氏枸橼酸盐试验结果为阳性)产气,但是不产酸;对个别化学药(如环丙沙星)和多数抗生素(如复方新诺明、庆大霉素、红霉素及头孢噻肟等)显示为敏感,而对抗生素卡那霉素和阿莫西林表现为耐药性;经16S r RNA基因序列和系统发育树分析发现,该菌株与GenBank数据库中已注册的多株Oceanobacillus oncorhynchi的同源性为99%以上;该菌在血平板溶血试验中呈现出不完全α溶血,而感染昆明小鼠,观察7 d无明显致病性。【结论】本试验首次分离鉴定了一株蜱源性O.oncorhynchi,并对上述菌株重新命名为O.oncorhynchi IMH,并在Gen Bank中进行注册(LC213016.1),更加丰富了Gen Bank中相关数据。
- 朝木丽格额尔敦宝力高黄天鹏吴咪贺海燕金凤格日勒图
- 关键词：草原革蜱RRNA
- 多型FMDV VP1表位嵌入型载体pMG-SLPMultiVP1的构建及其表达产物鉴定被引量：1
- 2016年
- 构建出表达载体pMG-SLPMultiVP1,并对其进行双酶切鉴定及PCR鉴定。将阳性重组质粒转入到发酵乳杆菌中进行表达,并对表达产物进行SDS-PAGE、Western blot和IFAT鉴定。多型FMDV VP1表位嵌入的SLPMultiVP1融合基因成功克隆入穿梭质粒pMG36e中,其表达产物大小约为35ku,部分表达产物位于发酵乳杆菌表面。成功构建了一个乳杆菌嵌入型表达载体pMG-SLPMultiVP1,为以发酵乳杆菌为活菌载体的表位疫苗研究奠定了基础。
- 陆继爽黄天鹏吴咪贺海燕格日勒图
- 关键词：S-层蛋白发酵乳杆菌表位疫苗
- 2019年广东省梅州市首起人间布鲁氏菌病暴发疫情的调查被引量：4
- 2021年
- 目的分析广东省梅州市五华县暴发的一起人间布鲁氏菌病的流行及溯源情况,为布病防治提供科学依据。方法采用描述性流行病学方法对广东省梅州市五华县发生的布鲁氏菌病疫情进行分析;应用分子生物学方法对血液及羊奶样品中的布鲁氏菌进行检测。根据AMOS-PCR和血清凝集试验等方法对分离菌株进行种型鉴定,并采用MLST技术对分离菌株进行种间遗传关系分析。结果在血液及羊奶样品中均检测到布鲁氏菌Omp22和16S rRNA基因。全血样品中共分离到14株布鲁氏菌,且均为羊种3型布鲁氏菌。经MLST技术聚类分析后,14株羊种布氏菌分离株与11株各生物种型标准株间的相似值介于82.0%~100.0%。结论广东省梅州市五华县暴发的人间布鲁氏菌病疫情,其引起该病的主要原因是生饮鲜羊奶所致,这为广东地区布鲁氏菌病的防控提供了有利的数据。
- 孙长云黄天鹏韦入丰张薇邓爱萍彭晓放曾灵风张少忠黄元祥武婕
- 关键词：布鲁氏菌MLST
- 内蒙古呼伦贝尔地区优势蜱种的鉴定及其基因多态性分析被引量：3
- 2017年
- 为掌握内蒙古呼伦贝尔地区硬蜱的优势蜱种类,对该地区15个调查点的蜱进行考查和采集蜱虫1 349只样本,在形态学鉴定方法初步进行分类的基础上,设计1对简并引物,从蜱虫基因组DNA样品中,采用PCR扩增得到蜱虫16SrRNA基因序列,测序后进行基因序列同源性分析。用Mega 6.06软件绘出系统进化树,与GenBank数据库中已知蜱虫16SrRNA进行聚类。结果显示:15个考察点蜱虫种类均为草原革蜱,属于呼伦贝尔地区常见优势蜱虫之一。但是,不同地区的蜱虫之间也存在基因序列的差异性。
- 黄天鹏张金宝陆继爽吴咪贺海燕格日勒图
- 关键词：草原革蜱形态学鉴定RRNA同源性分析
- 多型FMDV VP1表位融合蛋白SLP-MultiVP1的纯化及鉴定被引量：4
- 2015年
- 口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)主要感染偶蹄兽引起的烈性传染病。本研究对已构建的含有VP1表位肽基因的原核表达载体pGEX-SLP-MultiVP1进行IPTG诱导表达,经SDS-PAGE试验在菌体裂解物中证明了80 000融合蛋白的存在。通过Pierce?GST Spin Purification Kit亲和层析和切胶相结合的方法,成功纯化出融合蛋白GST-SLP-MultiVP1,并用Prescission Protease将该融合蛋白中的GST标签切掉,获得大小为54 000的目的蛋白SLP-MultiVP1,并用Western Blot试验证明了该蛋白与牛A、O、AsiaⅠ型疫苗株阳性血清均有特异性的结合。本试验进一步为口蹄疫VP1表位肽的免疫原性研究奠定了基础。
- 特尼格尔赵慧小琴陆继爽黄天鹏格日勒图
- 关键词：口蹄疫融合蛋白纯化
- 从1例新型冠状病毒肺炎病例中同时分离到新型冠状病毒和单纯疱疹病毒I型
- 2021年
- 目的了解1例新型冠状病毒肺炎(Coronavirus Disease 2019,COVID-19)确诊病例的病原学构成。方法将1例COVID-19确诊病例的口咽拭子、血清、鼻咽拭子的标本接种到Vero-E6细胞管进行病毒分离,每日观察细胞病变(cytopathic effect,CPE)情况,待CPE达75%以上收获细胞分离物,反复冻融3次后离心取上清液,应用透射电镜观察获取病毒电镜图片,同时提取病毒核酸,采用二代测序技术进行全基因组序列测序。通过序列进化分析,对获得的病毒株进行鉴定分型。结果本研究从1例COVID-19患者的鼻咽拭子中分离到1株新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV),同时在该患者的1份口咽拭子中分离到1株单纯疱疹病毒I型(herpes simplex virus type 1,HSV-1)。结论COVID-19病例存在2019-nCoV和HSV-1合并感染的可能性。
- 张薇彭晓放张欢刘哲李柏生黄天鹏孙长云邹丽容梁丽君郭前方武婕李晖郑焕英
- 关键词：新型冠状病毒单纯疱疹病毒I型病毒分离
