赵慧
- 作品数：6 被引量：10H指数：2
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学化学工程更多>>
- 牛羊布鲁菌病(brucellosis)的诊断方法被引量：5
- 2013年
- 布鲁菌病是一类由各型布鲁菌感染而引起的重要的人畜共患病之一。被感染的动物最常见的临床表现为流产、胎盘炎、附睾炎、睾丸炎等。人感染布鲁菌病后,多呈慢性经过,可损害人体多种器官。虽然病原学鉴定是一种常规有效的诊断布鲁菌病的方法之一,但由于其对操作人员安全以及实验室级别的要求非常严格,加之从患病动物体内分离病原体的过程既耗时又具有危险性,在布鲁菌病临床诊断实践中推广应用困难。布鲁菌病血清学诊断方法显示出较高的特异性和敏感性,但难以鉴别布鲁菌各型野毒株以及疫苗株感染。鉴于上述问题,深入开发和研制更高特异性、敏感性和稳定性的新型布鲁菌病诊断方法在兽医临床实践中势在必行。主要从细菌学、血清学和分子生物学等方面对布鲁菌病诊断方法研究情况进行了综述,以期为相关研究提供参考。
- 温德宝特尼格尔赵慧格日勒图
- 关键词：布鲁菌病血清学方法分子生物学方法
- 嗜酸性乳杆菌MG株S层蛋白的高级结构预测分析及原核表达
- 2013年
- 以嗜酸性乳杆菌MG株slp基因(表达S层蛋白的基因)为材料,应用Genetyx软件推导出其正确的开放阅读框(ORF),并用CPHmodels,Swiss-Model和Swiss-PdbViewer生物软件预测SLP蛋白质的高级结构;此外,构建slp基因的原核表达载体pGEX-slp,经IPTG诱导后,成功表达出重组S层蛋白(S-layer protein,SLP),并进行SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果表明,使用3种不同的软件预测SLP蛋白质的高级结构,预测结果具有很高的相似性,其中α螺旋占3.33%,线性结构占45%,无规则卷曲占51.67%,平均亲水值为-0.262,亲水氨基酸比例为59.1%;表达载体pGEX-slp在E.coli BL21中经IPTG诱导成功表达出重组SLP蛋白,其GST融合蛋白的大小约为70ku。本研究结果为进一步以SLP为材料的生物制品的制备和应用开发奠定了基础。
- 王敏小琴那日苏王彩凤特尼格尔赵慧格日勒图
- 关键词：原核表达
- 2种不同方法纯化乳酸杆菌重组S-层融合蛋白的比较试验
- 2014年
- 将重组菌E.coli BL21(含重组质粒pGEX-SLP)经IPTG诱导获得重组融合蛋白GST-SLP,分别用非特异性的氯化锂沉淀方法和特异性的Pierce GST Spin Purification Kit纯化方法,将该融合蛋白进行纯化,纯化结果采用SDS-PAGE方法进行鉴定。结果显示,2种方法均能够获得大小约为71 ku的目的融合蛋白,但氯化锂沉淀方法纯化效果不及Pierce GST Spin Purification Kit方法。该研究结果为进一步研究乳酸杆菌S-层蛋白生物学特性提供了参考。
- 小琴特尼格尔赵慧格日勒图
- 关键词：重组菌E.COLIBL21融合蛋白纯化
- 短小乳杆菌重组S-层蛋白质的纯化及其体外黏附性的初步鉴定
- 2013年
- 以本实验室已构建的pMD19T-slp为模板,应用PCR方法亚克隆slp基因,将其定点插入到原核表达载体pGEX-4T-3中,成功构建原核表达载体pGEX-slp,经IPTG诱导获得重组融合蛋白GST-SLP并用LiCl的方法进行纯化。应用SDS-PAGE和Western blot方法对表达产物进行鉴定,应用ELISA方法鉴定重组融合蛋白的体外黏附特性。在大肠埃希菌裂解样品中,SDS-PAGE和Western blot结果均证明分子质量大小约为71ku的重组融合蛋白GST-SLP的存在;ELISA结果提示,该重组融合蛋白在体外能够有效地黏附在乳酸乳球菌NZ9000表面。本试验为S-层蛋白质生物学特性的进一步研究奠定了基础。
- 王彩凤敖敦格日勒小琴特尼格尔赵慧格日勒图
- 关键词：纯化体外
- 各型FMDV VP1基因表位嵌入型蛋白SLP-MultiVP1对免疫不同小鼠血清IgG亚型的影响被引量：1
- 2017年
- 利用通过Swiss-Model在线软件分析所得的乳杆菌S-层蛋白高级结构3D模拟图,应用Swiss-Pbd Viewer软件对嵌入型蛋白SLP-MultiVP1中的3型口蹄疫病毒(FMDV)不同表位位点进行标注,并用嵌入型蛋白SLP-MultiVP1和重组蛋白SLP分别免疫6周龄的BALB/c和昆明小鼠,分离3次免疫后的血清,用Mouse IgG1Ready-SET-Go和Mouse IgG2aReady-SET-Go ELISA试剂盒检测血清中IgG抗体亚型IgG1和IgG2a。通过SPSS统计学分析发现:嵌入型蛋白SLP-MultiVP1组IgG1和IgG2a水平显著高于SLP组(P<0.05),其中嵌入型蛋白SLP-MultiVP1免疫组的IgG2a显著高于IgG1(P<0.05),但是BALB/c和昆明小鼠之间无显著性差异(P>0.05)。该结果提示,嵌入型蛋白SLP-MultiVP1可能倾向于激发Th1类细胞介导的免疫应答,而且无个体差异。
- 赵慧特尼格尔陆继爽黄天鹏小琴格日勒图
- 关键词：抗体亚型表位疫苗
- 多型FMDV VP1表位融合蛋白SLP-MultiVP1的纯化及鉴定被引量：4
- 2015年
- 口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)主要感染偶蹄兽引起的烈性传染病。本研究对已构建的含有VP1表位肽基因的原核表达载体pGEX-SLP-MultiVP1进行IPTG诱导表达,经SDS-PAGE试验在菌体裂解物中证明了80 000融合蛋白的存在。通过Pierce?GST Spin Purification Kit亲和层析和切胶相结合的方法,成功纯化出融合蛋白GST-SLP-MultiVP1,并用Prescission Protease将该融合蛋白中的GST标签切掉,获得大小为54 000的目的蛋白SLP-MultiVP1,并用Western Blot试验证明了该蛋白与牛A、O、AsiaⅠ型疫苗株阳性血清均有特异性的结合。本试验进一步为口蹄疫VP1表位肽的免疫原性研究奠定了基础。
- 特尼格尔赵慧小琴陆继爽黄天鹏格日勒图
- 关键词：口蹄疫融合蛋白纯化
