张廷龙
- 作品数:4 被引量:8H指数:2
- 供职机构:青岛农业大学更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 饲养层细胞的接种密度对分离培养胚胎干细胞的影响被引量:4
- 2009年
- 建立有效的昆明白小鼠胎儿成纤维细胞(Mouse embryonic fibroblast,MEF)饲养层培养体系,用于分离和培养小鼠胚胎干细胞(Embryonic stem cell,ES细胞)的研究。(1)取怀孕14.5 d昆明白小鼠胎儿分离成纤维细胞,利用体外培养体系分离传代,选取生长旺盛并且已纯化的P3代的MEF,经丝裂霉素处理后,用细胞计数板计算活细胞数,分别按1×104、1×106、1×108/mL密度接种,制备饲养层,观察不同密度饲养层的生长状况。(2)取怀孕4 d的昆明白小鼠囊胚,接种在不同密度饲养层上。观察不同密度饲养层上囊胚、ICM及ES细胞的克隆生长情况。结果显示:囊胚在密度为1×106/mL的饲养层上,贴壁率和ICM孵出率分别为(97.0±3.606)%和(96.3±2.887)%,显著高于其他2组;密度为1×106/mL饲养层上的ES细胞克隆形成率高于密度为1×104/mL(差异极显著,P<0.01)和1×108/mL饲养层上的ES细胞克隆形成率(差异显著,P<0.05);而1×104/mL饲养层和1×108/mL饲养层上的ES细胞克隆形成率差异不显著(P>0.05)。结果表明:以1×106/mL密度接种的MEF作为饲养层,最适合用于分离培养昆明白小鼠ES细胞,有利于囊胚的发育,ICM的增殖,促进ES细胞的增殖,并起到抑制其分化的作用。
- 赵晶董雅娟柏学进靳亚平张廷龙封纪武
- 关键词:昆明白小鼠胎儿成纤维细胞饲养层胚胎干细胞
- 骨髓间充质干细胞体外诱导分化及在细胞工程和基因工程中的应用被引量:2
- 2008年
- 学术背景:骨髓间充质干细胞是一类具有多向分化潜能的成体干细胞,其体外诱导分化的不同组织对于骨及软骨组织工程、心血管疾病、神经系统疾病、免疫系统疾病等的治疗具有广阔的应用前景。目的:总结骨髓间充质干细胞体外诱导分化的研究进展。检索策略:由该论文的研究人员应用计算机检索Pubmed数据库1998-01/2008-01期间的相关文献,检索词为"Mesenchymal stem cell,differtation,neuron,osteoblast,Chondrocyte,adipocyte,sarcoblast,endotheliocyte,Tissuerepair,genetherapy"并限定文章语言种类为English。同时检索万方数据库2002-01/2008-01期间的相关文献,检索词为"骨髓间充质干细胞,诱导分化,神经细胞,基因治疗"。共检索到52篇文献,对资料进行初审,纳入标准:①与骨髓间充质干细胞体外诱导分化密切相关。②同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章。排除标准:重复性研究。27篇文献符合纳入标准,排除的25篇为内容陈旧或重复文献。文献评价:文献的来源主要是骨髓间充质干细胞体外诱导分化方面的随机对照实验。5篇涉及体外诱导分化为神经细胞的研究,4篇涉及体外诱导分化为成骨组织的研究,1篇涉及体外诱导分化为软骨组织的研究,2篇涉及体外诱导分化为脂肪细胞的研究,2篇涉及体外诱导分化为成肌细胞研究,3篇涉及体外诱导分化为内皮细胞的研究,3篇涉及体外诱导分化为肝细胞的研究,7篇涉及其在医学上的应用。资料综合:骨髓间充质干细胞具有自我更新、增殖和多向分化潜能,在不同生物环境和细胞因子的作用下可分化为不同类型的细胞。研究表明,骨髓间充质干细胞在体外适宜的诱导条件下可以分化为神经、成骨、软骨、脂肪、心肌、肝脏等多种细胞,而且骨髓间充质干细胞在组织修复和基因治疗方面的应用已取得较大进展,在人类医学上具有广阔的应用前景。�
- 龚宜超董雅娟柏学进封纪武岳福杰张廷龙沈召莲
- 关键词:骨髓间充质干细胞诱导分化基因工程
- 昆明小鼠ES细胞的分离培养及鉴定被引量:2
- 2008年
- [目的]摸索一种适合昆明小鼠ES细胞分离培养的方法,以提高昆明小鼠ES细胞的建系率。[方法]分别采用5种方法分离ICM和ES细胞集落,摸索了以BMSCs作为饲养层时,丝裂酶素处理的合适时间。[结果]连续消化法要明显好于其他4种方法。MMC处理BMSCs1、1.5、2h时效果较好,3个时间点无显著差异(P〉0.05)。mMEF作为饲养层与BMSCs作为饲养层时获得5代ES细胞相比差异不显著(P〉0.05)。[结论]连续消化法分离ES细胞效率较高,饲养层采用MMC处理1~2h的BMSCs饲养层或常规mMEF饲养层对昆白小鼠ES细胞无明显影响。
- 张廷龙董雅娟柏学进赵晶岳福杰史文升龚宜超
- 关键词:昆明小鼠BMSCSICM
- 昆明小鼠胚胎干细胞分离培养及鉴定试验
- 目的:
对胚胎干细胞(ESC)分离培养的研究,旨在摸索适合昆明小鼠ESC分离培养的方法,以提高昆明小鼠ESC的建系率。
方法:
本试验分为两部分:饲养层的制备以及KMmESC的分离培养。饲养层包括MEF...
- 张廷龙
- 关键词:胚胎干细胞饲养层细胞