龚宜超
- 作品数：15 被引量：20H指数：3
- 供职机构：青岛农业大学更多>>
- 发文基金：山东省科技攻关计划重大科技专项国家高技术研究发展计划山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生经济管理更多>>
- 5-Aza诱导BMSC分化为心肌细胞的分子生物学检测被引量：4
- 2009年
- 【目的】利用分子生物学方法探讨5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-Aza)体外诱导牛骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSC)向心肌细胞的分化,为转基因良种肉牛培育提供种子细胞,提高转基因效率。【方法】利用获取的纯化稳定的P4、P8、P12代BMSC各经5、10、15μmol·L-1的5-Aza进行体外诱导分化,统计并计算心肌细胞的转化率,对诱导出现的心肌样细胞进行形态学观察和RT-PCR鉴定。【结果】诱导后细胞大多呈现梭形,排列方向渐趋一致,有肌管样结构形成。相同代数的BMSC在10μmol·L-1的5-Aza作用下诱导效果最佳;在相同浓度的5-Aza作用下,BMSC向心肌细胞的转化率随着传代次数的增加逐渐降低。RT-PCR显示诱导分化后的细胞明显表达心肌细胞的4种特异性基因,分别是α-心脏肌动蛋白(378bp)、结蛋白(601bp)、心脏肌钙蛋白T(331bp)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)(273bp)。【结论】5-Aza体外可诱导牛骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞;利用P4代BMSC在10μmol·L-1的5-Aza的作用,诱导效果明显。
- 龚宜超董雅娟柏学进封纪武李兴芳刘昌菊
- 关键词：骨髓间充质干细胞5-氮杂胞苷心肌细胞
- 体外诱导牛骨髓间充质干细胞向乳腺样上皮细胞分化的初步研究被引量：5
- 2012年
- 为培育转基因肉牛提供种子细胞及进一步丰富牛骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)的多向分化潜能,本试验利用细胞免疫荧光染色方法和分子生物学方法初步探讨在表皮生长因子、胰岛素、催产素和孕酮等条件下,体外诱导牛BMSC向乳腺样上皮细胞分化的可能性。利用不同浓度的诱导液对纯化稳定的P4、P8和P12代牛BM-SC进行体外诱导,并对诱导后的细胞进行细胞免疫荧光观察和RT-PCR鉴定。结果显示,诱导后部分BMSC细胞呈多角形,而不再呈明显的梭形和纺锤形,经细胞角蛋白18免疫荧光染色后出现明显的荧光。P4代牛BMSC在诱导液Ⅱ的诱导作用下分化效果显著。RT-PCR结果显示,诱导分化后细胞角蛋白19基因、β-酪蛋白基因及αs1-酪蛋白基因在细胞中表达。因此,在体外,多因子联合诱导可使牛BMSC初步分化为乳腺样上皮细胞并且在诱导液Ⅱ的联合诱导下分化作用最明显。
- 朱孟芝董雅娟龚宜超王文明刘玮柏学进
- 关键词：骨髓间充质干细胞表皮生长因子催乳素孕酮
- 骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞及临床应用的研究进展
- 本文简述了骨髓间充质干细胞(MSCs)在体内外诱导分化为心肌细胞的研究进展及在心肌修复中的应用。着重介绍了大动物模型牛MSCs的研究进展。同时对bMSCs在心肌修复中的应用及发展前景进行了综述。
- 龚宜超董雅娟柏学进封纪武肖超柱
- 关键词：心肌修复心肌细胞诱导分化动物模型
- 文献传递
- 山羊卵母细胞体外成熟和受精过程中细胞核迁移的研究进展
- 山羊卵母细胞体外成熟和体外受精过程中细胞核发生了明显的迁移。本文就该过程中细胞核迁移及其细胞学、分子机理做了简要综述.
- 王雪红龚宜超张铁军孔繁明
- 关键词：山羊繁殖体外成熟体外受精卵母细胞分子机理
- 文献传递
- 荷斯坦牛骨髓间充质干细胞的分离培养和体外诱导分化的研究被引量：1
- 2009年
- 本试验采用密度梯度离心法来分离纯化和体外培养荷斯坦牛骨髓间充质干细胞,并在体外分别诱导其分化为神经样细胞和脂肪样细胞。结果表明,采用密度梯度离心法可获得纯化度较高的荷斯坦牛骨髓间充质干细胞,并且在一定的诱导条件下能够分化为脂肪样和神经样细胞,为利用骨髓间充质干细胞作为核供体进行核移植的研究和动物遗传资源的保存研究奠定理论基础。
- 龚宜超董雅娟柏学进李兴芳刘昌菊封纪武
- 关键词：诱导分化
- 牛MSCs生物学特性及体外诱导分化为心肌细胞的研究
- [目的]建立牛骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells，MSCs)分离培养体系，研究牛MSCs的生物学特性，并根据其生物学特性及体外诱导分化潜能对其进行鉴定;探讨牛MSCs体外定向诱导分化为...
- 龚宜超
- 关键词：生物学特性心肌细胞诱导分化
- 文献传递
- 转基因动物乳腺生物反应器原理及其研究概况
- 乳腺反应器是目前生产外源蛋白最有效的生物反应器，也是目前国际上惟一证明可以达到商业化生产水平的生物反应器。本文综述了乳腺生物反应器的发展背景、原理，国内外研究现状及进展、应用前景极其研究存在的问题。
- 刘昌菊董雅娟柏学进龚宜超李兴芳
- 关键词：生物反应器转基因动物外源蛋白
- 文献传递
- 骨髓间充质干细胞体外诱导分化及在细胞工程和基因工程中的应用被引量：2
- 2008年
- 学术背景:骨髓间充质干细胞是一类具有多向分化潜能的成体干细胞,其体外诱导分化的不同组织对于骨及软骨组织工程、心血管疾病、神经系统疾病、免疫系统疾病等的治疗具有广阔的应用前景。目的:总结骨髓间充质干细胞体外诱导分化的研究进展。检索策略:由该论文的研究人员应用计算机检索Pubmed数据库1998-01/2008-01期间的相关文献,检索词为"Mesenchymal stem cell,differtation,neuron,osteoblast,Chondrocyte,adipocyte,sarcoblast,endotheliocyte,Tissuerepair,genetherapy"并限定文章语言种类为English。同时检索万方数据库2002-01/2008-01期间的相关文献,检索词为"骨髓间充质干细胞,诱导分化,神经细胞,基因治疗"。共检索到52篇文献,对资料进行初审,纳入标准:①与骨髓间充质干细胞体外诱导分化密切相关。②同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章。排除标准:重复性研究。27篇文献符合纳入标准,排除的25篇为内容陈旧或重复文献。文献评价:文献的来源主要是骨髓间充质干细胞体外诱导分化方面的随机对照实验。5篇涉及体外诱导分化为神经细胞的研究,4篇涉及体外诱导分化为成骨组织的研究,1篇涉及体外诱导分化为软骨组织的研究,2篇涉及体外诱导分化为脂肪细胞的研究,2篇涉及体外诱导分化为成肌细胞研究,3篇涉及体外诱导分化为内皮细胞的研究,3篇涉及体外诱导分化为肝细胞的研究,7篇涉及其在医学上的应用。资料综合:骨髓间充质干细胞具有自我更新、增殖和多向分化潜能,在不同生物环境和细胞因子的作用下可分化为不同类型的细胞。研究表明,骨髓间充质干细胞在体外适宜的诱导条件下可以分化为神经、成骨、软骨、脂肪、心肌、肝脏等多种细胞,而且骨髓间充质干细胞在组织修复和基因治疗方面的应用已取得较大进展,在人类医学上具有广阔的应用前景。�
- 龚宜超董雅娟柏学进封纪武岳福杰张廷龙沈召莲
- 关键词：骨髓间充质干细胞诱导分化基因工程
- 黑牛繁育工程及其产业开发战略
- 黑牛繁育工程是山东省自主创新重大科技专项资助的良种牛培育项目，本文通过对国内外肉牛产业及优良品种的综合评述之后，主要介绍了本工程技术研究中心的工作思路及其产业开发战略，通过种质资源储备、体细胞克隆、分子标记、转基因育种、...
- 董雅娟龚宜超刘昌菊王文明刘伟张守宝柏学进封纪武肖超柱村上正夫林兴星董懿为高天宇李兴芳
- 关键词：自主创新产业结构区域经济
- 文献传递
- 昆明小鼠ES细胞的分离培养及鉴定被引量：2
- 2008年
- [目的]摸索一种适合昆明小鼠ES细胞分离培养的方法,以提高昆明小鼠ES细胞的建系率。[方法]分别采用5种方法分离ICM和ES细胞集落,摸索了以BMSCs作为饲养层时,丝裂酶素处理的合适时间。[结果]连续消化法要明显好于其他4种方法。MMC处理BMSCs1、1.5、2h时效果较好,3个时间点无显著差异（P〉0.05）。mMEF作为饲养层与BMSCs作为饲养层时获得5代ES细胞相比差异不显著（P〉0.05）。[结论]连续消化法分离ES细胞效率较高,饲养层采用MMC处理1～2h的BMSCs饲养层或常规mMEF饲养层对昆白小鼠ES细胞无明显影响。
- 张廷龙董雅娟柏学进赵晶岳福杰史文升龚宜超
- 关键词：昆明小鼠BMSCSICM
