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曹岩菁

作品数：1 被引量：1H指数：1
供职机构：浙江中医药大学更多>>
发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金浙江省科技计划项目更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇原核表达
  • 1篇原核表达载体
  • 1篇肿瘤
  • 1篇肿瘤学
  • 1篇疗法
  • 1篇免疫
  • 1篇免疫疗法
  • 1篇基因
  • 1篇基因表达
  • 1篇B7-1基因

机构

  • 1篇上海交通大学...
  • 1篇浙江中医药大...
  • 1篇浙江大学医学...

作者

  • 1篇彭淑牖
  • 1篇刘颖斌
  • 1篇马孝明
  • 1篇孔颖
  • 1篇李江涛
  • 1篇王许安
  • 1篇王建伟
  • 1篇曹岩菁

传媒

  • 1篇中华普通外科...

年份

  • 1篇2009
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
人B7-1基因与GPI信号肽序列融和基因的原核表达载体的构建及表达被引量：1
2009年
目的构建GP1锚定蛋白基因与B7—1分子融合的原核高效表达载体（GPI—B7—1），观察融合蛋白的抗肿瘤效应。方法分别从新鲜胎盘和ConA刺激的外周血单核细胞中克隆人胎盘碱性磷酸酶（hPLAP-1）C末端信号肽序列（GPI）和CD80（B7—1）基因。利用PCR技术将GPI和B7—1胞外编码区基因进行融合，并将融合基因亚克隆入原核表达载体（pET-30a）中。重组载体pET-30a—GPI—B7—1转化表达菌株E．coli BL，纯化GPI—B7—1融合蛋白，SDS—PAGE、Western blot分析鉴定其免疫活性。结果PCR和RT—PCR产物经电泳鉴定，在100～250bp处可见到133bp的GPI目的条带。在750bp左右可见到792bp的B7-1胞外编码区基因目的条带。重组载体pET-30a—GPI-B7—1经PCR检测获得900bp左右的目的片段，经EcoRI、Sall双酶切鉴定，得到5000bp和900bp左右大小2个片段，实现了融合蛋白（GPI—B7—1）在大肠杆菌中的高效表达，在非变性条件下纯化该融合蛋白，SDS—PAGE分析显示，表达蛋白的分子量约为38kDa，Western blotting证实38kDa处出现一条特异的显色带，该融合蛋白即为目的蛋白。结论GPI—B7—1表达载体可在大肠杆菌中高效表达获取融合蛋白，为肿瘤免疫治疗奠定了基础。
王建伟刘颖斌曹岩菁王许安李江涛孔颖马孝明彭淑牖
关键词：基因表达免疫疗法肿瘤学
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