杨旭中
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 一种高效人源性穿膜肽的生物活性研究
- 2013年
- 目的研究人类细胞色素C中Cyt c77-101对HeLa细胞的穿膜活性。方法人工合成编码Cyt c77-101的寡核苷酸链,构建重组质粒pET28a-EGFP-Cyt c77-101,并转化大肠杆菌BL21进行原核表达,进一步通过Ni2+-NTA亲和层析纯化带有绿色荧光蛋白EGFP的Cyt c77-101融合蛋白,并经荧光显微镜和激光共聚焦检测Cyt c77-101的穿膜活性。结果测序分析表明重组质粒pET28a-EGFP-Cyt c77-101构建成功,且在大肠杆菌BL21中成功表达。融合蛋白EGFP-Cyt c77-101与HeLa细胞保温10 h后,可在细胞内观察到强绿色荧光。结论人源性穿膜肽Cyt c77-101具有较强的穿膜活性。
- 庄炜东阮世龙杨旭中王佳玮王富军赵健
- 关键词：生物活性
- 一种人源性穿膜肽融合蛋白中连接肽的引入及其在HeLa细胞中的穿膜活性
- 2013年
- p14ARF(alternate reading frame)是一种人肿瘤抑制因子,其N端1-22位氨基酸可以携带药物蛋白进入细胞发挥药理作用,记为ARF。在示踪蛋白EGFP和ARF间引入了二肽(linker 2)、柔性七肽(linker 7F)和刚性七肽(linker 7S),研究其对融合蛋白EGFP-ARF穿膜活性的影响。实验结果显示引入七肽(linker 7)的融合蛋白,其荧光强度高于linker 2的融合蛋白。激光共聚焦观察表明,引入linker 7F的融合蛋白比引入linker 2的融合蛋白的穿膜效率高5倍左右,比引入linker 7S的融合蛋白高3.8倍左右。结果表明连接肽的形式对融合蛋白的结构和功能都有显著影响,为ARF作为药物运输载体的研究提供了依据。
- 李堰忠杨旭中吕强王富军赵健
- 关键词：连接肽ARF融合蛋白穿膜肽
