赵健
- 作品数：96 被引量：166H指数：6
- 供职机构：教育部更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生理学环境科学与工程更多>>
- 黄杆菌肝素酶I基因的克隆与表达
- 2008年
- 目的克隆并表达黄杆菌肝素酶I(HepI)基因。方法通过PCR从黄杆菌基因组DNA中扩增黄杆菌HepI基因,验证后插入到表达质粒pET-22b中构建表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)进行蛋白质表达,并用Azure A法测定酶活性。结果PCR扩增得到序列正确的HepI基因,并将该基因成功插入到pET-22b表达载体中。重组质粒转入E.coli BL21(DE3)后表达的蛋白质经SDS-PAGE分析,与目的蛋白质的相对分子质量基本一致,其活性约为50 U/LA600。结论克隆并成功表达了黄杆菌HepI基因。
- 傅文彬熊可强阚梦元赵健李素霞姬胜利袁勤生
- 关键词：克隆基因表达酶活性
- 白树毒素融合蛋白的筛选及其抗肿瘤作用和凋亡途径研究被引量：2
- 2018年
- 通过白树毒素(Gelonin)与多种穿膜肽(Cell-Penetrating Peptide,CPP)融合,获得一种抗肿瘤活性最高的Gelonin-HBP重组蛋白并研究其抑制肿瘤细胞增长的分子机制。以大肠杆菌BL21(DE3)重组表达及NI-NTA亲和纯化4种CPP(R9、TAT、HBD和HBP)与Gelonin融合的重组蛋白,通过超螺旋切割和体外翻译抑制实验检测其生物活性;激光共聚焦显微镜观察Gelonin重组蛋白穿膜效率、以MTT法检测其对肿瘤细胞的作用、并用流式细胞术及Western blot法观察其细胞凋亡的分子机制。结果显示,获得了保留Gelonin原有生物活性的4种Gelonin重组蛋白,连接CPP的Gelonin均能促进Gelonin的穿膜及抑杀肿瘤细胞效应,其中Gelonin-HBP活性最强,对于He La、B16、MCF-7和Hep G2四种肿瘤细胞比单独的Gelonin活性分别提升16.4倍、9.6倍、14.0倍和24.6倍;免疫印迹分析表明Gelonin-HBP诱导了肿瘤细胞Caspas 3、Caspas 8及Caspas 9的活性、Bax表达量显著增加,而Bcl-2的表达量显著降低。CPP促进了Gelonin对肿瘤细胞的抑杀和促凋亡作用,其中来源于人肝素结合表皮生长因子样生长因子的HBP连接Gelonin的抗肿瘤作用最强,其诱导肿瘤细胞凋亡的机制与线粒体和死亡受体介导的凋亡信号通路有关。
- 翟逸舟卢美雅赵健王富军
- 关键词：穿膜肽抗肿瘤细胞凋亡
- 重组人SOD2/3杂合酶原核表达及纯化方法的研究
- 目的：获取活性高的重组人SOD2/3杂合酶(以下简称rh SOD2/3)，摸索表达过程中的不同的条件，得到最高活性的粗酶液并纯化rh SOD2/3。方法：利用含有pET-SOD2/3的工程菌诱导表达rh SOD2/3杂合...
- 周大海范立强赵健程安阳
- 关键词：蛋白表达
- EGFP-Arg7融合蛋白表达及在HeLa细胞中的转导活性
- 2010年
- 目的构建pET-28a-EGFP-Arg7重组子,观察表达的融合蛋白EGFP-Arg7在细胞内的转导活性。方法构建EGFP-Arg7(阴性对照为EGFP)序列,与pET-28a连接后,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,并经Ni2+-NTA纯化。纯化产物作用于HeLa细胞后用荧光显微镜观察其转导活性。结果重组pET-28a-EGFP-Arg7经酶切鉴定和序列分析,证明构建正确。转化E.coli BL21(DE3)后,重组蛋白获得可溶性表达。纯化后的融合蛋白纯度达90%以上。重组蛋白EGFP-Arg7作用于HeLa细胞后用荧光显微镜可观察到强绿色荧光。结论 Arg7具有很好的转导活性,能携带与其连接的蛋白质穿过HeLa细胞膜。
- 肖伟华迪汪雅雯单含文吕稼锋赵健
- 关键词：蛋白转导域HELA细胞
- 基于CiteSpace的稀土元素应用研究现状与发展趋势分析被引量：4
- 2023年
- 21世纪以来,全球对自然资源,尤其是不可再生资源的需求与日俱增。稀土元素是一种十分重要的不可再生战略资源,特别的价电子排布让其拥有普通元素无法逾越的优势,使其几乎应用于国民经济的各个行业,尤其是在冶金、石油化工和新材料制备等领域的影响与日俱增。从20世纪90年代起,我国对稀土资源的不断开采,以及境外新矿床的发现导致了我国稀土资源在世界中的占比越来越低,在一定程度上给我国稀土相关产业带来了严峻挑战,因此亟需深入了解稀土元素应用情况。以CNKI数据库为依据,在2022年6月12日使用高级检索方式,检索关键词稀土应用及稀土元素应用,经过筛选、去重后获取了2010—2022年上半年与稀土元素应用研究相关论文499篇,通过CiteSpace6.1.R1软件从各年发文量、核心发文作者、核心发文机构、各年关键词爆发及关键词聚类五个方面对该领域的研究现状和发展趋势进行分析。通过研究结果发现,稀土元素在储氢材料、发光材料、永磁材料、絮凝材料等领域的应用较热门,并且展望了稀土元素的未来科研方向与研究前景。
- 刘璇刘璇鄢永庚赵健张术俊陈卓
- 关键词：稀土元素CITESPACE储氢材料发光材料永磁材料
- 纳米载药微囊的研究进展被引量：6
- 2008年
- 对载药纳米微囊的研究进展进行了综述,着重介绍了关于囊材的选用、制备技术、表面修饰情况以及生物学评价等方面的内容。并对未来的发展状况进行了展望,随着囊材可生物降解聚合物的发展,新设备的涌现以及纳米微囊的表面修饰方法、工艺过程、释放评价方法以及药物对机体的作用等的深入研究,都将把纳米载药微囊的发展推向更多新的领域。
- 赵健盛燕单晓茜章晓兰袁媛刘昌胜
- 关键词：纳米微囊生物学评价
- 1E级智能温度变送器的抗震试验研究
- 本文首先介绍了1E级温度变送器整体的硬件设计、软件设计。然后对1E级温度变送器进行抗震试验,并具体阐述了抗震试验的评估方法及试验步骤。最后,抗震鉴定试验表明,此温度变送器在试验中及试验后结构完整并运行功能完好,设计符合核...
- 赵健孙自强陆妹
- 关键词：温度仪表核安全级抗震试验
- 文献传递
- 黏质沙雷菌ECU1010脂肪酶新基因lipB的克隆和表达被引量：2
- 2011年
- 目的克隆黏质沙雷菌ECU1010脂肪酶基因lipB于大肠杆菌中表达后研究其酶学性质。方法 PCR克隆脂肪酶基因,与质粒pET-28a（＋）连接后转化至大肠杆菌BL21（DE3）。硫酸铵沉淀法纯化表达产物,研究酶的稳定性等酶学性质。结果成功克隆了S.marcescens ECU1010中脂肪酶基因lipB（GenBank：HM440338）,在E.coli中高效表达。LipB最适反应温度40℃,最适pH 8.5。该酶能在pH 5-7条件下保持稳定,Ca2＋有促进酶活性的作用。LipB对不同有机溶剂的耐受性与黏质沙雷菌脂肪酶LipA有明显差异。结论 lipB基因克隆丰富了脂肪酶基因资源,分析LipB的酶学性质表明,此酶在食品工业和手性药物的拆分等领域有广阔的应用前景。
- 吴娇娇李素霞赵健范立强许建和
- 关键词：黏质沙雷菌脂肪酶克隆
- 一种提高甲烷与二氧化碳干重整催化剂性能的预处理方法
- 本发明属于催化剂技术领域，公开了一种提高甲烷与二氧化碳干重整催化剂性能的预处理方法，该方法包括以下步骤：将甲烷与二氧化碳干重整催化剂装填入反应器中，将纯氮气通入反应器中，直至置换出反应器中全部空气；在温度为600～100...
- 马建新周伟赵健吕洪张海艳
- 凋亡素Apoptin的性质研究
- ＜正＞1 实验目的与意义凋亡素（Apoptin）是由鸡贫血病毒（CAV）的 VP3基因编码的非结构蛋白,由121个氨基酸组成,含有2个脯氨酸富含区和2个碱性区,其 C 端碱性区的11个氨基酸是核定位信号．Apoptin ...
- 傅文彬宋聿文赵健袁勤生
- 文献传递
