王富军
- 作品数：31 被引量：90H指数：6
- 供职机构：上海中医药大学中药研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学理学更多>>
- 一种用于肿瘤药物治疗的新型人源性穿膜肽的优化及其应用被引量：1
- 2018年
- 细胞穿膜肽（cell-penetrating peptide,CPP）作为一种体内大分子药物跨膜运输载体被广泛研究和应用。中期因子Midkine（MK）是人体的一种带有肝素结合域（heparin-binding domain,HBD）的生长因子。报道了MK中HBD的部分富含碱性氨基酸的基因序列（命名为MK-S0）与绿色荧光蛋白（EGFP）基因融合表达后,能将EGFP有效地转运入胞内,且其穿膜转运效率高于经典穿膜肽Tat。将MK-S0序列进一步突变优化改造得到的midkine-mutantΔ4（MK-Δ4）,其穿膜效率比天然序列来源的MK-S0提高16倍以上,且MK-Δ4的穿膜转运作用适用于多种肿瘤细胞。穿膜机制分析研究结果显示,MK-Δ4可与细胞表面硫酸乙酰肝素结合,随之以巨胞饮形式内吞入胞。采用MTT方法检测的细胞生长抑制试验结果显示,连接有MK-Δ4的苦瓜来源的核糖体失活蛋白MAP30比单独的MAP30对HeLa肿瘤细胞的药效可提升5.8倍,大大提高了这种药物蛋白抑杀肿瘤细胞的效果。由此表明,源于MK的这种经过突变改造的MK-Δ4,可作为一种新型高效的细胞穿膜肽,将药物蛋白有效运输到细胞内发挥抗肿瘤效应。
- 李思翟逸舟陆玉婷王富军王富军
- 关键词：抗肿瘤药物
- 哪种苦瓜最养生
- 2014年
- 这是“苦瓜专家”的园艺成果．这位专家以研究苦瓜为业，种植苦瓜为乐。
不同品种的苦瓜功效有啥不同？自己种选哪种好？怎么采收怎么吃？请听专家分解!
我曾经以自己的研究课题为基础为《大众医学》的读者写过《苦瓜降糖到底灵不灵》，这回编辑又要我写写自己怎么种苦瓜。
- 王富军
- 关键词：苦瓜养生同品种
- 苦瓜降糖到底灵不灵？
- 2009年
- 糖尿病患者对市场上琳琅满目的苦瓜产品一定不陌生。很多患者相信被称为“植物胰岛素”的苦瓜有神奇的降糖作用，在夏季更是把苦瓜当饭吃，然而，业内人士分析：高超上的大部分苦瓜降糖产品有夸大宣传的嫌疑。
- 王富军
- 关键词：降糖作用苦瓜植物胰岛素业内人士
- 莫匹罗星的药理作用及细菌耐药性
- 莫匹罗星自1985年上市以来在全世界得到了广泛应用,但随之也带来了不断上升的耐药性问题。本文就莫匹罗星的药理作用机理,不良反应,耐药性的种类,临床发生情况以及可以采取的应对措施进行了总结。
- 王富军
- 关键词：莫匹罗星耐药MRSA
- 文献传递
- 苦瓜降糖多肽研究进展被引量：6
- 2008年
- 苦瓜降糖多肽是从苦瓜中分离出的一大类具有显著降血糖活性的蛋白多肽类化合物,具有种类多、含量较高、降糖作用缓慢持久、毒副作用小等优点。就近年来国内外学者对苦瓜降糖多肽的分离纯化、药理作用和临床应用的研究进展做一综述。
- 刘红雨付中平周吉燕王富军
- 关键词：苦瓜植物胰岛素降血糖作用
- 雷公藤红素与凋亡蛋白突变体通过强化Nur77诱发凋亡通路发挥协同抗肿瘤作用被引量：1
- 2020年
- 雷公藤红素(Celastrol)和凋亡蛋白(Apoptin)均可通过Nur77信号通路介导肿瘤细胞凋亡,Celastrol与含有商陆皂苷甲(EsA)的Apoptin突变体tApoptin(简称为tApoptinE)联用是否具有高效的抗肿瘤活性及其协同作用的分子机制值得研究。通过MTT法检测药物联用后对肿瘤细胞增殖的抑制活性,流式细胞术和免疫印迹(Western blot)技术分析药物联用的分子机制。结果显示,Celastrol浓度≥300 nmol/L时可以显著提高tApoptinE对肝癌细胞SMMC-7721生长的抑制活性;上述联用条件下两种药物联合作用指数(Combined index)均小于1,其中,Celastrol(600 nmol/L)与tApoptinE联用的协同效果最显著;流式凋亡分析揭示联合用药强化了对细胞的凋亡效应;Western blot分析表明两种药物协同作用于共同的Nur77通路,促进更多的Nur77被磷酸化,磷酸化的Nur77显著调控Caspase和Bcl-2家族蛋白的表达,强化了细胞凋亡途径。上述两种药物联合使用后通过强化Nur77诱发的细胞凋亡通路,进一步诱导肿瘤细胞凋亡,从而发挥协同抗肿瘤作用。
- 尹晓梦曹雪玮王富军王富军赵健
- 关键词：雷公藤红素凋亡蛋白
- 苦瓜中胰蛋白酶抑制剂活性的测定方法研究被引量：7
- 2007年
- 目的用一种改进的测定方法，测定从苦瓜籽中提取分离的胰蛋白酶抑制剂的抑制活性。方法通过稳定性、重复性和专属性实验，分析和考察此测定方法。结果苦瓜籽中的胰蛋白酶抑制剂的相对分子质量1×10^3，比活1153U／mg；配制的抑制剂在2h内测得的活性变化小于2％；RSD2．5％；0．05mg／mL牛血清白蛋白对测定体系没有干扰。结论此方法适用于苦瓜胰蛋白酶抑制剂活性的测定。
- 傅中平周吉燕王富军
- 关键词：苦瓜胰蛋白酶抑制剂
- 一种用于药物蛋白亲和纯化和跨膜转运的双功能标签的开发
- 2020年
- 目的:开发一种既能用于亲和纯化目标蛋白,又可介导不能自主进入细胞的药物蛋白跨膜转运到细胞内发挥活性的双功能标签。方法:从已有文献资料中挑选四种富含碱性氨基酸的钙调蛋白结合肽(calmodulin binding peptide,CBP),将其与绿色荧光蛋白(EGFP)融合表达,然后采用与钙调蛋白(calmodulin,CaM)亲和结合过程来筛选与CaM具有最高亲和力的CBP;随后采用荧光显微镜检测、激光共聚焦显微镜检测以及流式细胞术等技术来分析测定和比较候选CBP序列将EGFP重组蛋白自主转运进入细胞的能力。最后将筛选到的新型CBP双功能标签与凋亡蛋白融合表达,考察其与CaM亲和结合后纯化重组凋亡蛋白的能力,以MTT法分析此重组蛋白进入肿瘤细胞抑制生长的能力。结果:通过CaM-CBP亲和层析筛选出与CaM具高有亲和力的三种CBP序列;从重组蛋白胞内荧光检测结果得知,带有野生型骨骼肌肌球蛋白轻链激酶CBP序列(MLCK)的重组EGFP蛋白具有最佳跨膜转运效率,且显著高于来源于艾滋病毒的经典穿膜肽TAT的穿膜效率。以此MLCK新型双功能标签成功地通过CaM-CBP亲和结合纯化得到重组凋亡蛋白,并可将重组凋亡蛋白转运进入细胞内发挥抗肿瘤作用。重组凋亡蛋白对MGC-803、H460、HeLa三种肿瘤细胞生长的24h半抑制浓度(IC50)分别为:1. 18μmol/L、1. 23μmol/L、1. 23μmol/L。结论:筛选得到一种新型双功能标签MLCK,其可通过与CaM高亲和作用进行亲和纯化;同时标签本身还具有和典型穿膜肽一样的高效跨膜转运功能,可将药物蛋白自主转运进入细胞,发挥药物的生物活性。因此,新型双功能标签既可用于药物蛋白的亲和纯化,又兼具体内跨膜运输作用,可广泛用于各种新型药物的开发。
- 郭利成曹雪玮傅龙云王富军王富军
- 关键词：钙调蛋白凋亡蛋白
- 体外拼装苦瓜降糖多肽P基因被引量：1
- 2011年
- 目的 以苦瓜降糖多肽P基因为例,探讨用寡核苷酸片段体外拼装基因的方法。方法根据已知苦瓜降糖多肽P的蛋白序列和大肠杆菌的密码子偏爱性,反向翻译出可在大肠杆菌内表达的苦瓜降糖多肽P基因,设计24条40 bp的降糖多肽P基因寡核苷酸片段引物,通过PCR进行寡核苷酸片段的扩增和拼装。将拼装好的多肽P基因的cDNA与pET-32a载体连接后,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经Ni2+-NTA纯化后检测其对四氧嘧啶引起的糖尿病小鼠的降糖活性。结果苦瓜降糖多肽P基因经2轮PCR扩增后,即可见目的 条带;经第3轮PCR扩增,即可见清晰的目的 条带。经测序鉴定,与设计的降糖多肽P基因序列完全一致。重组蛋白在E.coli BL21(DE3)中获得可溶性表达,且可与鼠抗His单抗发生特异性反应。纯化的融合蛋白纯度达90%以上,产量为10 mg/L,其对四氧嘧啶引起的糖尿病小鼠具有降糖活性。结论体外基因拼装法是一种有效获取目的 基因的方法,可进行密码子偏爱性设计,在宿主系统中有效表达目的 基因。
- 张文姬王碧莲郭茸恺赵健王富军
- 关键词：聚合酶链反应密码子偏爱性
- 一种高效人源性穿膜肽的生物活性研究
- 2013年
- 目的研究人类细胞色素C中Cyt c77-101对HeLa细胞的穿膜活性。方法人工合成编码Cyt c77-101的寡核苷酸链,构建重组质粒pET28a-EGFP-Cyt c77-101,并转化大肠杆菌BL21进行原核表达,进一步通过Ni2+-NTA亲和层析纯化带有绿色荧光蛋白EGFP的Cyt c77-101融合蛋白,并经荧光显微镜和激光共聚焦检测Cyt c77-101的穿膜活性。结果测序分析表明重组质粒pET28a-EGFP-Cyt c77-101构建成功,且在大肠杆菌BL21中成功表达。融合蛋白EGFP-Cyt c77-101与HeLa细胞保温10 h后,可在细胞内观察到强绿色荧光。结论人源性穿膜肽Cyt c77-101具有较强的穿膜活性。
- 庄炜东阮世龙杨旭中王佳玮王富军赵健
- 关键词：生物活性
