刘庆梅
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：苏州大学医学部基础医学与生物科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 硼酸诱导的大豆子叶节转化新方法被引量：1
- 2011年
- 采用农杆菌介导法,以苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)毒性蛋白基因B t为目的基因,研究了不同硼酸浓度处理对大豆子叶节转基因的影响。结果表明:200 mg·L-1硼酸浓度诱导培养基诱导的大豆丛生芽长势最好,而且转基因效率高达3.3%。对获得大豆转化幼苗的根和叶片采用PCR、逆转录PCR和Southern blotting等方法进行筛选与鉴定,结果均有2株幼苗呈阳性。
- 李海芬刘庆梅杨光宇王洋岳娜胡倩倩孟祥勋
- 关键词：大豆转基因农杆菌硼酸丛生芽
- 小鼠ZBTB9基因的克隆、亚细胞定位及原核表达被引量：2
- 2011年
- 应用RT-PCR扩增技术从小鼠肺组织中成功克隆锌指蛋白ZBTB9基因;该基因含有1 380bp的开放阅读框(ORF),编码459个氨基酸。为研究其生物学功能,构建pEGFP-C1/ZBTB9融合载体转染细胞,亚细胞定位显示ZBTB9定位于细胞核且呈斑点状分布。构建原核表达载体pGEX-4T-1/ZBTB9,转入大肠杆菌BL21(DE3Lysis)中,IPTG诱导融合蛋白表达。重组蛋白经SDS-PAGE鉴定后进行纯化。结果表明:成功地纯化了ZBTB9的融合蛋白。ZBTB9基因的成功克隆及表达,为进一步深入研究ZBTB9的生物学功能奠定基础。
- 徐凤芹刘庆梅黄中开成红霞周斌车建花王尉平许维岸王明华
- 关键词：锌指蛋白基因克隆亚细胞定位原核表达
- 大鼠新基因PMP22CD的克隆以及多克隆抗体的制备
- 2009年
- 目的:通过PCR克隆PMP22CD基因,构建原核表达载体PET-32a(+)/PMP22CD,表达并纯化蛋白,制备多克隆抗体,为研究该基因的功能奠定基础。方法:通过PCR的方法克隆PMP22CD基因,选择抗原性较强的C-端,构建原核表达载体PET32a(+)/PMP22CD,在大肠杆菌BL21(DE3 Lysis)中诱导表达,SDS-PAGE分析重组蛋白以包涵体的形式存在,应用电洗脱的方式获得重组蛋白,免疫新西兰大白兔,获得抗血清,通过琼脂糖双扩和Western Blot检测抗血清效价和特异性。结果:经测序鉴定成功克隆PMP22CD基因,并构建PET-32a(+)/PMP22CD重组质粒,表达融合蛋白,免疫新西兰大白兔,获得PMP22CD多克隆抗体。结论:得到了纯化的PET-32a(+)/PMP22CD融合蛋白,获得了效价高、特异性强的抗体。
- 杨世蕊郁美香雷陈周游刘庆梅刘佳佳王明华
- 关键词：原核表达多克隆抗体聚合酶链反应
