李慧英
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
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- 单核细胞趋化蛋白1体外趋化经成肌诱导分化后的小鼠BMSCs实验研究被引量：3
- 2010年
- 目的为提高BMSCs的静脉移植效率,研究单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein1,MCP-1)对经成肌诱导分化后的小鼠BMSCs的体外趋化迁移作用。方法以差速贴壁法与密度梯度离心法相结合分离培养C57/BL10小鼠BMSCs,并采用ALP Gomori改良钙钴法染色行成骨诱导鉴定。取第3代BMSCs以5氮杂胞苷(5-azacytidine,5-Aza)为诱导剂进行成肌细胞诱导分化。以不同浓度(25、50、100、200、400ng/mL)的MCP-1对经成肌诱导分化后的小鼠BMSCs进行体外趋化迁移,计数迁移细胞数,以单纯L-DMEM培养基为对照;应用流式细胞仪检测经成肌诱导分化后的小鼠BMSCs的C-C趋化因子受体(chemokine receptor2,CKR-2)的表达。结果第3代细胞能诱导分化为成骨细胞,提示所用细胞为BMSCs。经成肌诱导分化后的BMSCs可形成肌小管结构。MCP-1浓度为25、50、100、200、400ng/mL时,迁移至Millicell小室聚碳酸酯膜外层的细胞数分别为(35.0667±6.5842)、(43.2000±6.4608)、(44.4667±4.8235)、(45.6000±8.6503)、(50.7333±7.5825)个,与对照组(28.3333±8.9176)个比较差异均有统计学意义(P<0.05),25、50、400ng/mL组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测显示,加入一抗和二抗的待测样本CKR-2表达率为48.0%,与空白对照(0.6%)和仅加入二抗的阴性对照(17.0%)比较差异均有统计学意义(P<0.001)。结论 MCP-1对经成肌诱导分化后的小鼠BMSCs有趋化迁移作用,MCP-1/CKR-2通路参与了小鼠BMSCs的迁移。
- 刘举周红雨刘立斌罗丽连志云李慧英
- 关键词：BMSCS单核细胞趋化蛋白1小鼠
