李艳
- 作品数：15 被引量：28H指数：3
- 供职机构：暨南大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 冰冻切片制作方法的改良被引量：14
- 2009年
- 目的探讨使用7.5%明胶-15%蔗糖(w/v)代替OCT包埋剂对冰冻切片技术的改良。方法4.0%的多聚甲醛固定组织后,7.5%明胶-15%蔗糖代替OCT包埋剂包埋,经-80℃冰箱冷冻后,冰冻切片机进行切片。结果使用7.5%明胶-15%蔗糖代替OCT包埋组织后可以顺利的进行冰冻连续切片。结论实验结果证实,7.5%明胶-15%蔗糖替代OCT包埋剂后切片可以打破冰冻切片不能连续切片的常规,大大缩短了制片时间及节省了实验材料,并且切片效果良好、组织切片完整、厚薄均匀、不易形成皱折。
- 马征来吴婷李艳常青王丽京杨雪松
- 关键词：包埋剂明胶蔗糖OCT
- Slit2/Robo1信号对鸡胚早期神经管及体节发育的影响
- 2011年
- 目的:探讨Slit2/Robo1对鸡胚早期神经管和体节发育的影响。方法:显微注射法将质粒注射入HH10期胚胎神经管内,活体胚胎细胞电穿孔方法转染胚胎半侧神经管,以另一侧神经管为对照侧,原位杂交及免疫荧光方法观察转染10 h后神经管的发育和神经嵴细胞迁移至体节的情况。结果:下调Robo1侧神经管发育较正常对照侧异常,同时发现Slug表达和神经嵴细胞迁移至体节路线发生改变。结论:Slit2/Robo1信号可能通过影响Slug基因表达,对胚胎早期神经管闭合、神经嵴细胞正常产生及迁移方向以及体节分化有重要作用。
- 王广王晓钰李艳李艳王丽京雷健张笑坛耿建国
- 关键词：神经管神经嵴细胞体节
- 成纤维细胞生长因子信号调控早期鸡胚胎神经嵴细胞的迁移
- 2012年
- 目的利用Sprouty2基因阻断成纤维细胞生长因子(FGF)信号,探讨FGF在早期鸡胚胎发育过程中对神经嵴细胞迁移的影响及其机制。方法通过体内培养的方法孵育鸡胚至HH9期,通过显微注射的方法将Sprouty2-绿色荧光蛋白(GFP)质粒注射入神经管腔内。实验侧使用电穿孔转染的方法转染胚胎半侧神经管,另一侧正常神经管设为对照侧。采用神经嵴细胞特异标记物HNK1免疫荧光的方法检测Sprouty2基因阻断FGF信号后是否影响胚胎头部和躯干部神经嵴细胞的迁移过程。随后,进一步通过检测神经细胞钙黏分子N-Cadherin的表达来观察细胞之间黏附作用的改变。结果 HNK1免疫荧光检测结果显示,Sprouty2转染侧即阻断FGF信号通路后,HNK1在早期鸡胚胎的头部和躯干部的表达量均比对照侧的表达量增多;而神经细胞钙黏分子N-Cadherin检测结果表明,Sprouty2转染侧和正常对照侧N-Cadherin在头部和躯干部神经管上表达量的差异均无显著性。结论 Sprouty2基因阻断FGF信号后,促进了早期鸡胚胎神经嵴细胞的迁移,但是FGF信号对此过程的影响可能不是由神经钙黏分子N-Cadherin介导的。
- 张笑坛夏潮涌李艳王广王晓钰张兆龙文皓旻杨雪松
- 关键词：成纤维细胞生长因子神经嵴细胞迁移电穿孔转染鸡胚
- GATA-4在妊娠期糖尿病胎鼠心脏中的表达被引量：4
- 2013年
- 目的:了解妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)胎鼠心脏发育过程中锌指转录因子GATA结合蛋白4(GATA binding protein 4,GATA-4)的变化规律,为深入探讨其在GDM胎鼠心脏发育异常中的作用机制奠定基础。方法:80只SPF级成年SD雌鼠随机分为对照组(n=40)和GDM组(n=40),通过阴道涂片确定受孕后,GDM组予腹腔注射2%链脲佐菌素(streptozotocin,STZ;每只40 mg/kg),对照组予腹腔注射等量的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。给药72 h后每天监测血糖,各组分别于孕12、15、19 d剖取胎鼠心脏组织,HE染色观察心脏组织病理变化,免疫组化检测GATA-4的表达,实时荧光定量RT-PCR检测GATA-4 mRNA的表达,Western blot-ting检测GATA-4蛋白的变化。结果:对照组及GDM组GATA-4蛋白的表达呈动态变化:孕12 d可见表达,孕15 d表达最高,孕19 d表达下降;与对照组相比,GDM组GATA-4 mRNA及蛋白的表达呈现下降趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:妊娠期糖尿病胎鼠心脏发育异常率显著增高,GATA-4与GDM胎鼠心脏发育异常可能有相关性。
- 孙凤杰任建兵黄晓吴瑕李艳杨雪松柳国胜
- 关键词：妊娠期糖尿病心脏发育
- PTEN抑制胚胎原肠胚形成期EMT的过程
- PTEN(Phosphatase and tensin homolog)是一种重要的抑癌基因,具有非常广泛的生物学活性,例如在绌胞的生长发育、迁移、凋亡和信号传导等均发挥重要作用。PTEN基因表达始于在胚胎早期的上胚层,...
- 李艳王晓钰王丽京徐涛卢晓晔蔡冬青耿建国杨雪松
- 关键词：EMTPTEN细胞迁移
- 文献传递
- 鸡胚原肠胚期原条细胞命运决定于其所处的局部微环境被引量：1
- 2011年
- 在果蝇、斑马鱼、鸡等三胚层动物胚胎早期发育的原肠胚期,原条两侧的上胚层细胞进入原条经历上皮-间充质转化(EMT),迁移进入囊胚腔,形成松散的中胚层细胞,位于原条不同部位的细胞其迁移路线和分化命运不同,如前部原条细胞贡献于体节和心脏等,而后部原条细胞则迁移至胚外形成血岛。为了研究细胞的迁移途径及分化命运是否会随着细胞所处不同部位微环境的改变而改变,利用传统的移植技术,将宿主鸡胚原条前部的一部分细胞用GFP阳性的相同时期鸡胚原条组织替换,培养一段时间后,用荧光体视显微镜追踪GFP阳性细胞的迁移途径。结果发现,从供体原条后部移植到宿主原条前部的细胞遵循原条前部细胞迁移的路线,反之亦然;原位杂交结果显示移植后的GFP阳性细胞分化为所处部位的细胞类型。上述结果表明:鸡胚原肠胚期原条细胞迁移和分化的命运决定于细胞所处的微环境或者说局部基因表达的时空性。
- 王晓钰李艳马征来王丽京耿建国杨雪松
- 关键词：细胞迁移局部微环境原条
- PTEN抑制胚胎原肠胚形成期EMT的过程
- PTEN(Phosphatase and tensin homolog)是一种重要的抑癌基因，具有非常广泛的生物学活性，例如在细胞的生长发育、迁移、凋亡和信号传导等均发挥重要作用.PTEN基因表达始于在胚胎早期的上胚层，...
- 李艳王晓钰王丽京徐涛卢晓晔蔡冬青耿建国杨雪松
- 关键词：EMTPTEN细胞迁移
- 鸡胚早期发育过程中细胞迁移的基因调控被引量：3
- 2011年
- 鸡胚是发育生物学研究的经典动物模型,通过基因导入技术调节胚胎发育的基因功能,研究鸡胚早期发育过程中的细胞迁移,有助于更好地诠释相关先天性疾病的发生发展过程。在早期胚胎发育的过程中,原肠胚期三胚层的形成、心管的发生及神经嵴的发育都伴随着显著的细胞迁移过程。该文将结合近年来国内外对该过程的研究进展,介绍这三个不同时期细胞的迁移及相关基因调控。
- 王广李艳杨雪松
- 关键词：细胞迁移基因调控原条神经嵴
- PTEN抑制胚胎原肠胚形成期EMT的过程被引量：3
- 2011年
- PTEN(Phosphatase and tensin homolog)是一种重要的抑癌基因,具有非常广泛的生物学活性,例如在细胞的生长发育、迁移、凋亡和信号传导等均发挥重要作用。PTEN基因表达始于在胚胎早期的上胚层,而后主要出现在神经外胚层和胚胎中胚层结构,表明PTEN可能参与胚胎早期发育过程的细胞迁移、增殖和分化。文章主要应用在体改变早期胚胎PTEN的表达水平来观察其对上胚层至中胚层细胞转换—EMT(Epithe-lial-mesenchymal transition)的作用。首先,原位杂交结果提示,内源性PTEN表达在原条以及之后的中胚层细胞结构如体节等。在体PTEN转染实验,体外培养至HH3期的鸡胚胎,转染Wt PTEN-GFP或移植Wt PTEN-GFP原条组织至未转染的同时期的宿主胚胎相同部位后,观察到PTEN转染细胞大都由上胚层迁移至原条并滞留于原条,不再参与中胚层细胞形成。移植实验也得到相似结果,发现在Wt PTEN-GFP阳性原条组织移植后很少细胞迁移出原条。另外在原肠胚期PTEN siRNA降调胚胎一侧PTEN基因后,降调侧中胚层细胞数明显少于正常侧。上述研究结果均提示PTEN基因在胚胎原肠胚期三胚层形成过程中可能具有抑制EMT的作用。
- 李艳王晓钰王丽京徐涛卢晓晔蔡冬青耿建国杨雪松
- 关键词：EMTPTEN细胞迁移
- 胚胎心肌干细胞体外的分化被引量：2
- 2010年
- 目的鸡胚原肠胚形成期含有心肌干细胞（cardiac stem cell,CSC）的生心区原条组织离体后体外培养,使其增殖分化成具有舒缩功能的心肌组织。方法改良滤纸鸡胚胎整体培养法取胚,37℃孵箱孵育,待胚胎发育到原肠胚的HH4期,无菌环境内选择性离体胚胎生心区原条组织（原条组织的前25%~40%）于10%FBSDMEM-F12培养基中培养,2~5d后得到局部跳动的细胞组织,通过原位杂交、免疫组织化学、DiI示踪和细胞的超微结构鉴定是否分化为心肌组织。结果 FGF8特异性表达于心管和神经管;N-cadherin特异性表达于心管、神经管和体节;DiI标记的细胞迁移参与心管的形成;细胞的超微结构显示心肌组织特有的结构---闰盘。结论 CSC体外培养可以定向分化发育成心肌组织,为进一步研究心肌细胞的发育分化和生理药理学实验提供了良好的平台。
- 马征来常青夏潮勇王丽京吴婷李艳杨雪松
- 关键词：心肌干细胞原肠胚N-CADHERINDII分化心肌细胞
