马征来
- 作品数：13 被引量：21H指数：2
- 供职机构：暨南大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- PTEN在胚胎早期心脏发育过程中的作用
- 目的胚胎早期原肠胚形成期(gastrulation),PTEN在原条以及其后发生的中胚层组织中表达。本实验通过过表达PTEN以探讨其在早期心脏发生发育过程中的作用和意义。方法“改良滤纸鸡胚胎整体培养法”取新鲜鸡胚,37℃...
- 马征来
- 关键词：PTEN心肌干细胞原肠胚N-CADHERIN心肌分化
- 文献传递
- 医学本科生创新性实验计划管理模式初探
- 2014年
- 国家大学生创新性实验计划是培养学生创新能力和提升综合素质的有效途径。计划实施6年来已成为高校科研活动的有效补充形式。阐述了指导教师对实验计划顺利实施的有效管理方法,即将项目分割为若干技术环节,并固化为流程,建立高效、科学、注重细节的项目管理模式,介绍了从实际工作中获得的收获和体会,并提出有待解决的问题。
- 程欣王广马征来杨雪松
- 关键词：实验教学创新性实验计划教学管理
- 改良鸡胚尿囊膜肿瘤实验动物模型及其生物学行为观察被引量：3
- 2013年
- 目的利用鸡胚尿囊膜建立人移植瘤模型并观察其生物学行为和组织学形态已有报道。但是,在实际工作的过程中仍存在不少的问题。因此,通过改良的方法,获得简单,快捷,可重复的动物模型。方法将人胶质瘤SWO-38细胞滴加到鸡胚尿囊膜上,观察影响鸡胚的存活和成瘤的可能因素、移植瘤的生长特性和形态学特征。结果利用改良的方法成功建立胶质瘤鸡胚尿囊膜的模型;肿瘤组织能够诱导血管生成,镜下形态符合恶性胶质瘤的形态学特征。结论该模型简单,快捷,易于建立。便于观察肿瘤组织的生物学行为,可用于抗肿瘤的药物筛选。
- 马继伟张勇张逸铠李海莹马征来王超夏潮涌钟雪云
- 关键词：胶质瘤鸡胚尿囊膜移植瘤血管生成
- 冰冻切片制作方法的改良被引量：14
- 2009年
- 目的探讨使用7.5%明胶-15%蔗糖(w/v)代替OCT包埋剂对冰冻切片技术的改良。方法4.0%的多聚甲醛固定组织后,7.5%明胶-15%蔗糖代替OCT包埋剂包埋,经-80℃冰箱冷冻后,冰冻切片机进行切片。结果使用7.5%明胶-15%蔗糖代替OCT包埋组织后可以顺利的进行冰冻连续切片。结论实验结果证实,7.5%明胶-15%蔗糖替代OCT包埋剂后切片可以打破冰冻切片不能连续切片的常规,大大缩短了制片时间及节省了实验材料,并且切片效果良好、组织切片完整、厚薄均匀、不易形成皱折。
- 马征来吴婷李艳常青王丽京杨雪松
- 关键词：包埋剂明胶蔗糖OCT
- 胚胎心肌干细胞体外的分化被引量：2
- 2010年
- 目的鸡胚原肠胚形成期含有心肌干细胞（cardiac stem cell,CSC）的生心区原条组织离体后体外培养,使其增殖分化成具有舒缩功能的心肌组织。方法改良滤纸鸡胚胎整体培养法取胚,37℃孵箱孵育,待胚胎发育到原肠胚的HH4期,无菌环境内选择性离体胚胎生心区原条组织（原条组织的前25%~40%）于10%FBSDMEM-F12培养基中培养,2~5d后得到局部跳动的细胞组织,通过原位杂交、免疫组织化学、DiI示踪和细胞的超微结构鉴定是否分化为心肌组织。结果 FGF8特异性表达于心管和神经管;N-cadherin特异性表达于心管、神经管和体节;DiI标记的细胞迁移参与心管的形成;细胞的超微结构显示心肌组织特有的结构---闰盘。结论 CSC体外培养可以定向分化发育成心肌组织,为进一步研究心肌细胞的发育分化和生理药理学实验提供了良好的平台。
- 马征来常青夏潮勇王丽京吴婷李艳杨雪松
- 关键词：心肌干细胞原肠胚N-CADHERINDII分化心肌细胞
- 鸡胚原肠胚期原条细胞命运决定于其所处的局部微环境被引量：1
- 2011年
- 在果蝇、斑马鱼、鸡等三胚层动物胚胎早期发育的原肠胚期,原条两侧的上胚层细胞进入原条经历上皮-间充质转化(EMT),迁移进入囊胚腔,形成松散的中胚层细胞,位于原条不同部位的细胞其迁移路线和分化命运不同,如前部原条细胞贡献于体节和心脏等,而后部原条细胞则迁移至胚外形成血岛。为了研究细胞的迁移途径及分化命运是否会随着细胞所处不同部位微环境的改变而改变,利用传统的移植技术,将宿主鸡胚原条前部的一部分细胞用GFP阳性的相同时期鸡胚原条组织替换,培养一段时间后,用荧光体视显微镜追踪GFP阳性细胞的迁移途径。结果发现,从供体原条后部移植到宿主原条前部的细胞遵循原条前部细胞迁移的路线,反之亦然;原位杂交结果显示移植后的GFP阳性细胞分化为所处部位的细胞类型。上述结果表明:鸡胚原肠胚期原条细胞迁移和分化的命运决定于细胞所处的微环境或者说局部基因表达的时空性。
- 王晓钰李艳马征来王丽京耿建国杨雪松
- 关键词：细胞迁移局部微环境原条
- 鸡胚发育过程中角膜神经的分布和变化
- 2016年
- 背景了解动物或人的角膜神经分布和发育过程对于角膜疾病的临床和基础研究具有重要意义，目前关于动物角膜神经发育和特异性定位的研究结果已有发表，但是有关胚胎发育阶段角膜神经纤维的分布规律和角膜神经纤维的定量研究结果尚少见。目的了解鸡胚发育过程中角膜神经纤维的分布，并定量评价随着鸡胚龄增长其角膜神经纤维长度和密度的变化规律。方法选取胚胎期6～20d（E6-E20）的鸡胚作为角膜胚胎发育模型，获取相应胚期的带有角膜缘的完整鸡角膜，使用β-tubulinⅢ抗体进行角膜免疫荧光染色，以标记角膜神经，将角膜上皮面朝上做角膜上皮的放射状切开，制备全角膜铺片，用含DAPI抗荧光淬灭缓冲甘油封片。利用正置荧光显微镜拍摄获取整个角膜的神经纤维图像，使用PhotoshopCS4测量不同胚龄的鸡胚角膜表面积和神经纤维束数量，采用Imaris x647．4．2软件测量不同胚龄的鸡胚角膜神经纤维总长度和密度。结果全角膜铺片显示，鸡胚E6～E8可见神经束从颞侧巩膜进入角膜缘，E9～E10时神经纤维在角膜缘呈环状分布，E11～E15时延伸进入角膜中央，E16～E20时角膜形成神经纤维丛。E6～E20期间，鸡胚角膜表面积、角膜神经纤维长度、角膜神经纤维密度均随着胚龄的增长而逐渐增加，总体比较差异均有统计学意义（F=127．007、227．051、67．748，均P〈0.01），鸡胚角膜表面积与角膜神经纤维长度间呈强正相关（r=0．863，P〈0．01）。鸡胚角膜神经纤维束从E13开始出现，为（59．00±1．14）／mm^2，此后缓慢增加，至E18达到高峰，数量为（576．75±29．16）／mm^2，至E20时角膜神经纤维束数量减少，为（299．67±25．46）／mm^2，不同胚龄期鸡胚角膜神经纤维束数量的总体比较差异有统计学意义（F=13．759，P=0．000）。结论鸡胚角膜神经发育从E9开始，
- 薛芸霞马征来李志杰杨雪松
- 关键词：鸡胚
- 孕期咖啡因暴露影响神经嵴细胞表达致先天性心脏病的机制
- 2018年
- 目的胚胎早期心脏发生的过程中过量咖啡因暴露,由于第二生心神经嵴细胞(CNCC)受到影响而导致心脏发育畸形。方法利用鸡胚为实验模型,在鸡胚心管发生发育的关键时期-HH9,按照正常组(PBS)、0.5μmol/egg组、1.0μmol/egg组、1.5μmol/egg组,连续3 d给予咖啡因暴露,至胚胎发育到12 d时获取胚胎用95%酒精固定2 d,对胚胎的心脏流出道(out flow tract,OFT)发育状态进行观察记录;,咖啡因暴露3 d后获取胚胎对CNCC进行检测,更深入研究其对心脏流出道发育机制的影响。结果胚胎早期心脏形成过程中,过量咖啡因暴露影响了CNCC的增殖、迁移,从而影响了心脏的正常发育,1.0μmol/egg组、1.5μmol/egg组分别出现心脏OFT的主动脉、肺动脉等发育畸形,并且有剂量依赖性。结论孕期大量咖啡因暴露通过影响第二生心区的CNCC的增殖和迁移路径导致心脏发育畸形,初步探究咖啡因暴露对胚胎早期心脏的发生发育影响的机制。
- 任亚丽范双莉常青杨雪松马征来
- 关键词：先天性心脏病鸡胚
- PTEN基因对早期胚胎神经嵴细胞迁移的作用研究被引量：1
- 2012年
- 目的初步探讨PTEN基因在早期神经嵴细胞迁移中的作用。方法首先胚胎整体的原位杂交和免疫荧光方法检测鸡胚胎内源性的PTEN基因及蛋白水平的表达情况;其次,利用鸡胚胎体内半侧神经管转染的方法,使神经管一侧PTEN基因过表达,对侧神经管为正常对照侧;最后,通过Pax7的整体胚胎免疫荧光表达观察PTEN基因对其标记的部分神经嵴细胞迁移的影响。结果内源性PTEN基因在mRNA和蛋白水平表达显示,其在早期胚胎HH4期的神经板即开始明显的表达;通过半侧过表达PTEN基因后观察到过表达PTEN基因侧的头部神经嵴细胞迁移与对照侧相比明显受到抑制,但对躯干部的影响并不明显。结论 PTEN基因可能抑制早期胚胎头部神经嵴细胞的迁移。
- 张兆龙李艳王广王晓钰张笑坛文皓旻马征来杨雪松
- 关键词：PTEN神经嵴细胞细胞迁移
- PTEN在胚胎早期心脏发育过程中的作用
- 2011年
- 目的通过过表达PTEN,探讨胚胎早期原肠胚形成期PTEN表达及在早期心脏发生发育过程的作用和意义。方法用改良滤纸鸡胚胎整体培养法取胚,37℃孵箱孵育待其发育到HH4期,对鸡胚心肌干细胞(Cardiac Stem Cell)进行PTEN电转染,转染成功后一部分鸡胚37℃孵箱继续培养30 h,待其发育形成心管,观察过表达PTEN对心管发生的影响;另一部分鸡胚在超净台内完成心肌干细胞的离体,体外培养使其分化发育成心肌组织,主要研究PTEN在细胞增殖、分化和凋亡过程中的作用。结果 30 h后鸡胚整体的免疫组织化学(N-cadherin)结果显示,PTEN-WT组和PTEN-G129E组鸡胚心管出现了反向环化、多囊化等畸形,GFP组和PTEN-C124S组心管发育受到的影响较小;转染后离体培养得到的心肌组织的跳动频率与GFP组下降的速度加快,且维持时间缩短,GFP组与PTEN-WT组差异有显著性(P<0.05),PTEN-WT组与PTEN-C124S组、PTEN-G129E组差异无显著性(P>0.05)。结论 PTEN蛋白酯酶可能参与早期胚胎心肌干细胞之间黏附分子的表达从而调节细胞迁移、分化发育,并加速了心肌组织的衰老。
- 马征来常青夏潮勇王丽京吴婷李艳杨雪松
- 关键词：PTEN原肠胚心肌干细胞N-CADHERIN心肌分化
