李艳
- 作品数:7 被引量:112H指数:6
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- 转化生长因子-β1和表皮生长因子在诱导人肾小管上皮细胞转分化中的作用被引量:13
- 2002年
- 目的 探讨表皮生长因子 (EGF)和转化生长因子 β1(TGF β1)及两者联合应用对人类肾小管上皮细胞 (HKC)转分化的影响。方法 用相差显微镜、透射电镜和扫描电镜观察HKC株的形态和结构。应用间接免疫荧光法检测HKC角蛋白和波形蛋白的表达 ;应用免疫组织化学双染色技术测定HKCE 钙粘连蛋白和α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)的表达。应用流式细胞技术测定HKC表达α SMA阳性的百分率。结果 10、2 0、4 0ng/ml浓度EGF及 3ng/ml浓度TGF β1单独作用时 ,无明显促进HKC转分化的作用。TGF β1单独应用 (10、2 0ng/ml)有轻度的诱导HKC转分化的作用。当TGF β1(3ng/ml)与EGF(10ng/ml)、TGF β1(10ng/ml)与EGF(2 0ng/ml)、TGF β1(2 0ng/ml)与EGF(40ng/ml)共同作用时 ,对诱导HKC转分化有显著的协同作用 [(35 17± 2 86 ) %、(5 1 2± 1 10 ) %、(5 5 4 3± 1 15 ) %vs(3 5 3± 0 0 9) % ,P <0 0 5 ]。结论 一定浓度的TGF β1和EGF在诱导HKC转分化中有显著的协同作用 ,为研究HKC转分化提供了模型。
- 苏震郑法雷李艳段琳
- 关键词:转化生长因子-Β1表皮生长因子上皮细胞肾间质纤维化
- 慢性肾衰病人血清瘦素水平的变化及其影响因素被引量:2
- 2002年
- 【摘要】目的 了解慢性肾衰(CRF)病人血清瘦素水平的变化及其影响因素,包括代谢性酸中毒、血透、营养状况等。方法 以放免法测定70名正常人与70名CRF病人(其中非透析CRF病人46名,血透病人24名)血清瘦素水平,观察其变化及其与血浆HCO3一、肾功能、血清总蛋白、白蛋白、血脂等之间的关系。结果 正常对照组血清瘦素浓度为 6.99士 5.78ng/ml,与 BMI呈明显正相关,且女性瘦素浓度明显高于男性(P<0.005)。CRF病人血清瘦素浓度为12.95上13.27ng/ml,较正常人明显升高(P<0.005),亦与 BMI呈明显正相关,且女性浓度明显高于男性(P<0、005)。其中非透析病人血清瘦素浓度为13.51 13.82nyml,经纠正酸中毒治疗后其水平明显升高至22.96 f 27.33nyml(P<0.0);血透病人透析前、后血清瘦素浓度分别为1176土1219ng/ml及1223上14.50ng/ml,两者无显著差异(P>0 05)。CRF病人血清瘦素浓度与血浆 HCO3一、血清总蛋白、白蛋白呈明显正相关。结论 本组 CRF病人血清瘦素水平明显高于正常人;代谢性酸中毒可使CRF病人血清瘦素水平下降;本组血透病人透析后应素水平无明显变化,可能与代谢性酸中毒纠正后瘦素水平下降“抵消”了血透对瘦素的清除作用有关;CRF病人的营养状况可能与血清瘦素水平变化有关。
- 殷苏燕仇新霞李艳郑法雷
- 关键词:慢性肾功能衰竭瘦素代谢性酸中毒营养状况
- 马兜铃酸对人肾小管上皮细胞转分化和凋亡作用的体外实验研究被引量:48
- 2002年
- 目的 探讨马兜铃酸 (AA)对人类肾小管上皮细胞 (HKC)转分化和凋亡的影响。方法将不同浓度的AA(5、10、2 0和 4 0mg/L)分别加入HKC细胞培养液中培养 4 8h ,应用下列方法观察HKC细胞转分化 :间接免疫荧光法检测HKC细胞角蛋白和波形蛋白的表达 ,免疫组化双染色技术测定HKC细胞E 钙黏连蛋白和α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)的表达 ,流式细胞技术测定HKC细胞表达α SMA阳性百分率 ;应用Giemsa染色、TUNEL反应和琼脂糖凝胶电泳观察HKC细胞凋亡 ,流式细胞技术测定HKC细胞凋亡的百分率。结果 10mg/L的AA作用于HKC细胞 4 8h后角蛋白、E 钙黏连蛋白表达减弱 ,波形蛋白表达增强 ,HKC细胞表达α SMA阳性率 (14 .17± 0 .6 1) %比无血清对照组的 (3.5 7± 0 .5 2 ) %显著增高。 4 0mg/L的AA作用HKC细胞 4 8h后细胞凋亡 (5 3.4 % )比无血清对照组 (2 % )显著增高。 5和 2 0mg/L的AA未能引起HKC明显凋亡或转分化。结论 较低浓度 (10mg/L)的AA对HKC细胞有轻度的促转分化作用 ,较高浓度 (4 0mg/L)的AA作用 4 8h后引起多数HKC细胞凋亡 ,AA的上述作用可能与马兜铃酸肾病的发病机制有关。
- 苏震徐少伟郑法雷李艳
- 关键词:马兜铃酸肾小管上皮细胞马兜铃酸肾病
- 慢性肾功能衰竭大鼠下丘脑组织和血浆食欲素A及神经肽Y水平的变化及其意义被引量:10
- 2003年
- 目的 探讨大鼠慢性肾功能衰竭 (CRF)动物模型的下丘脑组织和血浆食欲素A及神经肽Y(NPY)水平的变化及其意义。方法 将 41只 2 0 0~ 2 50 g雄性Wister大鼠分为 :正常组、假手术组和CRF组。术后 4、 8、 1 2周分批断头处死大鼠 ,取血浆和下丘脑组织标本。用放射免疫法测定血浆和下丘脑组织食欲素A和NPY。用生化自动分析仪测定血清肌酐。结果 CRF大鼠术后4、 8和 1 2周血肌酐水平均高于假手术组。其术后 1 2周的血浆食欲素A水平高于假手术组 (2 64pg/ml± 62pg/mlvs 1 83pg/ml± 56pg/ml,P =0 0 39)。CRF大鼠术后 1 2周的下丘脑食欲素A水平明显低于假手术组 (1 0 5fmol/mg± 2 7fmol/mg湿重vs 1 7 4fmol/mg± 3 9fmol/mg湿重 ,P =0 0 2 3)。CRF大鼠术后 8周 (7 1 pmol/ml± 1 7pmol/mlvs 5 0 pmol/ml± 0 5pmol/ml,P =0 0 1 )和1 2周 (7 9pmol/ml± 1 1pmol/mlvs 4 8pmol/ml± 1 1 pmol/ml,P =0 0 0 0 8)的血浆神经肽Y水平高于假手术组 ,其术后 1 2周的下丘脑神经肽Y水平明显低于假手术组 (70fmol/mg± 2 3fmol/mgvs1 1 3fmol/mg± 31fmol/mg湿重 ,P =0 0 33)。 结论 (1 )CRF大鼠血浆食欲素A和NPY水平有逐渐增高趋势 ,肾功能减退可能导致食欲素A和NPY排泄障碍。 (2 )
- 李峻岭郑法雷谭会兵殷苏燕杨继红李艳卜玉芬
- 关键词:慢性肾功能衰竭下丘脑组织食欲素A放射免疫法
- 罗格列酮对转化生长因子β1诱导的人肾小管上皮细胞结缔组织生长因子表达的影响被引量:7
- 2005年
- 目的探讨体外条件下转化生长因子(TGF)β1对人近端肾小管上皮细胞系(HK-2)表达结缔组织生长因子(CTGF)的诱导情况,以及罗格列酮对其影响和作用途径。方法应用RT-PCR方法检测CTGF和α-平滑肌肌动蛋白(SMA)mRNA表达。应用Western印迹方法检测CTGF和纤连蛋白(FN)的蛋白表达。结果(1)HK-2细胞低水平表达CTGFmRNA和蛋白,TGF-β1呈剂量和时间依赖性增加HK-2细胞CTGFmRNA和蛋白表达(P<0.01)。(2)罗格列酮和15脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)呈剂量依赖性抑制TGF—β1(4ng/ml)诱导的HK-2细胞CTGFmRNA和蛋白的表达。(3)过氧化物酶体增殖体激活受体(PPAR)γ特异性抑制剂GW9662(1μmol/L)完全阻断罗格列酮和15d—PGJ2对CTGFmRNA和蛋白表达的抑制作用。(4)与单纯TGF-β14ng/ml刺激组相比,罗格列酮5、10μmol/L处理组HK-2细胞FN蛋白分别下调39.9%和53.4%(P<0.01),并呈剂量依赖性(P<0.01),而GW9662完全阻断该作用。结论在体外,罗格列酮可通过激活肾小管上皮细胞PPARγ抑制TGF-β1诱导的CTGF转录和表达,同时也可抑制FN的表达。
- 秦岩李学旺文煜冰李航陈丽萌段琳李艳
- 关键词:罗格列酮人肾小管上皮细胞转化生长因子Β1HK-2细胞特异性抑制剂过氧化物酶体
- 骨形成蛋白-7对MCP-1诱导人肾小管上皮细胞转分化和TGF-β1-Smad3信号转导的作用被引量:14
- 2005年
- 目的探讨骨形成蛋白7(BMP-7)对单核细胞趋化蛋白1(MCP1)诱导体外培养人肾小管上皮细胞转分化的作用,并初步探讨该作用与转化生长因子β1(TGFβ1)、Smad3表达变化的关系。方法将体外培养HK2细胞分为以下各组:阴性对照组;阳性对照组:TGF-β1(5ng/ml)处理;MCP-1(0.1,1,10及50ng/ml)组,BMP7组(0.1,1,10,50ng/ml);MCP1(1ng/ml)加BMP-7(50ng/ml)组;MCP1(1ng/ml)加MCP1中和抗体(5μg/ml)组。应用半定量RTPCR方法检测HK-2细胞α平滑肌肌动蛋白(αSMA)mRNA表达,ELISA方法测定上清液中I型胶原分泌,Westernblot方法检测HK2细胞TGFβ1及Smad3表达。结果MCP1(0.1,1ng/ml)组HK2细胞αSMAmRNA表达较阴性对照组明显增强(P<0.01)。ELISA方法测定MCP1(0.1,1ng/ml)组上清液中I型胶原分泌明显高于阴性对照组(P<0.01)。MCP-1中和抗体与MCP-1(1ng/ml)共同作用24h后,HKC细胞αSMAmRNA表达几乎被完全抑制(P<0.001),而BMP7(50ng/ml)与MCP1(1ng/ml)共同作用24h后HK2细胞αSMAmRNA表达仅部分被抑制(P<0.01);MCP-1中和抗体或BMP7(50ng/ml)与MCP1(1ng/ml)共同作用24h后Ⅰ型胶原分泌较MCP1(1ng/ml)组明显降低(P<0.05)。Westernblot方法检测显示,MCP1(1ng/ml)组HK2细胞TGF-β1及Smad3表达水平均较阴性对照组明显上调(P<0.01)。MCP1中和抗体或BMP7(50ng/ml)与MCP-1(1ng/ml)共同作用24h后,HK2细胞TGF-β1表达均分别比MCP1(1ng/mL)单独作用明显下调,以MCP1中和抗体的作用更强(P<0.01,P<0.05);在MCP1中和抗体或BMP7作用24h后,Smad3表达也有类似下调(P<0.01,P<0.05)。结论MCP1能诱导体外培养的HK2细胞发生转分化,该作用可能与TGFβ1及Smad3表达上调有关。BMP7能部分抑制MCP1诱导HK2细胞转分化,该作用可能与TGFβ1及Smad3表达部分下调有关;同时提示MCP1诱导的转分化可能涉及非TGFβ依赖的细胞信号传导途径,需进一步研究。
- 谭小月郑法雷周秋根段琳李艳
- 关键词:骨形成蛋白-7肾小管细胞转分化信号转导单核细胞趋化蛋白-1
- 2型糖尿病合并非糖尿病性肾脏疾病——附33例2型糖尿病肾活检结果及文献复习被引量:19
- 2003年
- 目的分析探讨我国2型糖尿病(diabetesmellitus,DM)患者并发非糖尿病性肾脏疾病(non-diabeticrenaldisease,NDRD)的情况。方法回顾性分析了本院近6年来33例接受肾活检的2型糖尿病患者的临床表现、病理和治疗情况。结果33例DM患者中7例为糖尿病肾病(diabetenephropathy,DN),22例为NDRD,两组患者在糖尿病的病程、肌酐清除率、血肌肝、血白蛋白水平、24h尿蛋白和糖尿病眼底、高血压及外周神经病变的发生率等方面差异均无显著性。NDRD患者更易出现血尿及非肾病范畴的蛋白尿。IgA肾病占本院NDRD的40.9%。结论血尿和非肾病范畴的蛋白尿提示2型DM患者可能并发NDRD,IgA肾病可能是亚洲地区NDRD最常见的类型。
- 李航李学旺黄庆元叶文玲段琳李艳
- 关键词:糖尿病肾病肾活检IGA肾病