佘维娜
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
- 供职机构:南京工业大学食品与轻工学院更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划江苏省“青蓝工程”基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:化学工程生物学轻工技术与工程更多>>
- γ-谷氨酰转肽酶法合成γ-L-谷氨酰-L-酪氨酸
- 2009年
- 以B.subtilisNX-2产γ-谷氨酰转肽酶为催化剂,以L-谷氨酰胺和L-酪氨酸为底物,利用转肽反应合成γ-L-谷氨酰-L-酪氨酸,考察了pH、温度、供体/受体比以及酶浓度等条件对反应过程的影响。结果表明,在L-谷氨酰胺浓度为20 mmol/L,L-酪氨酸浓度为20 mmol/L,酶浓度为0.4191 U/mL以及pH10.0条件下,于37℃水浴中反应2 h,γ-L-谷氨酰-L-酪氨酸得率为1.4 mmol/L,相对于谷氨酰胺的转化率为19.32%。
- 佘维娜周治姚忠徐虹韦萍
- 关键词:Γ-谷氨酰转肽酶酶法合成
- 离子交换法分离S-苄基-γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸被引量:1
- 2009年
- 采用离子交换法对酶法合成的S-苄基-γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸(S-Bzl-GGC)进行了分离纯化.研究了QSephroseFF阴离子交换树脂对S-Bzl-GGC的吸附等温线,很好地符合Sips吸附等温线模型.考察了pH值、洗脱梯度、流速和进样量等条件对纯化效果的影响,建立了一套基于QSephroseFF阴离子交换树脂的纯化方案.结果表明,在pH8.2、洗脱梯度0~30%B(Tris-HCl缓冲液+1mol/LNaCl)12mL、流速2mL/min、进样量500μL的优化条件下,经一步分离,产物纯度可达98.5%,经1H-NMR鉴定产物结构正确.
- 刘步云周治姚忠吴明刚宋希文佘维娜肖彦羚韦萍
- 关键词:吸附等温线离子交换纯化
- WRK对枯草芽孢杆菌NX-2产出的γ-谷氨酰转肽酶的不可逆抑制动力学被引量:2
- 2010年
- γ-谷氨酰转肽酶(GGT;EC2.3.2.2)催化的酰基转移反应可用于制备各种具有生理活性的谷氨酰化合物,对其开展酶活力不可逆抑制动力学研究对于阐明GGT的作用机制具有重要意义。今以化学抑制剂Woodward's Reagent K(WRK)与枯草芽孢杆菌NX-2产出的GGT进行不可逆抑制反应,根据邹氏理论测得WRK对GGT不可逆抑制反应的微观速率常数ki为0.03015s-1,WRK与酶结合常数KI为1.352mmol·L-1。有抑制剂存在下GGT与供体γ-谷氨酰对硝基苯胺的亲和力常数Km*=3.245mmol·L-1,GGT酰基化最大反应速度Vmax*=0.3771mmol·(L·s)-1。通过对GGT的失活动力学分析得到,失活反应级数为1.313,说明在GGT活性部位至少有一个谷氨酸(或天冬氨酸)残基参与催化反应。
- 肖彦羚周治姚忠宋希文佘维娜刘步云徐虹韦萍
- 关键词:动力学