孙钰
- 作品数:4 被引量:5H指数:2
- 供职机构:军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家科技基础条件平台建设计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 野外实验用培养箱
- 1.本外观设计产品的名称:野外实验用培养箱。;2.本外观设计产品的用途:本外观设计产品用于培养细菌、霉菌、微生物及育种试验。;3.本外观设计产品的设计要点:在于产品的形状。;4.最能表明本外观设计设计要点的图片或照片:立...
- 张达钱军夏志平芦宏斌黄孝胜李乾学王习文李志萍孙瑞姚睿智孙钰曲涵迟航
- 狂犬病病毒G蛋白昆虫细胞表达及其生物信息学分析
- 2016年
- 利用RT-PCR方法从SRV9株细胞毒基因组RNA扩增G蛋白基因,然后将其克隆到p MD18-T载体上,将得到的重组克隆质粒SRV9G-p MD18T进行PCR和测序鉴定。结果表明:克隆的基因全长为1 609 bp,阅读框正确;将此SRV9株G基因亚克隆到供体质粒p Fast Bac Dual后获得了重组供体质粒SRV9G-p Fast Bac Dual;进而将重组供体质粒转化DH10Bac感受态细胞,经2次抗性、蓝白斑筛选及PCR分析后,获得重组穿梭质粒SRV9G-Bacmid;将其转染Sf9细胞48 h后,通过细胞形态学和重组杆状病毒负染电镜观察显示,杆状病毒转染成功;通过Western blot检测显示,Sf9细胞成功表达了SRV9 G蛋白。随后,利用Ex PASy服务器上的在线分析工具和生物信息学分析软件DNAStar对G蛋白的基本性质进行了分析。试验采用昆虫细胞Bac-toBac杆状病毒表达系统,成功表达出G蛋白,并对其进行了生物信息学分析,为蛋白纯化及狂犬病诊断试剂盒的进一步研制奠定了基础。
- 王园园董晓琳孙钰李志萍靳朝夏志平
- 关键词:杆状病毒表达系统生物信息学分析
- 盐酸多西环素壳聚糖微球的制备与评价被引量:2
- 2020年
- 制备盐酸多西环素(doxycycline hydrochloride,DH)缓释微球,并对其进行评价。通过Design-expert软件进行试验设计,以载药量和包封率为考察标准进行优化,采用乳化交联的方法制备壳聚糖包载DH缓释微球,运用紫外-可见分光光度计(UV-VIS Spectrophotometer)、扫描电子显微镜(SEM)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、热重分析(TGA)、X射线衍射(XRD)及拉曼光谱(Raman spectra)对微球的结构、性能和形态进行评价。结果显示,在最佳制备条件下,即壳聚糖为20 g/L,体系内DH质量为0.3 g,转速为910 r/min,液体石蜡12 mL时,所制备载药微球的载药量为56.49%,包封率为61.41%。FT-IR表明壳聚糖包载DH主要以物理作用为主;热失重表明微球物理包合后热稳定性较差;XRD结果表明DH被包载后晶体结构未发生变化。结果表明,本试验成功制备表面光滑、粒径整齐、载药量和包封率较高的DH壳聚糖微球。
- 王洪利孙钰郝良玉邵琳王玥王玥曲晗曲晗王凯李乾学
- 关键词:盐酸多西环素壳聚糖微球包封率载药量
- 犬细小病毒VP2基因的扩增、序列分析及其原核表达被引量:3
- 2016年
- 为了制备犬细小病毒(CPV)VP2蛋白抗原,试验采用PCR方法,以一例疑似CPV感染的出血性肠炎患犬粪便为样品对VP2基因进行扩增,并将该目的基因克隆到pMD18-T质粒上。进行EcoRI/HindⅢ双酶切鉴定及测序鉴定;对该基因进行序列分析后将VP2基因克隆到原核表达载体pET-32a上,并转化E.coliBL21(DE3),诱导表达后进行Ni-NTA亲和层析纯化、Western—blot试验验证其生物活性。结果表明:克隆的基因全长为1790bp;该基因序列与已报道的CPV基因序列同源性高达99.2%~99.9%,氨基酸同源性达99.0%~99.8%,为新CPV-2a基因亚型,其中与泰国株GQ379042.1亲缘性最高,仅1个碱基不同,与猫细小病毒同源性高达98.69%;获得了87ku的目的蛋白。说明该临床病例确为CPV感染。该株细小病毒VP2蛋白的成功表达可为吉林省CPV流行病学调查提供资料,可用于进一步的疫苗研究及免疫学方法的建立。
- 王园园张馨颖陈漫董晓琳孙钰孙瑞王习文李志萍曲晗焦虎平靳朝夏志平
- 关键词:同源性分析遗传进化树原核表达